專利名稱：鄰苯胺基苯甲酸衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽、其制備方法及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及鄰苯胺基苯甲酸衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽、其制備方法、及其在 制備預(yù)防和/或治療腫瘤等機體異常增生疾病的藥物或功能食品中的應(yīng)用、以及其在制備 預(yù)防和/或治療機體炎癥、痛疼等疾病的藥物或功能食品中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
惡性腫瘤(癌癥)是嚴(yán)重威脅人類健康的常見病和多發(fā)病。根據(jù)世界衛(wèi)生組織的 報告報道，全球2008年約有1240萬人確診罹患某種類型癌癥，其中760萬人因此死亡。報 告預(yù)計，到2010年，癌癥致死率將超過心臟病，成為全球頭號殺手；到2030年，全球每年可 能將有癌癥患者2640萬人，其中1700萬人將因此死亡。在過去的幾十年中，為了應(yīng)對癌癥， 各國醫(yī)學(xué)科學(xué)家和藥物科學(xué)家一直在不懈地努力，也取得了不俗的成就，但是，截止目前， 還沒有藥物能完全預(yù)防或治愈癌癥。在相當(dāng)長一段時期內(nèi)，細胞毒性藥物仍將是腫瘤藥物 治療的主體。目前，針對腫瘤形成及增殖機制的多環(huán)節(jié)作用的新型抗腫瘤藥物(對腫瘤細 胞具有靶向殺傷作用，而對人體正常組織損傷很小，甚至無)正逐漸成為國內(nèi)、外研究機構(gòu) 關(guān)注的熱點?？茖W(xué)家在很久以前就已注意到炎癥、組織損傷與癌癥密切相關(guān)，在1863年，Rudolf Virchow就指出癌癥常常產(chǎn)生于機體的慢性炎癥部位。事實上，流性病學(xué)調(diào)查表明，慢性乙 肝、慢性胃腸炎和慢性胰腺炎病人患肝癌、胃腸癌與胰腺癌的風(fēng)險顯著增加；同樣地，外傷 病人患癌癥的風(fēng)險也會增加。在此過程中，細胞內(nèi)的環(huán)氧合酶(Cyclo-oxygenase，COX)、 脂氧合酶(Lipoxygenase，L0X)及其代謝產(chǎn)物起著非常關(guān)鍵的作用。這些可能成為預(yù)防和 治療癌癥的革巴點(參閱Coussens LM, Werb Z. (2002) Inflammation and cancer. Nature 420 860-7)。COX及其代謝產(chǎn)物與腫瘤生成、進展、轉(zhuǎn)移及血管的生成密切相關(guān)。在人體內(nèi)， 已鑒定與癌癥相關(guān)的COX至少有二種:C0X-1 (參閱=Xie W，Chipman JG, Robertson DL, et al. (1991)Expression of a mitogen-responsive gene encoding prostaglandin synthase is regulated by mRNA splicing. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88:2692-6)禾口 C0X_2(參閱Hla Τ, Neilson K. (1992)Human cyclooxygenase-2cDNA. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:7384-8)。C0X-1是生理性的，在胃腸道、腎臟、血管平滑肌和血小板中都有 表達，參與人體的正常生理機能；然而，C0X-2在絕大多數(shù)正常組織中無法檢測到，但能被 各種各樣刺激因素(如生長因子、炎癥相關(guān)的細胞介質(zhì))快速誘導(dǎo)表達(參閱=Morita I. (2002)Distinct functions of C0X-1 and C0X-2. Prostaglandins Other Lipid Mediat. 68-69 =165-75) 0在許多腫瘤組織(如胰腺癌、肺癌、結(jié)腸癌、胃腺癌、乳癌和前 列腺癌等)中，C0X-2表達是大量增加的，還伴隨著C0X-2代謝產(chǎn)物前列腺素的增加(參 閱:Molina MA, Sitja-Amau M， Lemoine MG, et al. (1999)Increased cyclooxygenase-2 expression in human pancreatic carcinomas and cell lines growth inhibition bynonsteroidal anti-inflammatory drugs. Cancer Res. 59 :4356_62 ；Wolff H，Saukkonen K，Anttila S，et al. (1998)Expression of cyclooxygenase-2in human lung carcinoma. Cancer Res. 58 4997~5001 ；Uefuji K,Ichikura TiMochizuki H，et al. (1998)Expression of cyclooxygenase-2protein in gastric adenocarcinoma. J. Surg. Oncol. 69 :68_72 ； Hwang D，Scollard D，Byrne J, et al. (1998). Expression of eyelooxygenase-land cyclooxygenase-2in human breast cancer. J. Natl. Cancer Inst. 90 :455_60 ；Kutchera W, Jones DA, Matsunami N， et al. (1996)Prostaglandin Hsynthase 2 is expressed abnormally in human colon cancer :evidence for a transcriptional effect. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93 4816-20 ；Gupta S, Srivastava Μ, Ahmad N， et al. (2000) Over-expression of cyclooxygenase-2in human prostate adenocarcinoma. Prostate 42:73-78)。過度表達的COX-2及其代謝產(chǎn)物參與腫瘤的生成、發(fā)展及血管的增生(參 閱:Qiao L，Kozoni V，Tsioulas GJ, et al. (1995) Selected eicosanoids increase the proliferation rate of human colon carcinoma cell lines and mouse colonocytes in vivo.Biochim. Biophys. Acta 128 :215_23 ；MulIer-Decker K，Neufang G，Berger I， et al. (2002)Transgenic cyclooxygenase-2overexpression sensitizes mouse skin for carcinogenesis.Proc.Natl.Acad.Sci. USA 99 12483-88 ；Prescott SM. (2000) Is cyclooxygenase-2 the alpha and the omega in cancer ？ J Clin. Invest. 105 1511-94)。基因敲除的實驗研究表明，COX-I也與腫瘤的發(fā)展密切相關(guān)(參閱=Chulada PC, Thompson MB， Mahler JF, et al. (2000)Genetic disruption of Ptgs-1， as well as of Ptgs—2，reduces intestinal tumorigenesis in Min mice. Cancer Res. 60 4705-8) ο C0X-2的抑制劑、C0X1/2抑制劑可以抑制腫瘤的生長(參閱:Piazza GA，Rahm AK, Finm TS, et al. (1997)Apoptosis primarily accounts for the growth-inhibitory properties of sulindac metabolites and involves a mechanism that is independent of cyclooxygenase inhibition, cell cycle arrest, and p53 induction. Cancer Res. 57 2452-9 ；Seed MP, Brown JR, Freemantle, et al. (1997)The inhibition of colon_26adenocarcinoma development and angiogenesis by topical diclofenac in 2. 5% hyaluronan. Cancer Res. 57 :1625-9)。 LOX及其代謝產(chǎn)物與腫瘤生成、進展、轉(zhuǎn)移及血管的生成也密切相關(guān)。LOX在催 化花生四烯酸代謝的過程中，根據(jù)將氧原子插入花生四烯酸位置的不同，可分為不同的亞 型 5-L0X、8-L0X、12-L0X 和 15_L0X(參閱=Brash AR. (1999) Lipoxygenases :occurrence, functions, catalysis, and acquisition of substrate. J. Biol. Chem. 274 :23679_82)。 越來越多的研究證據(jù)表明，5-L0X及其代謝產(chǎn)物參與了腫瘤的進展(參閱=Steele VE, Holmes CA, Hawk ET, et al. (1999)Lipoxygenase inhibitors as potential cancer chemo-preventives. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev. 8 467-83)、是月中瘤細胞增殖 的介質(zhì)(參閱Anderson KM，Seed T，Jajeh Α，et al. (1996)An in vivo inhibitor of 5—lipoxygenase，MK886，at micromolar concentration induces apoptosis inU937 and CML cells. Anticancer Res. 16 :2589_99) ；5-L0X的抑制劑可以抑制腫瘤的生長(參閱 Gunning WT, Kramer PM, Steele VE et al. (2002)Chemo-prevention by lipoxygenase and leukotriene pathway inhibitors of vinyl carbamate—induced lung tumors inmice. Cancer Res. 62 4199-201)。其它 8-L0X、12-L0X、15_L0X 及其代謝產(chǎn)物也參與了 腫瘤的生存和發(fā)展，8-L0X和12-L0X及其代謝產(chǎn)物可能促進腫瘤的生成和發(fā)展(參閱 Muga SJ, Thuillier P， PavoneA, et al. (2000)8S-lipoxyge-nase products activate peroxisome proliferators-activated receptor alpha and induce differentiation in murine keratino-cytes. Cell Growth Differ. 