專利名稱：一種磷脂-維生素e琥珀酸聚乙二醇酯膠束的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種磷脂-維生素E琥珀酸聚乙二醇酯膠束在制備促進(jìn)功效成分透皮吸收促滲劑中的應(yīng)用，尤其涉及一種磷脂和維生素E琥珀酸聚乙二醇酯混合的水溶性膠束凍干水溶粉。屬于制藥或化妝品領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
膠束(micelles)是一個(gè)熱力學(xué)穩(wěn)定體系，廣泛用于難溶性藥物的增溶，提高生物利用度。膠束在藥學(xué)中長(zhǎng)期應(yīng)用于難溶藥物的增溶，經(jīng)增溶后藥物可達(dá)到臨床治療所需濃度。表面活性劑被放置到溶液中后，會(huì)迅速降低溶液的界面張力，但是隨著量的增加，表面活性劑分子在水溶液表面的濃度呈上升趨勢(shì)，飽和后，如果繼續(xù)加人表面活性劑，此時(shí)溶液的界面張力不再發(fā)生變化。表面活性劑分子這時(shí)就會(huì)迅速轉(zhuǎn)人溶液內(nèi)部，從而形成親水基向外疏水基向內(nèi)的表面活性劑分子締合體，稱之為膠束[陸彬.膠束給藥系統(tǒng)及其進(jìn)展
(i)[J].中國(guó)藥師雜志，2006，9 (5):428-431.]。混合膠束為兩種或多種表面活性劑按一定比例混合而得的膠束體系，其臨界膠束濃度(critical micelles concentration, CMC)比單一組分膠束低，穩(wěn)定性通常高于單組分膠束，在臨床應(yīng)用中有明顯的優(yōu)勢(shì)，如提高增溶量，提高淋巴或腫瘤靶向性，降低毒性。聚合物膠束制備主要有三種方法:直接溶解法、透析法和自組裝溶劑蒸發(fā)法。自組裝溶劑蒸發(fā)法是先把聚合物溶解到有機(jī)溶劑中，然后在攪拌條件下加入到水中，親水段逐漸進(jìn)入水相，疏水段則 聚集成核，形成聚合物膠束，然后加熱，蒸出有機(jī)溶劑。磷脂是生物膜的組成成分，生物體內(nèi)存在其相關(guān)分解酶，很容易代謝，因而磷脂具有生物降解性和生物兼容性，磷脂分子中的兩條長(zhǎng)脂肪酸鏈?zhǔn)怪哂惺杷?。然而，磷脂分子量較小，形成的囊泡和膠束穩(wěn)定性不夠，作為長(zhǎng)循環(huán)和緩釋材料的應(yīng)用方面受到很大的限制。目前的解決辦法是在其中加入含有長(zhǎng)循環(huán)的組分:聚乙二醇、多聚糖、環(huán)糊精等成為長(zhǎng)循環(huán)磷脂，以提高磷脂膠束或膠囊的穩(wěn)定性。已有文章報(bào)道了不同鏈長(zhǎng)的PEG形成的聚乙二醇一二硬脂酞磷脂酞乙醇胺(PEG-DsPE)膠束的特性。維生素E琥珀酸聚乙二醇酯(TPGS)是維生素E的水溶性衍生物，由親水的極性聚乙二醇頭和親酯的非極性維生素E琥珀酸酯尾組成，臨界膠束濃度為0.026%, HLB值13。TPGS最早由Eastman公司于1950年開發(fā)上市，并且被美國(guó)藥典收載為藥用輔料。在國(guó)外現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于制劑研究中作為增溶劑、吸收促進(jìn)劑、乳化劑、增塑劑以及水難溶性和脂溶性藥物傳遞系統(tǒng)的載體，如固體分散體、眼部給藥的載體、鼻腔內(nèi)給藥的載體等。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)TPGS還可以抑制P-糖蛋白對(duì)藥物的外排作用。