專利名稱：一種從靈芝中分離出的新化合物及其制備方法和醫(yī)藥用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種從靈芝中分離出的具有抗腫瘤作用并可抑制腫瘤細(xì)胞的多重耐藥性(MDR)的新化合物。本發(fā)明還涉及該化合物的制備方法。本發(fā)明還涉及以該化合物在制備治療腫瘤藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
腫瘤的多重耐藥性(Muti-drug Resistance, MDR)被臨床上認(rèn)為是引起化療失敗的最常見(jiàn)的原因，對(duì)腫瘤進(jìn)行的時(shí)間較長(zhǎng)的化療常常導(dǎo)致癌細(xì)胞的選擇性存活，這些存活的癌細(xì)胞對(duì)于結(jié)構(gòu)上和功能上不相關(guān)的廣譜的化療藥物具有交叉抗性。可能導(dǎo)致MDR的幾種機(jī)理包括細(xì)胞由于適應(yīng)化療而未能進(jìn)入程序性死亡(細(xì)胞凋亡)、或藥物未能到達(dá)或作用于細(xì)胞內(nèi)靶位。抗癌治療，例如藥物治療、生物治療或放射治療都必須擊中腫瘤的細(xì)胞內(nèi)靶位，并且隨后引起某種形式的細(xì)胞改變或破壞。與直接殺死腫瘤細(xì)胞不同，大多數(shù)情況下抗癌藥物引發(fā)細(xì)胞程序性死亡，或細(xì)胞凋亡的放生。因此，對(duì)多種藥物的抗性可能是由于細(xì)胞的防御機(jī)制引起，該細(xì)胞防御機(jī)制廣泛地限制藥物進(jìn)入細(xì)胞靶位，或阻止該細(xì)胞進(jìn)入細(xì)胞凋亡并被殺傷。多種機(jī)制參與腫瘤細(xì)胞耐藥性的形成，其中ATP結(jié)合盒膜通道轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白是產(chǎn)生MDR的主要原因，而ABCBl、ABCCl和ABCG2與腫瘤MDR關(guān)系最為密切。因此尋找高效低毒且對(duì)化療藥物藥代動(dòng)力學(xué)無(wú)影響的MDR逆轉(zhuǎn)劑是有效克服MDR的方法之一。在治療癌癥方面植物藥具有較長(zhǎng)的使用歷史。已將中藥用于改善癌癥病人的普通狀況，但將中藥用于MDR癌細(xì)胞的具體根除上還未廣泛應(yīng)用。自然界提供了許多植物來(lái)源的抗癌藥物，例如長(zhǎng)春花堿、紫杉醇、雷公藤內(nèi)酯醇等。這些從植物中分離的有效成分表現(xiàn)出良好的抗腫瘤效應(yīng)，且相對(duì)于人工合成的化學(xué)藥物來(lái)說(shuō)，其毒性較低的優(yōu)點(diǎn)使這些植物來(lái)源的抗癌藥物在腫瘤治療中得到了大量的應(yīng)用。中藥?kù)`芝是多孔菌科靈芝屬真菌植物赤芝Wanoderma lucidum(Leys, ex Fr.) Karst]或紫芝[Ganoderma japonicum(Fr.) Lloyd]的干燥子實(shí)體。性溫、味甘，具有補(bǔ)中益氣、滋補(bǔ)強(qiáng)壯、扶正固本的功效，臨床上常用于腫瘤的治療或輔助治療。對(duì)于靈芝抗腫瘤有效成分的研究，主要針對(duì)靈芝多糖和靈芝三萜類成分。抗腫瘤研究結(jié)果表明，靈芝三萜對(duì)多種腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移都有抑制作用。對(duì)靈芝三萜類成分的研究在20世紀(jì)八十年代達(dá)到了高潮，目前已經(jīng)有130多種靈芝三萜類成分被分離鑒定，我們?cè)卺槍?duì)靈芝抗腫瘤作用的有效成分研究中，分離鑒定了一個(gè)新的三萜類化合物，命名為赤芝酸A乙酯(Ethyl Iucidenates Α)。藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)表明，該化合物具有抗腫瘤活性，并且可抑制腫瘤細(xì)胞的MDR。 針對(duì)該化合物經(jīng)過(guò)試驗(yàn)，確定了合理的制備方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種從靈芝中分離出的具有抗腫瘤作用的新化合物(赤芝酸 A乙酯)。
