專利名稱：一種藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種含有吉馬酮、呋喃二烯、莪術(shù)二酮、β -欖香烯、莪術(shù)醇、莪術(shù)烯、冰片的藥物組合物。
背景技術(shù)：
人乳頭瘤病毒(HPV)是一種屬于乳多空病毒科的乳頭瘤空泡病毒A屬，是球形DNA病毒，能引起人體皮膚黏膜的鱗狀上皮增殖。目前已分離出130多種，不同的亞型引起不同的臨床表現(xiàn)，侵犯不同的組織部位。按發(fā)癌性分類，可分為低危型HPV和高危型HPV。HPV抵抗力強(qiáng)，能耐受干燥并長期保存，加熱或經(jīng)福爾馬林處理可滅活，所以高溫消毒和2%戊二醛消毒可滅活。HPV主要包括13種亞型，與宮頸癌、宮頸鱗狀上皮瘤變(CIN)的發(fā)生密切相關(guān)。宮頸持續(xù)感染HPV 8-10年即可發(fā)展成宮頸癌，而“宮頸癌”是繼乳腺癌后的第二大婦科癌癥，全球新發(fā)病例46萬/年，亞洲占一半，80%發(fā)生在發(fā)展中國家，每年死于宮頸癌的患者近20萬人。我國新發(fā)病例13萬/年，死于宮頸癌4-5萬/年，發(fā)病率和死亡率均呈現(xiàn)增加趨勢?！皩m頸癌”是目前唯一病因明確的可防治的癌癥，清除HPV是阻斷病程、預(yù)防宮頸癌的決定因素。近十幾年來，以保婦康栓(主要成分為莪術(shù)油和冰片)為代表的中藥被廣泛應(yīng)用于女性生殖道HPV感染的治療，并取得了很好的療效；因此，在此基礎(chǔ)上針對活性成分開發(fā)新的藥物組合物來預(yù)防治療HPV感染以及其誘發(fā)的良性或惡性病變等疾病，特別是對至宮頸癌的HR-HPV感染具有重要意義。義術(shù)，為姜科植物蓬義術(shù)Curcuma phaeocaulis Valeton、廣西義術(shù)C. kwangsiensis S. G. Lee et C. F. Liang 或溫郁金 C. wenyujin Y. H. Chen et C. Ling 的干燥根莖。后者習(xí)稱“溫莪術(shù)”。蓬莪術(shù)含揮發(fā)油1.5% 2%，以莪術(shù)酮含量最高，其次為莪術(shù)醇、莪術(shù)烯醇、莪術(shù)二醇等。此外尚含有莪術(shù)多糖。廣西莪術(shù)含揮發(fā)油1% -I. 2%，油中含20余種成分，含量最高為樟腦、約17. 7%，桉油精約7. 5 %，并含姜烯、莪術(shù)醇、芳姜黃烯、芳姜酮、莪術(shù)雙酮等。溫郁金含揮發(fā)油I. 4% -2. 0%，油中含20余種主成分，主要為莪術(shù)醇，莪術(shù)雙酮、吉馬烯、吉馬酮等，近報(bào)道從中分出α-，β-，δ-欖香烯，其中β-欖香烯為主要抗腫瘤活性成分?！?個(gè)品種莪術(shù)揮發(fā)油化學(xué)成分的比較》(中草藥，第36卷第12期，1785 1787)對上述三個(gè)產(chǎn)地的莪術(shù)進(jìn)行了比較，指出不同品種莪術(shù)雖然有很多共有成分，但質(zhì)量分?jǐn)?shù)差別較大；莪術(shù)酮、莪術(shù)二酮等成分在不同產(chǎn)地莪術(shù)中的量差別顯著。而莪術(shù)的主要成分及含量的明顯差異，會(huì)直接影響莪術(shù)油制劑的療效。CN102058568公開了吉馬酮在制備治療HPV感染藥物中的應(yīng)用；CN102091059公開了莪術(shù)二酮在制備治療HPV感染藥物中的應(yīng)用；CN102091064公開了呋喃二烯在制備治療HPV感染藥物中的應(yīng)用；CN102091065公開了莪術(shù)醇在制備治療HPV感染藥物中的應(yīng)用。上述成分均被證明對HPV感染有效，但由于HPV亞型眾多，各亞型在病毒表型、生長特性、致病性、對藥物的敏感性以及臨床預(yù)后等各方面都存在差異，因而單一成分不可能對所有亞型有效，因此單一成分的制劑不利于臨床的使用。

發(fā)明內(nèi)容
為解決上述現(xiàn)有技術(shù)中所存在的問題，本發(fā)明提供了一種新的藥物組合物及其制劑。本發(fā)明的目的是提供一種藥物組合物，該組合物對HR-HPV (高危型人乳頭瘤病毒)和/或LR-HPV (高危型人乳頭瘤病毒)感染具有很好的治療作用。本發(fā)明的目的是提供一種藥物組合物，該組合物對陰道炎有效。本發(fā)明的目的是提供一種含有該藥物組合物的制劑。本發(fā)明的目的是提供一種含有該藥物組合物的制劑在抗HPV病毒中的應(yīng)用。