TPGS與聚合物單體共聚形成新的聚合物，可以克服一些聚合物的機(jī)械強(qiáng)度過(guò)高，降解速度過(guò)慢的缺點(diǎn)，還可以提高原有聚合物的釋放速率。將TPGS與乳酸共聚得到聚乳酸-聚乙二醇1000維生素E琥珀酸酯共聚物(PLA-TPGS)，用來(lái)制備加載紫杉醇的納米球。Ma等合成了聚己內(nèi)酯-乳酸-聚乙二醇1000維生素E琥珀酸酯共聚物(PCL-PLA-TPGS)，加載多西他賽后，在第5天和第30天的體外釋放速率分別為21.38%和45.29%，明顯快于PCL納米球的釋放(11.12%,22.01% )0同時(shí)TPGS能夠抑制皮膚細(xì)胞內(nèi)的P-糖蛋白將藥物制劑或化妝品功效成分(P-gp底物類的，例如輔酶QlO)外排到血液中，增加在皮膚內(nèi)部的滯留，從而增強(qiáng)療效。TPGS作為藥用輔料的安全性也有一定的保證，Eastman公司的研究人員發(fā)現(xiàn),成年大鼠口服TPGS維生素E琥珀酸酯和聚乙二醇1000的LD5tl值均超過(guò)7g/kg，Zhan等用TPGS-FOL(葉酸)結(jié)合物制備多柔比星納米粒靶向化療葉酸受體豐富的腫瘤細(xì)胞，證明了加入50% TPGS-FOL納米制劑的LD5tl值比不加50% TPGS-FOL制劑的LD5tl值顯著降低。且TPGS在體內(nèi)可生物降解，這都證明TPGS作為維生素E營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑或作為藥用輔料應(yīng)用時(shí)是很安全。TPGS經(jīng)常與其它脂質(zhì)和共聚物形成混合膠束，TPGS的加入能夠顯著增加藥物包封率和膠束的穩(wěn)定性。文獻(xiàn)中已有一些報(bào)導(dǎo):TPGS/聚乙二醇-乙醇酸磷酯(TPGS/PEG-PE)、F127/TPGS (F127/TPGS) ,TPGS/ 聚乳酸乙醇酸-乙二(TPGS/PLGA-PEG)、PEG_DSPE/TPGS 等。因此，TPGS可作為混合膠束的材料，且可以改善其自身CMC過(guò)高的缺點(diǎn)，避免人體體液稀釋時(shí)的不穩(wěn)定。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了一種磷脂-維生素E聚乙二醇琥珀酸酯膠束在制備促進(jìn)功效成分透皮吸收中間體中的應(yīng)用，所述膠束主要由磷脂和維生素E聚乙二醇琥珀酸酯所制成，所述磷脂和維生素E聚乙二醇琥珀酸酯的重量比為1: 10-1: 50。優(yōu)選地，所述磷脂和維生素E聚乙二醇琥珀酸酯的重量比為1: 10。或者，所述磷脂和維生素E聚乙二醇琥珀酸酯的重量比為1: 50。或者，所述磷脂和維生素E聚乙二醇琥珀酸酯的重量比為1: 30。
`
優(yōu)選地，所述的磷脂為天然磷脂、合成磷脂中的一種或幾種的混合物。優(yōu)選地，所述的維生素E聚乙二醇琥珀酸酯為TPGS200、238、400、600、1000、2000、3400、3500、4000、6000中的一種或幾種的混合物。優(yōu)選地，所述膠束是由如下方法所制成:將磷脂和維生素E琥珀酸聚乙二醇酯溶于乙醇后，攪拌；緩緩注入水中，加熱旋蒸回收乙醇，水溶液冷凍干燥，即制得磷脂維生素E琥珀酸聚乙二醇酯膠束水溶粉。本發(fā)明中磷脂-TPGS混合膠束的制備方法為自組裝溶劑蒸發(fā)法，其中溶劑采用乙醇，成本較低，易于工業(yè)化生產(chǎn)。即先將磷脂和維生素E琥珀酸聚乙二醇酯溶于乙醇后，攪拌；緩緩注入水中，加熱回收乙醇，制得磷脂-TPGS水溶性混合膠束。然后再采用溶劑-冷凍干燥法，具體過(guò)程為:將反應(yīng)后的溶液置于-20 °C的冰箱預(yù)凍12h,迅速轉(zhuǎn)移入冷凍干燥機(jī)內(nèi)，真空條件下冷凍干燥48h。