本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供制備該化合物方法。本發(fā)明的再一目的在于提供該化合物在制備治療腫瘤藥物中的應(yīng)用。根據(jù)本發(fā)明的一方面，提供具有下列化學(xué)結(jié)構(gòu)式(I )的化合物
權(quán)利要求
1. 一種結(jié)構(gòu)式(I )的化合物，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下
2.權(quán)利要求1的所述的化合物的制備方法，包括以下步驟A)將靈芝用醇或醇溶液提取一次或2次以上，過(guò)濾，收集濾液，再減壓濃縮干燥，獲得醇提取物；B)將醇提取物加水，以石油醚萃取脫脂后，再以乙酸乙酯萃取，獲得的乙酸乙酯萃取液再以飽和NaHCOyK溶液萃取，取乙酸乙酯相蒸干，獲得粗品；C)將獲得的粗品進(jìn)行色譜分離純化，得到純的式(I)化合物。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的化合物的制備方法，其特征在于步驟C)的粗品進(jìn)行色譜分離純化的步驟包括如下1)將粗品在硅膠上進(jìn)行柱層析，用氯仿-甲醇梯度洗脫，獲得氯仿-甲醇的體積比為99 1的洗脫物；2)取氯仿-甲醇的體積比為99 1的洗脫物再進(jìn)行硅膠柱層析，用石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，得到石油醚-乙酸乙酯的體積比為4 1的洗脫部位；3)取此部位經(jīng)制備型高效液相色譜分離，甲醇-水梯度洗脫，從甲醇-水的體積比為 75 25的洗脫部位得到純的化合物(1)。
4.權(quán)利要求1所述的結(jié)構(gòu)式(I)的化合物或其衍生物在制備治療腫瘤藥物中的應(yīng)用。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于所述的腫瘤為人慢性粒細(xì)胞白血病細(xì)胞株 K562、人髓系白血病細(xì)胞株HL60、人Burkitt淋巴瘤細(xì)胞株CA46、人結(jié)腸癌細(xì)胞株SW1116、 人結(jié)腸癌細(xì)胞株SW480、人肝癌細(xì)胞株SMMC7221、人肝癌細(xì)胞株!fepG2。
6.權(quán)利要求1所述的結(jié)構(gòu)式(I)的化合物或其衍生物在制備治療抑制腫瘤細(xì)胞MDR 的藥物中的作用。
7.含有治療有效量的權(quán)利要求1所述的結(jié)構(gòu)式(I)的化合物或其衍生物的藥物組合物。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的的藥物組合物，其中結(jié)構(gòu)式(I)的化合物和/或其衍生物的含量大于50%以上，尤其90%以上。
全文摘要
一種從靈芝中分離出的新化合物及其制備方法和醫(yī)藥用途。本發(fā)明公開(kāi)了一種下式結(jié)構(gòu)的化合物，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下其制備方法為將靈芝用醇或醇溶液提取一次或2次以上，過(guò)濾，收集濾液，再減壓濃縮干燥，獲得醇提取物；將醇提取物加水，以石油醚萃取脫脂后，再以乙酸乙酯萃取，獲得的乙酸乙酯萃取液再以飽和NaHCO3水溶液萃取，取乙酸乙酯相蒸干，獲得粗品；將獲得的粗品進(jìn)行色譜分離純化，得到上述化合物。本發(fā)明所述的化合物能作為治療腫瘤的藥物。
文檔編號(hào)A61K31/575GK102311475SQ201110200649
公開(kāi)日2012年1月11日 申請(qǐng)日期2011年7月18日 優(yōu)先權(quán)日2011年7月18日
發(fā)明者張志強(qiáng), 李鵬, 許建華 申請(qǐng)人:福建醫(yī)科大學(xué)