專利名稱：含有粉防己堿及粉防己堿類衍生物和組蛋白去乙?；敢种苿┑乃幬锝M合物及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藥物組合物及其在制備治療癌癥的藥物中的應(yīng)用，具體涉及含有粉防己堿及粉防己堿類衍生物和組蛋白去乙?；敢种苿┑乃幬锝M合物及其在制備治療 結(jié)腸癌、肝癌、肺癌、腎癌、胃癌、腦瘤、肉瘤、胰腺癌、卵巢癌、乳腺癌、前列腺癌或神經(jīng)膠質(zhì) 瘤的藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
世界衛(wèi)生組織調(diào)查報(bào)告表明，全球癌癥狀況日益嚴(yán)重，今后20年新患者的人數(shù)將 由目前的每年1000萬增加到1500萬，因癌癥而死亡的人數(shù)也將由每年的600萬增加至 1000萬。其中肺癌為常見的惡性腫瘤之一，源于各級(jí)支氣管上皮，分為細(xì)胞肺癌和非小細(xì)胞 肺癌；原發(fā)性肝癌為發(fā)生在肝細(xì)胞與肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞的癌變，是人類最常見的惡性腫瘤 之一；結(jié)腸癌的發(fā)病與環(huán)境、生活習(xí)慣，尤其是飲食方式有關(guān)。一般認(rèn)為高脂肪飲食和纖維 素不足是主要發(fā)病原因。隨著生活水平的提高，飲食結(jié)構(gòu)的改變，結(jié)腸癌的發(fā)病率呈逐年上 升趨勢(shì)；神經(jīng)膠質(zhì)瘤是發(fā)生于神經(jīng)外胚層的腫瘤，其起源于神經(jīng)間質(zhì)細(xì)胞，為顱內(nèi)常見惡性 腫瘤，約占顱內(nèi)腫瘤的35-60%。目前已上市的抗腫瘤藥物較多，如烷化劑藥物、抗代謝藥物、抗腫瘤抗生素、免疫調(diào) 節(jié)劑等，但是大多藥物由于毒性較大，病人不耐受。隨著對(duì)腫瘤的發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制研究越 來越清楚，分子靶向治療多種惡性腫瘤受到了廣泛的關(guān)注和高度重視。分子靶向藥物選擇性 高、廣譜有效，其安全性優(yōu)于細(xì)胞毒性化療藥物，是目前腫瘤治療領(lǐng)域發(fā)展的新方向。粉防己堿，又稱漢防己甲素(Tetrandrine)，是從中草藥粉防己的根塊中提取的雙 芐基異喹啉類生物堿，是粉防己的主要有效成分。早期研究表明粉防己堿具有消炎、鎮(zhèn)痛、 降壓、抗纖維化等廣泛的藥理作用。臨床用于治療高血壓、矽肺、肝纖維化等疾病，已取得了 較好療效。近年來的研究證實(shí)，粉防己堿不僅能直接抑制腫瘤生長(zhǎng)，并且具有放療增敏、逆 轉(zhuǎn)耐藥、減輕放化療毒副反應(yīng)的作用，在抗腫瘤治療中顯示出良好的臨床應(yīng)用前景。組蛋白去乙?；敢种苿┚哂幸种颇[瘤細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期阻滯、誘導(dǎo)細(xì)胞分化 及促進(jìn)細(xì)胞凋亡的作用。其中SAHA已上市，此外MS-275、LBH589、Trichostatin(TSA)、 Π(228及西達(dá)苯胺等多種組蛋白去乙?；敢种苿┻M(jìn)入臨床研究。隨著腫瘤分子生物學(xué)的研究進(jìn)展，腫瘤分子靶向治療已成為腫瘤研究的熱點(diǎn)，在 多種腫瘤的治療中發(fā)揮了重要的作用。然而，大部分腫瘤的生物學(xué)行為并非由單一信號(hào)傳 導(dǎo)通路所支配，而是多個(gè)信號(hào)傳導(dǎo)通路共同起作用的，因此合理的聯(lián)合用藥，有單用藥物不 可比擬的優(yōu)越性，聯(lián)合用藥針對(duì)多靶點(diǎn)進(jìn)行靶向治療將不僅旨在減少或延緩耐藥性的出 現(xiàn)、降低毒性，而且通過多種藥物對(duì)癌細(xì)胞殺傷的協(xié)同作用取得更好的療效。