即得磷脂-TPGS水溶粉，制得的水溶粉溶于水后可以自組裝成平均粒徑約為25nm的納米膠束。亦可采用溶劑-減壓干燥法和溶劑_噴霧干燥法來(lái)進(jìn)行水溶液干燥。溶劑-減壓干燥法為:將反應(yīng)結(jié)束的混合液置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上，40°C下減壓蒸發(fā)去除反應(yīng)溶劑，殘留物在室溫下繼續(xù)減壓干燥過(guò)夜。溶劑-噴霧干燥法利用高壓泵，以70 200大氣壓的壓力，將混合液通過(guò)霧化器(噴槍)，聚化成10 200 μ m的霧狀微粒與熱空氣直接接觸，進(jìn)行熱交換，簡(jiǎn)便快捷。本發(fā)明的制成的磷脂-TPGS水溶粉復(fù)溶后進(jìn)行了粒徑和外觀測(cè)定。平均粒徑為25nm,粒度大小均勻，分布較窄。且膠束成形良好，圓整度適中，大小較均勻。
本發(fā)明提供的磷脂-TPGS膠束水溶粉具有以下優(yōu)點(diǎn):1)磷脂和TPGS混合形成膠束可以降低膠束的CMC，增加膠束穩(wěn)定性和安全性。2)磷脂和TPGS混合形成膠束可以減小膠束粒徑，使其能夠進(jìn)入皮膚角質(zhì)層細(xì)胞內(nèi)部，與角蛋白相互作用，使角蛋白堆積疏松，降低角質(zhì)層細(xì)胞的致密程度。3)膠束攜帶的磷脂可以在皮膚表面構(gòu)成脂質(zhì)通道，達(dá)到對(duì)化妝品功效成分的雙重促滲作用。4)凍干后制成水溶粉更利于與其他成分的混合，增加穩(wěn)定性，便于保存。5)該磷脂-TPGS水溶粉的整個(gè)制備過(guò)程簡(jiǎn)單可操作，便于工業(yè)化大生產(chǎn)。經(jīng)文獻(xiàn)調(diào)研，目前未有將磷脂-TPGS制成空白混合膠束后冷凍干燥制成水溶粉來(lái)增加化妝品功效成分透皮促滲劑的報(bào)道。
具體實(shí)施方案:實(shí)施例1處方:磷脂40mg，TPGS2000mg·
制備工藝:將磷脂40mg和維生素E琥珀酸聚乙二醇酯2000mg溶于50ml乙醇后，攪拌30min，使混合均勻，緩緩注入蒸餾水中，加熱旋蒸回收乙醇，制得質(zhì)量比為1: 50的磷脂-維生素E琥珀酸聚乙二醇酯混合膠束溶液。將反應(yīng)后的溶液置于_20°C的冰箱預(yù)凍12h，迅速轉(zhuǎn)移入冷凍干燥機(jī)內(nèi)，真空條件下冷凍干燥48h，即得質(zhì)量比為1: 50的磷脂-TPGS膠束水溶粉。實(shí)施例2處方:磷脂50mg，TPGS2000mg制備工藝:將磷脂50mg和維生素E琥珀酸聚乙二醇酯2000mg溶于50ml乙醇后，攪拌30min，使混合均勻，緩緩注入蒸餾水中，加熱旋蒸回收乙醇，制得質(zhì)量比為1: 40的磷脂-TPGS混合膠束。將反應(yīng)后的溶液置于_20°C的冰箱預(yù)凍12h，迅速轉(zhuǎn)移入冷凍干燥機(jī)內(nèi)，真空條件下冷凍干燥48h，即得質(zhì)量比為1: 40的磷脂-TPGS膠束水溶粉。處方:磷脂60mg，TPGS1800mg制備工藝:將磷脂60mg和維生素E琥珀酸聚乙二醇酯ISOOmg溶于50ml乙醇后，攪拌30min，使混合均勻，緩緩注入蒸餾水中，加熱旋蒸回收乙醇，制得質(zhì)量比為1: 30的磷脂-TPGS混合膠束。再將反應(yīng)結(jié)束的混合液置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上，40°C下減壓蒸發(fā)去除反應(yīng)溶劑，殘留物在室溫下繼續(xù)減壓干燥過(guò)夜得質(zhì)量比1: 30的磷脂-TPGS水溶粉。