專利名稱：靛玉紅在降低機(jī)體血中砷含量中的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及靛玉紅在降低機(jī)體血中砷含量中的作用。
背景技術(shù)：
砷廣泛地存在于自然界，在工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中應(yīng)用頗廣，是一種對(duì)機(jī)體有嚴(yán)重危害的毒性物質(zhì)。砷為原生質(zhì)毒物，其易與組織細(xì)胞內(nèi)酶系中巰基結(jié)合，從而抑制酶的活性，引起細(xì)胞代謝障礙，形成對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、胃腸系統(tǒng)的毒性，導(dǎo)致口腔、食道、胃粘膜糜爛、腫脹出血、中毒性肝炎、亞急性黃色肝萎縮、心臟脂肪浸潤(rùn)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)缺氧、腎小球損傷等。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外地方性砷中毒比較嚴(yán)重，在我國(guó)畜牧業(yè)仍在廣泛使用有機(jī)砷作為飼料添加劑(促生長(zhǎng)劑)，導(dǎo)致常見的食物(動(dòng)物性和植物性)均可檢測(cè)出砷，尤其以海產(chǎn)品為最高，作為食物鏈終端的人類更是不可避免在體內(nèi)具有一定的砷蓄積。目前，關(guān)于砷中毒的治療方法主要有補(bǔ)硒治療、用巰基驅(qū)砷治療和利用中藥治療等，但是迄今為止，沒有 任何藥物、任何療法取得滿意的排砷療效。因此，尋找有效的排砷的藥物或療法是一項(xiàng)迫切的任務(wù)。

發(fā)明內(nèi)容
靛玉紅是青黛中所含的主成份，其化學(xué)結(jié)構(gòu)是一個(gè)雙吲哚類化合物。分子式為c16h1(in2o2。靛玉紅對(duì)多種移植性動(dòng)物腫瘤有抑制作用，能破壞白血病細(xì)胞；靛玉紅還能增強(qiáng)動(dòng)物的單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)的吞噬能力。但是之前靛玉紅在醫(yī)學(xué)研究中僅作為抗癌藥物，并在過去文獻(xiàn)顯示靛玉紅對(duì)慢性粒白血病療效顯著。本發(fā)明中將為靛玉紅提供一個(gè)新的用途，即單獨(dú)使用時(shí)有明顯的降低機(jī)體血砷含
量作用。


圖I是空白組和靛玉紅混懸液灌胃組大鼠平均全血砷濃度-時(shí)間曲線圖(Π = 12)
具體實(shí)施例方式一材料與方法I. I實(shí)驗(yàn)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)動(dòng)物采用雄性Sprague-Dawley大鼠,雄性,體重320g 370g,由上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司提供，生產(chǎn)許可證號(hào)為SCXK (滬)2007-0005。飼養(yǎng)環(huán)境為普通級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房，溫度22°C 23°C，相對(duì)濕度40% 70%，使用許可證號(hào)為 SCXK (滬)2006-0003。I. 2藥品與試劑(I) As 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液 Ig · L-1 (As standard stock solution, Ig · L-1) :Merck 公司提供，批號(hào)HC 961324 ；(2)硝酸(Nitric acid) HPLC 級(jí)，Merck 公司，批號(hào) K40748356004 ；
(3)鹽酸(Hydrochloride acid) :HPLC 級(jí)，Merck 公司，批號(hào) K39343417 841 ；(4)氫氟酸(Hydrofluoric acid):優(yōu)級(jí)純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司提供,批號(hào) 20100520 ；(5)高純氦氣(99. 999% ):上海成功氣體有限公司提供；(6)靛玉紅原料純度95%，批號(hào)MRHGG 100313，陜西森弗生物技術(shù)有限公司提供；(7)竣甲基纖維素納(Carboxymethylcellulose sodium, CMC):國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司提供，批號(hào)20100520 ；(8)超純水(purified water) =Millipore AlO 超純水儀制備； I. 3試劑配制(I)砷系列標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制ICP-AES用砷標(biāo)準(zhǔn)溶液精密量取As標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液(Ig · Oo. 25mL,加入50mL容量瓶中，用去離子水配至刻度，即得5mg · L—1的砷標(biāo)準(zhǔn)溶液；精密量取As標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液