發(fā)明內(nèi)容
針對(duì)以上技術(shù)缺陷，本發(fā)明提供一種藥物組合物及其在制備治療結(jié)腸癌、肝癌、肺癌、腎癌、胃癌、腦瘤、肉瘤、胰腺癌、卵巢癌、乳腺癌、前列腺癌或神經(jīng)膠質(zhì)瘤的藥物中的應(yīng) 用，具體為含有粉防己堿及粉防己堿類衍生物和組蛋白去乙酰化酶抑制劑的藥物組合物及 其在制備治療結(jié)腸癌、肝癌、肺癌、腎癌、胃癌、腦瘤、肉瘤、胰腺癌、卵巢癌、乳腺癌、前列腺 癌或神經(jīng)膠質(zhì)瘤的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明含有粉防己堿及粉防己堿類衍生物和組蛋白去乙酰化酶抑制劑的藥物組 合物中，所述粉防己堿及粉防己堿類衍生物可以為粉防己堿、其衍生物及其結(jié)構(gòu)類似物。本發(fā)明藥物組合物中的粉防己堿及粉防己堿類衍生物優(yōu)選為粉防己堿，其相應(yīng) 的結(jié)構(gòu)式如式I所示。 本發(fā)明藥物組合物中，所述組分包括但不限于粉防己堿藥物本身，還可以是其可 藥用的鹽、水合物或衍生物等。本發(fā)明中，所述組蛋白去乙?；敢种苿┛梢詾槿魏谓Y(jié)構(gòu)類型的組蛋白去乙酰 化酶抑制劑的藥物，如羥肟酸類、環(huán)肽類、苯甲酰胺類、脂肪酸類等，具體可以為但不限于 如，suberoylanilide hydroxamic acid (SAHA)、Trichostatin (TSA)、LBH589、MS—275、 depsipeptide (FK228)、apicidin、西達(dá)苯胺、丁酸鈉、苯基丁酸鈉。本發(fā)明藥物組合物中組蛋白去乙酰化酶抑制劑優(yōu)選為SAHAJrichostatin(TSA)、 LBH589 和 MS-275。其中SAHA 為 JMC，38，8，1995，1411-1413 和 JMC, 48,15，2005，5047-5051 中所記載
的式II的化合物 其中LBH-589由Novartis公司研發(fā)，商品名為panobinstat，正處于II期臨床，其
結(jié)構(gòu)式為式III所示 本發(fā)明藥物組合物中，所述組分不限于上述藥物本身，還可以是它們的水合物、類似物、衍生物及其它有機(jī)或無機(jī)的鹽。本發(fā)明含有粉防己堿及粉防己堿類衍生物和組蛋白去乙酰化酶抑制劑的藥 物組合物中，粉防己堿及粉防己堿類衍生物與組蛋白去乙?；敢种苿┑哪柋葹?1.0-20.0 0.001-5.0;進(jìn)一步優(yōu)選粉防己堿及粉防己堿類衍生物與組蛋白去乙酰化酶抑 制劑的摩爾比為2. 5-10. 0 0.005-2.0。本發(fā)明含有粉防己堿及粉防己堿類衍生物和組蛋白去乙酰化酶抑制劑的藥物組 合物可以用于制備治療各種腫瘤的藥物，所述腫瘤包括但不限于結(jié)腸癌、肝癌、肺癌、腎癌、 胃癌、腦瘤、肉瘤、胰腺癌、卵巢癌、乳腺癌、前列腺癌或神經(jīng)膠質(zhì)瘤。本發(fā)明優(yōu)選粉防己堿及粉防己堿類衍生物和組蛋白去乙?；敢种苿┑乃幬锝M 合物優(yōu)選用于制備治療肝癌、結(jié)腸癌、肺癌及神經(jīng)膠質(zhì)瘤的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明藥物組合物在制備治療肝癌的藥物中的應(yīng)用中，粉防己堿與組蛋白去乙酰 化酶抑制劑的摩爾比為2. 5-10.0 0.01-2.0。本發(fā)明藥物組合物在制備治療肝癌的藥物中的應(yīng)用中，所述粉防己堿和 SAHA的摩爾比為2. 5-10.0 1. 0-2. 0 ；進(jìn)一步優(yōu)選所述粉防己堿和SAHA的摩爾比為 5. 0-10.0 1.5-2. 0 ；最佳為所述粉防己堿和SAHA的摩爾比為10. 