本發(fā)明的目的是提供一種含有該藥物組合物的制劑在治療陰道炎中的應(yīng)用。具體而言，本發(fā)明提供了 一種藥物組合物，其特征藥物組合物包含吉馬酮、呋喃二烯、莪術(shù)二酮、欖香烯、莪術(shù)醇、莪術(shù)烯、冰片。上述所述的藥物組合物，包含以下重量份的成分吉馬酮5-16重量份；呋喃二烯10-40重量份；義術(shù)二麗5-25重量份；β _攬香稀4-11重量份；義術(shù)醇1-10重量份；義術(shù)稀8~22重量份:冰片30-90重量份。上述所述的冰片選自天然冰片和/或合成冰片。上述所述的藥物組合物制備成陰道給藥制劑或直腸給藥制劑。所述制劑包括栓劑，軟膏劑、膠囊劑、泡騰片、凝膠劑、洗劑、膜劑或泡沫劑。上述所述的藥物組合物在制備預(yù)防和/或治療人乳頭瘤病毒感染的藥物中的應(yīng)用。其中人乳頭瘤病毒感染包含高危型人乳頭瘤病毒感染和/或低危型人乳頭瘤病毒感染。上述所述的藥物組合物在制備預(yù)防和/或治療陰道炎、宮頸糜爛、宮頸癌的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點(diǎn)和積極效果I、本方明所述的藥物組合物成分明確，質(zhì)量可控；2、本發(fā)明所述的藥物組合物不受原料產(chǎn)地的限制，適合工業(yè)大生產(chǎn)；3、本發(fā)明所述的藥物組合物對HR-HPV和/或LR-HPV、宮頸疾病等均有很好的治療作用，適于臨床廣泛應(yīng)用。藥理實(shí)驗(yàn)例以下通過具體實(shí)施方式
的描述對本發(fā)明作進(jìn)一步說明，但這并非是對本發(fā)明的限制，本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)本發(fā)明的基本思想，可以做出各種修改或改進(jìn)，但是只要不脫離本發(fā)明的基本思想，均在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。HPV核酸擴(kuò)增(PCR)熒光檢測試劑盒購自深圳市匹基生物工程股份有限公司。莪術(shù)油購自江西吉安華美香料提煉廠，根據(jù)中國藥典2010版第一部的要求檢測吉馬酮含量為12. 3%。吉馬酮、呋喃二烯、莪術(shù)二酮、欖香烯、莪術(shù)醇、莪術(shù)烯購自上海順勃生物有限公司。
冰片購自天津利朗化工科技有限公司。試驗(yàn)例I :抗HPV的作用試驗(yàn)試劑HPV核酸擴(kuò)增(PCR)熒光檢測試劑盒(包括DNA提取液I、DNA提取液2、PCR反應(yīng)液、Taq酶、UNG)。其他試劑均為分析純。試驗(yàn)藥物試驗(yàn)I組88mg莪術(shù)油和75mg冰片。試驗(yàn)2組5mg吉馬酮+40mg呋喃二烯+8mg莪術(shù)二酮+IOmg β -欖香烯+4mg莪術(shù)醇+2 Img莪術(shù)烯+75mg冰片。試驗(yàn)3組8mg吉馬酮+32mg呋喃二烯+15mg莪術(shù)二酮+8mg β -欖香烯+7mg莪術(shù)醇+18mg莪術(shù)烯+75mg冰片。試驗(yàn)4組13mg吉馬酮+36mg呋喃二烯+12mg莪術(shù)二酮+7mgP -欖香烯+6mg莪術(shù)醇+14mg莪術(shù)烯+75mg冰片。試驗(yàn)5組14mg吉馬酮+28mg呋喃二烯+20mg莪術(shù)二酮+8mg0 -欖香烯+2mg莪術(shù)醇+16mg莪術(shù)烯+75mg冰片。試驗(yàn)6組10mg吉馬酮+20mg呋喃二烯+25mg莪術(shù)二酮+IlmgP -欖香烯+IOmg莪術(shù)醇+12mg莪術(shù)烯+75mg冰片。試驗(yàn)方法HPV感染標(biāo)本制備從醫(yī)院門診確診HPV感染采取的標(biāo)本(HPV類型為16、52混合型，屬于粘膜低危型)，集中到I只離心管中，稱重30mg，用玻璃勻漿器勻漿，在加入5ml生理鹽水，配成6mg/ml的離體混懸液,備用。樣品處理方法用移液槍吸取25 μ I樣品液和25 μ I標(biāo)本懸池液至15ml離心管中，振搖均勻，使樣品與標(biāo)本能充分作用，置37°C水浴箱中培養(yǎng)，在樣品處理標(biāo)本I天、3天、5天、7天后，各取I組進(jìn)行以下試驗(yàn)。