0.05mL，加入50mL容量瓶中，用去離子水配至刻度，即得Img · L—1的砷標(biāo)準(zhǔn)溶液；精密量取5mg · Γ1的砷標(biāo)準(zhǔn)溶液5mL，加入50mL容量瓶中，用去離子水配至刻度，即得0. 5mg · I/1的砷標(biāo)準(zhǔn)溶液；精密量取Img · Γ1的砷標(biāo)準(zhǔn)溶液5mL，加入50mL容量瓶中，用去離子水配至刻度，即得0. Img · Γ1 (100 μ g · Γ1)的砷標(biāo)準(zhǔn)溶液。精密量取上述100 μ g -Γ1的砷標(biāo)準(zhǔn)溶液25mL，加入50mL容量瓶中，用去離子水配至刻度，即得50 μ g -Γ1的砷標(biāo)準(zhǔn)溶液；精密量取50 μ g -Γ1的砷標(biāo)準(zhǔn)溶液20mL，加入50mL容量瓶中，用去離子水配至刻度，即得20 μ g · Γ1的砷標(biāo)準(zhǔn)溶液；精密量取20 μ g · Γ1的砷標(biāo)準(zhǔn)溶液25mL，加入50mL容量瓶中，用去離子水配至刻度，即得10 μ g · Γ1的砷標(biāo)準(zhǔn)溶液；精密量取10μ g · Γ1的砷標(biāo)準(zhǔn)溶液25mL，加入50mL容量瓶中，用去離子水配至刻度，即得5 μ g · L—1的砷標(biāo)準(zhǔn)溶液；精密量取5 μ g · L—1的砷標(biāo)準(zhǔn)溶液10mL，加入50mL容量瓶中，用去離子水配至刻度，即得I μ g · L—1的砷標(biāo)準(zhǔn)溶液。(2)0. 5%羧甲基纖維素鈉溶液的配制準(zhǔn)確稱取5. OOg的羧甲基纖維素鈉粉末，置800ml燒杯中，加入500ml蒸餾水，60°C磁力攪拌4h，轉(zhuǎn)移至1000ml容量瓶中，定容至刻度。4°C儲(chǔ)存?zhèn)溆谩?3)藥品混懸液的制備靛玉紅混懸液精密稱取靛玉紅52. 6mg,研磨成細(xì)粉，緩慢加入少量0. 5 % CMC溶液，繼續(xù)研磨至均勻，轉(zhuǎn)移至25mL具塞刻度量筒中，多次轉(zhuǎn)移合并，加至25mL，配制成濃度為2g · L-I的混懸液。臨配現(xiàn)用。I. 4 儀器(I)美國(guó)Perkin Elmer公司0PTIMA-DV 5300型電感耦和等離子發(fā)射光譜儀(ICP-AES)；(2)美國(guó)Agilent公司7500Ce電感耦和等離子質(zhì)譜儀(ICP-MS)；(3)德國(guó)Saturious BT2202S百分之一分析天平(稱取血樣)；(4)上海博迅實(shí)驗(yàn)有限公司SSW型電熱恒溫水槽；·(5)瑞士 Mettler Toledo AL204-IC 精密天平(稱取原料)；(6)瑞士 Mettler Toledo XP-205DU十萬(wàn)分之一精密天平(稱取對(duì)照品)
I. 5儀器設(shè)置(I) ICP-AES儀器方法設(shè)置儀器工作參數(shù)RF功率1300 ，霧化器流量O. 8L .mirT1,輔助氣流量O. 2L .mirT1,等離子氣流量15L .mirT1,螺動(dòng)泵流速15mL .mirT1,積分時(shí)間I 20s,分析波長(zhǎng)118. 979nm。(2) ICP-MS儀器方法設(shè)置儀器工作參數(shù)射頻功率1500 ;采樣深度8. Omm ;載氣流量O. 7L ^mirT1 ;輔助氣流量O. 2L -min^1 ;等離子氣流量15L ^mirT1 ;反應(yīng)氣氦氣；S/C溫度2°C;樣品提升速度O. 5rps ；霧化器Babington高鹽型；采樣錐類型和直徑鎳錐，O. 8mm ;截取錐類型和直徑鎳錐,0. 4mm ;采集模式Spectrum ;點(diǎn)數(shù)/質(zhì)量3 ;重復(fù)次數(shù)3 ;檢測(cè)方式自動(dòng)；分析波長(zhǎng)118. 979nm。
I. 6試驗(yàn)設(shè)計(jì)選取12只大鼠，不禁食，體重為(357. 8± 10. 7) g，隨機(jī)分為2組，每組于給藥前和給藥后 O. 25,0. 5,0. 75、l、2、3、4、6、8、10、12、24、32、48、56、72、80、96、104、120、144h 大鼠眼眶靜脈叢采集抗凝全血O. 5mL，-40°C保存直至分析。表1-1不同組別的給藥安排
權(quán)利要求
1.本發(fā)明是靛玉紅的全新用途；本發(fā)明的特征在于靛玉紅用于降低血液中的重金屬砷的含量。
全文摘要
本發(fā)明公開了靛玉紅的新用途。靛玉紅是青黛中所含的主成份，其化學(xué)結(jié)構(gòu)是一個(gè)雙吲哚類化合物。靛玉紅對(duì)多種移植性動(dòng)物腫瘤有抑制作用，能破壞白血病細(xì)胞；靛玉紅還能增強(qiáng)動(dòng)物的單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)的吞噬能力。本發(fā)明靛玉紅可以降低機(jī)體血中砷含量。砷是一種對(duì)機(jī)體有嚴(yán)重危害的毒性物質(zhì)。研究表明，與空白對(duì)照組比較，服用靛玉紅組大鼠血中砷的濃度明顯降低。
文檔編號(hào)A61P39/02GK102784140SQ20111013242
公開日2012年11月21日 申請(qǐng)日期2011年5月20日 優(yōu)先權(quán)日2011年5月20日
發(fā)明者何迎春, 劉紅霞, 呂映華, 李祿金, 楊娟, 王鯤, 盛玉成, 石勁敏, 許羚, 鄭青山, 陳君超 申請(qǐng)人:上海中醫(yī)藥大學(xué), 王鯤, 許羚