0 2.0。本發(fā)明藥物組合物在制備治療肝癌的藥物中的應(yīng)用中，所述粉防己堿和LBH589 的摩爾比為2. 5-10.0 0.01-0.025 ；進(jìn)一步優(yōu)選所述粉防己堿和LBH589的摩爾比為 5.0-10.0 0. 015-0. 025 最佳為所述粉防己堿和LBH589的摩爾比為7. 5 0.025、或 10. 0 0.025。本發(fā)明藥物組合物在制備治療結(jié)腸癌的藥物中的應(yīng)用中，所述粉防己堿和LBH589 的摩爾比為2. 5-10.0 0.01-0. 03;進(jìn)一步優(yōu)選所述粉防己堿和LBH589的摩爾比為 5. 0-10. 0 0. 02-0. 03 ；最佳優(yōu)選所述粉防己堿和LBH589的摩爾比為10. 0 0. 03。本發(fā)明藥物組合物在制備治療肺癌的藥物中的應(yīng)用中，所述粉防己堿和LBH589 的摩爾比為2. 5-10.0 0.01-0.03 ；進(jìn)一步優(yōu)選所述粉防己堿和LBH589的摩爾比為 5. 0-10. 0 0. 02-0. 03 ；最佳優(yōu)選所述粉防己堿和LBH589的摩爾比為10. 0 0. 03。本發(fā)明藥物組合物在制備治療神經(jīng)膠質(zhì)瘤的藥物中的應(yīng)用中，所述粉防己堿與組 蛋白去乙?；敢种苿┑哪柋葹?. 5-7. 5 0.005-1.0。本發(fā)明藥物組合物在制備治療神經(jīng)膠質(zhì)瘤的藥物中的應(yīng)用中，所述粉防己堿 和SAHA的摩爾比為2. 5-7. 5 0. 25-1. 0 ；進(jìn)一步優(yōu)選所述粉防己堿和SAHA的摩爾比為 5.0-7.5 0.5-1.0:最佳為所述粉防己堿和SAHA的摩爾比為7. 5 1.0。本發(fā)明藥物組合物在制備治療神經(jīng)膠質(zhì)瘤的藥物中的應(yīng)用中，所述粉防己堿和 LBH589的摩爾比為2. 5-7. 5 0. 005-0. 015 ；進(jìn)一步優(yōu)選所述粉防己堿和LBH589的摩爾比 % 5. 0-7. 5 0. 01-0. 015 最佳為所述粉防己堿和LBH589的摩爾比為7. 5 0.015。含有粉防己堿及粉防己堿類衍生物和組蛋白去乙?；敢种苿┙M合物在制備治 療結(jié)腸癌、肝癌、肺癌、腎癌、胃癌、腦瘤、肉瘤、胰腺癌、卵巢癌、乳腺癌、前列腺癌或神經(jīng)膠 質(zhì)瘤的藥物的應(yīng)用中，在將本發(fā)明組合物制成同時(shí)給藥的藥劑的方案中，粉防己堿及粉防 己堿類衍生物和組蛋白去乙?；敢种苿┛梢院谕环N藥物制劑如片劑或膠囊中，也可 以將粉防己堿及粉防己堿類衍生物和組蛋白去乙?；敢种苿┓謩e做成制劑，如分別做成 片劑或膠囊，并采用本領(lǐng)域常規(guī)的方式將它們包裝或結(jié)合在一起，患者然后按照藥品說明書的指示同時(shí)服用；在將本發(fā)明組合物制成先后給藥的藥劑的方案中，可以將粉防己堿及 粉防己堿類衍生物和組蛋白去乙酰化酶抑制劑分別做成不同的制劑，并采用本領(lǐng)域常規(guī)的 方式將它們包裝或結(jié)合在一起，患者然后按照藥品說明書指示的先后順序進(jìn)行服用，或?qū)?上述組合物中的兩種成分制成一種控釋的制劑，先釋放組合物中的一種成分、然后再釋放 組合物中的另一種成分，患者只需要服用該控釋組合物制劑；在將本發(fā)明組合物制備成交 叉給藥的藥劑的方案中，可以將粉防己堿及粉防己堿類衍生物和組蛋白去乙?；敢种苿?分別做成不同的制劑，并采用本領(lǐng)域常規(guī)的方式將它們包裝或結(jié)合在一起，患者然后按照 藥品說明書指示的交叉順序服用，或者將該藥物組合物制備成粉防己堿及粉防己堿類衍生 物和組蛋白去乙?；敢种苿┙徊驷尫诺目蒯屩苿?。