11 447-54 ；Honn KV, Tang DG, Gao X，et al. (1994) 12-lipoxygenases and 12(s)-HETE :role in cancer metastasis. Cancer Metastasis Rev. 13 :365_96)，而15-L0X及其代謝產(chǎn)物可能抑制腫瘤的發(fā)展(參 閱:His LC, Wilson LC, Eling TE. (2002)Opposing Effects of 15-Lipoxygenase-l and-2 Metabolites on MAPK Signaling in Prostate. Alteration in peroxisome proliferatoractivated receptor gamma. J. Biol. Chem. 277 40549-56)。一系列的研究表明，在腫瘤組織中LOX及C0X、特別是5-L0X及C0X-2表達和 活性是增加的，抑制5-L0X和C0X-2表達和/或活性可能是預(yù)防和治療癌癥的有效途徑 (參閱RomanoM, Claria J. (2003) Cyclooxygenase-2 and 5-lipoxygenase converging functions on cell proliferation and tumor angiogenesis -implications for cancer therapy. FASEB J 17:1986-95)。非留體類抗炎藥是一類目前在臨床廣泛應(yīng)用的解熱鎮(zhèn) 藥，有的是COX的抑制劑，有的是COX和LOX的雙重抑制劑。托芬那酸，屬于非留體類解 熱鎮(zhèn)痛藥，是COX和LOX的雙重抑制劑，最先由丹麥GEA公司研制幵發(fā)，并首先在丹麥上 市，主要用于治療偏頭痛。最近的研究表明，托芬那酸對實驗動物的人胰腺癌、結(jié)直腸癌 具有明顯的抑制作用，而且可以增加胰腺癌細胞對放射治療的敏感性；其作用機制可能與 托芬那酸能降解腫瘤細胞內(nèi)的核轉(zhuǎn)錄因子(SP1、SP3、SP4)、抑制表皮生長因子(Vascular Endothelial Growth Factor，VEGF)及 VEGF 受體的產(chǎn)生、抑制生存素(Surviv in)生成 和激活 ESE-1/EGR-1 信號通路相關(guān)(參閱Abdelrahim M，Baker CH, Abbruzzese 幾， et al. (2006)Tolfenamic acid and pancreatic cancer growth, angiogenesis, and Sp protein degradation. J. Natl. Cancer Inst. 98 855~68 ；Abdelrahim MBiAbbruzzese CH, Sheikh-Hamad JL, et al. (2007)Regulation of vascular endothelial growth factor receptor-1expression by specificity proteins 1,3, and 4 in pancreatic cancer cells.Cancer Res. 67 3286~94 ；Konduri S,Colon JiBaker CH,et al. (2009)Tolfenamic acid enhances pancreatic cancer cell and tumor response to radiation therapy by inhibiting survivin protein expression. Mol. Cancer Ther. 8 :533_42 ；Lee SH, Bahn JH, Choi CK, et al. (2008)ESE-l/EGR-lpathway plays a role in tolfenamic acid-induced apoptosis in colorectal cancer cells. Mol. Cancer Ther· 7 :3739_50·)0 然而，托芬那酸的抗腫瘤活性不強(參閱:Abdelrahim M，Baker CH，Abbruzzese幾，et al. (2006)Tolfenamic acid and pancreatic cancer growth, angiogenesis, and Sp protein degradation. J. Natl. Cancer Inst. 98 :855-68.)。非留體類抗炎藥在抗腫瘤方面的潛力已引起研究者的重視，早在1999年，就有研 究者申請專利，將含羧基的非留體類抗炎藥修飾成腫胺衍生物后，其可選擇性抑制C0X-2， 并具有抗腫瘤活性(參閱us 6399647B2, Amide derivatives for antiangiogenic and/ or antitumorigenic use)。其在評價修飾物時，是用抑制COX的活性為指標(biāo)的，這可能有 一定的局限性，因為最近的研究表明L0X也參與腫瘤的發(fā)展和血管的生成，而且非LOX和COX作用也可能參與抗腫瘤活性。盡管在專利中，也提到了托芬那酸，但沒有具體的實施例。
托芬那酸是鄰苯胺基苯甲酸的一種。本發(fā)明擬以鄰苯胺基苯甲酸為先導(dǎo)化合物， 修飾合成一系列新的化合物，以增加抗腫瘤活性和改善藥物代謝動力學(xué)為目標(biāo)，找到高效 (抗腫瘤、解熱鎮(zhèn)痛等)、低毒的新化合物。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一類具有抗癌和解熱鎮(zhèn)痛活性的新型低毒化合物及其制 備方法。該類化合物對小鼠的急性毒性較低，ICR小鼠，靜脈給藥，半數(shù)致死量(LD5tl)大 于100mg/kg ；在一定劑量下，對于人肺癌(NCI-460)、肝癌(SMMC-7721, BEL-7402)、胃癌 (BGC-823)、鱗狀上皮癌(KB)、前列腺癌(PC-3)、宮頸癌(HELA)、卵巢癌(H0-8910)、乳腺癌 (BT549)、結(jié)腸癌(Caco-2)、胰腺癌(ASPC-1，PANC-1)、白血病(HL-60，K562)和膠質(zhì)細胞瘤 (U251)細胞株具有較強的抑制作用；對移植裸鼠的人腫瘤細胞也具有明顯的抑制作用；靜 脈注射后，該類化合物能迅速分布到組織，有較長消除半衰期；對熱、化學(xué)性刺激引起的疼 痛具有明顯的抑制作用；而且，該類化合物的制備方法簡便，易于操作，成本很低，非常有利 于產(chǎn)業(yè)化。本發(fā)明采用的技術(shù)方案是如通式I所示的鄰苯胺基苯甲酸衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽
權(quán)利要求
如通式I所示的鄰苯胺基苯甲酸衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽I式中，R1為氫、硝基或氨基；R2為氫、硝基或鹵素；R3為氫或鹵素；R4為氨基、C1 C10烷仲胺基、二C1 C5烷叔胺基、苯仲胺基、苯C1 C3烷氧仲胺基、羥基、C1 C10烷氧基、苯氧基、苯C1 C3烷氧基；若R4是羥基，則R1、R2和R3不同時為氫。F2009101010048C0000011.tif
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鄰苯胺基苯甲酸衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中，R1為 氫、硝基或氨基；R2為氫、硝基、氟或氯；R3為氫或氯；R4為氨基X1-Cltl烷仲胺基、二 C1-C5烷 叔胺基、苯仲胺基、苯C1-C3烷氧仲胺基、羥基、C1-C5烷氧基、苯氧基、苯C1-C3烷氧基；若R4 是羥基，則R1、R2和R3不同時為氫。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的鄰苯胺基苯甲酸衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中，R1為 氫；R2為硝基或氟；R3為氯；R4為氨基、(^-(5烷仲胺基、二C1-Qg叔胺基、苯仲胺基、苯C1-C3 烷氧仲胺基、羥基、C1-C5烷氧基、苯氧基、苯C1-C3烷氧基。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的鄰苯胺基苯甲酸衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽，其選自-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮、-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮甲酯、-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮乙酯、-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮戊酯、-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮苯甲酯、-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮苯酯、-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮單甘油酯、-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮酰胺、-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮酰乙胺、-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮酰正丙胺、-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮酰正辛胺、-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮酰苯甲胺、-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮酰苯胺、-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮酰苯甲氧胺、-氟-2-(3-氯-2-甲基苯基-氨基苯甲酉髮酰二乙醇胺、4-硝基-2-[(3-氯-2-甲基苯基)-氨基]苯甲酸乙酯、 4-硝基-2-[(3-氯-2-甲基苯基)-氨基]苯甲酸酰正丙胺、 6-氯-2-[(3-氯-2-甲基苯基)-氨基]苯甲酸、 2-[(3_氯-2-甲基苯基)-氨基]苯甲酸乙酯、 2-[(3_氯-2-甲基苯基)-氨基]苯甲酸酰正丙胺。
5.制備如權(quán)利要求1所述的鄰苯胺基苯甲酸衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽的方法，其 包括以下步驟a).將式II化合物
6.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項所述的鄰苯胺基苯甲酸衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽在 制備預(yù)防和/或治療腫瘤疾病的藥物或功能食品中的應(yīng)用。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的腫瘤疾病是指肺癌、肝癌、胃癌、鱗狀上皮癌、前列腺癌、宮頸 癌、卵巢癌、乳腺癌、結(jié)腸癌、胰腺癌、白血病或膠質(zhì)細胞瘤。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項所述的鄰苯胺基苯甲酸衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽在 制備預(yù)防和/或治療機體炎癥、痛疼疾病的藥物或功能食品中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明提供了鄰苯胺基苯甲酸衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽、其制備方法、及其在制備預(yù)防和/或治療腫瘤等機體異常增生疾病的藥物或功能食品中的應(yīng)用、以及其在制備預(yù)防和/或治療機體炎癥、痛疼等疾病的藥物或功能食品中的應(yīng)用。
文檔編號A61P29/00GK101985428SQ20091010100
公開日2011年3月16日 申請日期2009年7月29日 優(yōu)先權(quán)日2009年7月29日
發(fā)明者吳耀東, 張濤, 楊嵐, 王樹龍, 葛求富, 郭殿武, 黃濱南 申請人:杭州民生藥業(yè)有限公司