HPV-DNA的提取從水浴箱中取出經(jīng)樣品處理的標(biāo)本混懸液，按試劑盒步驟提取DNA :加入50 μ I生理鹽水，混勻后再加入100 μ I DNA提取液，振搖均勻，1200r/min離心lOmin，棄去上清液，再加入25 μ I DNA提取液2，充分混勻，100°C沸水煮lOmin，1200r/min離心lOmin,上清液極為HPV-DNA模板。DNA擴(kuò)增取檢測試劑盒中的PCR反應(yīng)液37.6μ1，Taq DNA聚合酶0.4μ1，UNGO. 03μ I于PCR反應(yīng)管中，在加入HPV-DNA模板2 μ 1，扣嚴(yán)管蓋，置于定量PCR儀上循環(huán)擴(kuò)增。HPV-DNA經(jīng)高溫變性、低溫退火及延伸進(jìn)行循環(huán)擴(kuò)增，循環(huán)程序設(shè)置為37°C，5min;94°C，Imin ；95°C，5sec ；60°C，30sec，循環(huán) 40 次。量標(biāo)準(zhǔn)曲線用熒光探針檢測定量，按照檢測試劑盒要求，設(shè)立4個(gè)系列濃度的HPV-DNA 定量陽性標(biāo)準(zhǔn)品，依次為 5 X 107/ml，5 X 106/ml，5 X 105/ml，5 X 104/ml，經(jīng) PCR 檢測(其檢測靈敏度為1\103/!111，結(jié)果小于該濃度者判定為陰性)。以起始拷貝數(shù)的自然對數(shù)為橫坐標(biāo)，循環(huán)闕值為縱坐標(biāo)，得到的回歸直線為標(biāo)準(zhǔn)曲線，據(jù)此對樣品的擴(kuò)增倍數(shù)進(jìn)行定量。試驗(yàn)結(jié)果見表I。表I :不同試驗(yàn)藥物對HPV感染的DNA作用結(jié)果
權(quán)利要求
1.一種藥物組合物，其特征藥物組合物包含吉馬酮、呋喃二烯、莪術(shù)二酮、β-欖香烯、莪術(shù)醇、莪術(shù)烯、冰片。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的藥物組合物，其中所述的藥物組合物，包含以下重量份的成分 吉馬酮5-16重量份； 呋喃二烯10-40重量份； 莪術(shù)二酮5-25重量份； β -欖香烯4-11重量份； 莪術(shù)醇1_10重量份； 莪術(shù)烯8-22重量份； 冰片30-90重量份。
3.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的藥物組合物，其中所述的冰片選自天然冰片和/或合成冰片。
4.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的藥物組合物制備成陰道給藥制劑或直腸給藥制劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制劑，其中制劑包括栓劑，軟膏劑、膠囊劑、泡騰片、凝膠劑、洗劑、膜劑或泡沫劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的藥物組合物在制備預(yù)防和/或治療人乳頭瘤病毒感染的藥物中的應(yīng)用。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其中人乳頭瘤病毒感染包含高危型人乳頭瘤病毒感染和/或低危型人乳頭瘤病毒感染。
8.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的藥物組合物在制備預(yù)防和/或治療陰道炎、宮頸糜爛、宮頸癌的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，本發(fā)明提供了一種藥物組合物，該組合物中含有吉馬酮、呋喃二烯、莪術(shù)二酮、β-欖香烯、莪術(shù)醇、莪術(shù)烯、冰片，該藥物組合物成分明確，質(zhì)量可控；本發(fā)明所述的藥物組合物可以用于制備陰道給藥制劑或直腸給藥制劑；本發(fā)明所述的藥物組合物對HR-HPV和/或LR-HPV、宮頸疾病等具有很好的治療作用，適于臨床廣泛應(yīng)用。
文檔編號A61K31/015GK102716115SQ20121024170
公開日2012年10月10日 申請日期2012年7月13日 優(yōu)先權(quán)日2012年7月13日
發(fā)明者馮仲異, 徐揚(yáng), 陳容, 黃嫻 申請人:海南碧凱藥業(yè)有限公司