粉防己堿及粉防己堿類衍生物和組蛋白去乙酰化酶抑制劑組合物在制備治療結(jié) 腸癌、肝癌、肺癌、腎癌、胃癌、腦瘤、肉瘤、胰腺癌、卵巢癌、乳腺癌、前列腺癌或神經(jīng)膠質(zhì)瘤 的藥物中的應(yīng)用中，所述組合物中的粉防己堿及粉防己堿類衍生物和組蛋白去乙酰化酶抑 制劑可以同時(shí)使用或以任何先后的順序使用，如可以將粉防己堿及粉防己堿類衍生物和組 蛋白去乙?；敢种苿┩瑫r(shí)給患者服用；也可以先將粉防己堿及粉防己堿類衍生物藥物給 患者服用、然后服用組蛋白去乙?；敢种苿?，或先服用組蛋白去乙?；敢种苿⑷缓蠓?用粉防己堿及粉防己堿類衍生物藥物，對(duì)于兩者服用的時(shí)間間隔沒有特別要求，但優(yōu)選服 用兩種藥物的時(shí)間間隔不超過一天；或者兩種藥物交替給藥。本發(fā)明中，可將本發(fā)明粉防己堿及粉防己堿類衍生物和組蛋白去乙?；敢种苿?采用本領(lǐng)域常規(guī)的方法制備成適于胃腸道給藥或非胃腸道給藥的藥物制劑，本發(fā)明優(yōu)選將 粉防己堿及粉防己堿類衍生物和組蛋白去乙?；敢种苿┲瞥晌改c道給藥的藥物制劑，其 制劑形式可以為常規(guī)片劑或膠囊、或控釋、緩釋制劑。在本發(fā)明粉防己堿及粉防己堿類衍 生物和組蛋白去乙?；敢种苿┙M合物的藥物制劑中，根據(jù)不同的制劑形式和制劑規(guī)格， 所述組合物在制劑中的含量可以為質(zhì)量計(jì)為1_99%，優(yōu)選為10% -90% ；制劑使用的輔料 可采用本領(lǐng)域常規(guī)的輔料，以不和本發(fā)明組合物發(fā)生反應(yīng)或不影響本發(fā)明藥物的療效為前 提；所述制劑的制備方法可采用本領(lǐng)域常規(guī)的制備方法進(jìn)行制備。本發(fā)明中，組合物的制備方法沒有什么限制，粉防己堿及粉防己堿類衍生物和組 蛋白去乙?；敢种苿﹥烧呖梢赃M(jìn)行直接混合然后做成制劑，或分別和/或相應(yīng)的輔料混 合分別做成制劑，然后再按照本領(lǐng)域常規(guī)的方式包裝在一起，或分別和相應(yīng)的輔料混合然 后再混合做成制劑。本發(fā)明中的藥物組合物的給藥劑量根據(jù)給藥對(duì)象、給藥途徑或藥物的制劑形式不 同可以進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兓?，但以保證該藥物組合物在哺乳動(dòng)物體內(nèi)能夠達(dá)到有效的血藥濃度 為前提。本發(fā)明分別進(jìn)行了粉防己堿及粉防己堿類衍生物和組蛋白去乙?；敢种苿┙M 合殺死H印G2、PLC/PRF/5(肝癌細(xì)胞株)、A549(肺癌細(xì)胞株)、DLD1 (結(jié)腸癌細(xì)胞株)、 D37(神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞株)的試驗(yàn)，結(jié)果提示，本發(fā)明粉防己堿及粉防己堿類衍生物和組蛋 白去乙?；敢种苿┙M合治療肝癌、結(jié)腸癌、肺癌及神經(jīng)膠質(zhì)瘤具有顯著的協(xié)同效應(yīng)，提高 了藥物的療效，降低了用藥劑量，減少了副作用的發(fā)生。
具體實(shí)施例方式結(jié)合以下實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的闡述，但本發(fā)明并不受限于此。實(shí)施例試劑和方法細(xì)胞IfepG2、PLC/PRF/5 (肝癌細(xì)胞株)、A549 (肺癌細(xì)胞株)、DLD1 (結(jié)腸癌細(xì) 胞株)、D 37 (神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞株)，均購(gòu)自 American Type Culture Collection (ATCC)， Rockville, MD, USA。藥品以下實(shí)施例中所用藥物組合物均按下列方法1或方法2所述來制備；粉防 己堿購(gòu)自Sigma ；組蛋白去乙?