實(shí)施例4處方:磷脂90mg，TPGS1800mg制備工藝:將磷脂90mg和維生素E琥珀酸聚乙二醇酯ISOOmg溶于50ml乙醇后，攪拌30min，使混合均勻，緩緩注入蒸餾水中，加熱旋蒸回收乙醇，制得質(zhì)量比為1: 20的磷脂-TPGS混合膠束。再將反應(yīng)結(jié)束的混合液置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上，40°C下減壓蒸發(fā)去除反應(yīng)溶劑，殘留物在室溫下繼續(xù)減壓干燥過(guò)夜得質(zhì)量比1: 20的磷脂-TPGS水溶粉。實(shí)施例5處方:磷脂180mg，TPGS1800mg制備工藝:將磷脂ISOmg和維生素E琥珀酸聚乙二醇酯ISOOmg溶于50ml乙醇后，攪拌30min，使混合均勻，緩緩注入蒸餾水中，加熱旋蒸回收乙醇，制得質(zhì)量比為1: 10的磷脂-TPGS混合膠束。再利用高壓泵，以70 200大氣壓的壓力，將混合液通過(guò)霧化器(噴槍)，聚化成10 200 μ m的霧狀微粒與熱空氣直接接觸，進(jìn)行熱交換得質(zhì)量比為1: 10的磷脂-TPGS水溶粉。實(shí)施例6處方:磷脂300mg，TPGS1600mg制備工藝:將磷脂300mg和維生素E琥珀酸聚乙二醇酯1600mg溶于50ml乙醇后，攪拌30min，使混合均勻，緩緩注入蒸餾水中，加熱旋蒸回收乙醇，制得質(zhì)量比為1: 10的磷脂-TPGS混合膠束。再利用高壓泵，以70 200大氣壓的壓力，將混合液通過(guò)霧化器(噴槍)，聚化成10 200 μ m的霧狀微粒與熱空氣直接接觸，進(jìn)行熱交換得質(zhì)量比為1: 5的磷脂-TPGS水溶粉。實(shí)驗(yàn)例1.透射電鏡實(shí)驗(yàn)觀察膠束外觀取各種質(zhì)量水溶粉適量，復(fù)溶于一定量的蒸餾水中，滴于電鏡制樣銅網(wǎng)上，吸附一段時(shí)間，1.5%的磷鎢酸負(fù)染，濾紙吸干剩余液體，燈照干燥5min，放入透射電鏡中，觀察形態(tài)。由電鏡圖可知:膠束成形良好，圓整度適中，大小較均勻。2.粒徑儀測(cè)量混合膠束粒徑和電位取各種質(zhì)量比水溶粉適量，復(fù)溶于一定量的蒸餾水中，采用動(dòng)態(tài)激光散射法來(lái)測(cè)定混合膠束的粒徑，粒徑分布和電位。結(jié)果顯示:粒度大小均勻，分布較窄，膠束的平均粒徑25nm。3.熒光探針?lè)y(cè)定混合膠束的臨界膠束濃度(CMC)熒光探針技術(shù)主要是通過(guò)檢測(cè)探針?lè)肿拥臒晒鈴?qiáng)度的變化來(lái)確定體系性質(zhì)的變化，向無(wú)熒光基團(tuán)的高分子溶液中加入熒光探針的分子，它對(duì)溶液體系中的極性改變有著十分靈敏的檢測(cè)能力。熒光測(cè)定條件:發(fā)射光譜波長(zhǎng)λ = 350nm-500nm，激發(fā)光譜波長(zhǎng)λ=334nm ;激發(fā)和發(fā)射設(shè)定參數(shù)分別為5和2.5 ;石英樣品池IcmX Icm0采用1.0X KT4Mol/L的芘探針溶液。取各種質(zhì)量比的水溶粉適量復(fù)溶于一定量的蒸餾水中，再稀釋成一系列濃度，再分別加入到含芘的試管中，稀釋到一定濃度，平衡一段時(shí)間測(cè)熒光光譜，記錄數(shù)據(jù)，計(jì)算得到磷脂-TPGS混合膠束的CMC為0.142mg/ml。比TPGS的CMC(0.120mg/ml)要小。4.水溶粉穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)TPGS的熔點(diǎn)僅為39°C，且磷脂容易發(fā)生氧化降解。根據(jù)《中國(guó)藥典》2010年版中穩(wěn)定性指導(dǎo)原則，設(shè)定溫度25 ± 2°C，相對(duì)濕度60 ± 10 %，光照45001x± 5001x。取水溶粉分別在第1、2、3、6個(gè)月末取部分固體分散體，觀察樣品性 狀。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表所示:由表中性狀可知，水溶粉穩(wěn)定性良好。
權(quán)利要求
1.一種磷脂-維生素E聚乙二醇琥珀酸酯膠束的應(yīng)用，所述膠束主要由磷脂和維生素E聚乙二醇琥珀酸酯所制成，所述磷脂和維生素E聚乙二醇琥珀酸酯的重量比為I: 10-1: 50，其特征在于，該膠束在制備促進(jìn)藥物或化妝品功效成分透皮吸收促進(jìn)劑中的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述磷脂和維生素E聚乙二醇琥珀酸酯的重量比為1: 10。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述磷脂和維生素E聚乙二醇琥珀酸酯的重量比為1: 50。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述磷脂和維生素E聚乙二醇琥珀酸酯的重量比為1: 30。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的磷脂為天然磷脂、合成磷脂中的一種或幾種的混合物。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的維生素E聚乙二醇琥珀酸酯為TPGS200、238、400、600、1000、2000、3400、3500、4000、6000 中的一種或幾種的混合物。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其特征在于所述膠束是由如下方法所制成:將磷脂和維生素E琥珀酸聚乙二醇酯溶于乙醇后，攪拌；緩緩注入水中，回收乙醇，水溶液干燥，即制得磷脂維 生素E琥珀酸聚乙二醇酯膠束水溶粉。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種磷脂和維生素E琥珀酸聚乙二醇酯(TPGS)膠束作為藥物或化妝品功效成分的透皮促滲劑的應(yīng)用。皮膚表皮的角質(zhì)層為多層致密的膜結(jié)構(gòu)，由角質(zhì)細(xì)胞與其間的脂質(zhì)成分組成，二者共同構(gòu)成一道致密的屏障而阻止藥物等外界因素對(duì)其的影響。因此化妝品成分的透皮吸收必須克服角質(zhì)層的屏障作用。本發(fā)明的磷脂-TPGS水溶粉采用乙醇注入法將一定比例的磷脂和TPGS制備成水溶性膠束，冷凍干燥后制得磷脂-TPGS水溶粉，其溶于水后自組裝成平均粒徑約為25nm的納米膠束，能夠進(jìn)入皮膚角質(zhì)層細(xì)胞內(nèi)部，與角蛋白相互作用，角質(zhì)層細(xì)胞的致密程度降低，同時(shí)攜帶的磷脂能構(gòu)成脂質(zhì)通道。這種膠束的穩(wěn)定性非常好，對(duì)各類化妝品功效成分都有較好的促透效果。
文檔編號(hào)A61K47/24GK103142479SQ20131010537
公開日2013年6月12日 申請(qǐng)日期2013年3月29日 優(yōu)先權(quán)日2013年3月29日
發(fā)明者呂慧俠, 張振海, 程鳳儀, 周建平 申請(qǐng)人:中國(guó)藥科大學(xué)