；敢种苿┚次墨I(xiàn)合成而得，SAHA的合成參考文獻(xiàn)為 J.Med. Chem.，1995，38，1411-1413 ；LBH-589 的合成參考文獻(xiàn)為W02002022577。方法1 準(zhǔn)確稱量相應(yīng)的藥物組合物的各組分，以二甲基亞砜分別溶解，各自配成 10mM的貯存液，在-20°C下保存，使用時(shí)用新鮮的培養(yǎng)基稀釋到合適的濃度，然后各自取1 微升的各組分的溶液，混合在一起備用。所有的試驗(yàn)中，二甲基亞砜的最終濃度應(yīng)< 5g/L， 以便不影響細(xì)胞的活性。將所有的細(xì)胞于含10%小牛血清、100kU/L青霉素、100mg/L鏈霉素的RPMI 1640 培養(yǎng)基中，37°C、5% C02的濕度條件下培養(yǎng)，在加藥的前一天，在六孔板上進(jìn)行細(xì)胞接種 2X105/孔，然后向細(xì)胞中加入按上述方法制備的藥物組合物溶液，使各組分達(dá)到其工作濃 度，具體見表1中第1-27。藥物處理后，通過臺(tái)盼藍(lán)(Trypan Blue)測(cè)定細(xì)胞死亡，細(xì)胞通過在37°C用胰蛋 白酶鈉/EDTA進(jìn)行胰酶化作用10分鐘。因?yàn)樗劳龅募?xì)胞從培養(yǎng)器上脫落進(jìn)入培養(yǎng)基中，通 過在1200轉(zhuǎn)/分鐘下離心收集所有的細(xì)胞，然后再用培養(yǎng)基重新懸浮沉淀物，與臺(tái)盼藍(lán)染 料混合。染色之后，用光學(xué)顯微鏡和血細(xì)胞計(jì)數(shù)器進(jìn)行計(jì)數(shù)。被染料染成藍(lán)色的計(jì)為死亡 細(xì)胞。隨機(jī)選取500個(gè)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，死亡的細(xì)胞以占總計(jì)數(shù)細(xì)胞的百分比來表達(dá)。方法2 準(zhǔn)確稱量相應(yīng)的藥物組合物的各組分，以二甲基亞砜分別溶解，各自配成 10mM的貯存液，在-20°C下保存。使用時(shí)用新鮮的培養(yǎng)基稀釋到合適的濃度，然后各自取1 微升的各組分的溶液備用。所有的試驗(yàn)中，二甲基亞砜的最終濃度應(yīng)< 5g/L，以便不影響細(xì) 胞的活性。將所有的細(xì)胞于含10%小牛血清、100kU/L青霉素、100mg/L鏈霉素的RPMI 1640 培養(yǎng)基中，37°C、5% C02的濕度條件下培養(yǎng)，在加藥的前一天，在六孔板上進(jìn)行細(xì)胞接種 2X105/孔，然后以任意次序向細(xì)胞中加入按上述方法制備的藥物組合物的各組分溶液，使 各組分達(dá)到其工作濃度，具體見表1中第28-51。藥物處理后，通過臺(tái)盼藍(lán)(Trypan Blue)測(cè)定細(xì)胞死亡，細(xì)胞通過在37°C用胰蛋 白酶鈉/EDTA進(jìn)行胰酶化作用10分鐘。因?yàn)樗劳龅募?xì)胞從培養(yǎng)器上脫落進(jìn)入培養(yǎng)基中，通 過在1200轉(zhuǎn)/分鐘下離心收集所有的細(xì)胞，然后再用培養(yǎng)基重新懸浮沉淀物，與臺(tái)盼藍(lán)染 料混合。染色之后，用光學(xué)顯微鏡和血細(xì)胞計(jì)數(shù)器進(jìn)行計(jì)數(shù)。被染料染成藍(lán)色的計(jì)為死亡 細(xì)胞。隨機(jī)選取500個(gè)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，死亡的細(xì)胞以占總計(jì)數(shù)細(xì)胞的百分比來表達(dá)。下列表1所示的藥物組合中，第1-12的組合按方法1，第13-21的組合按方法2制備。表 1
8 實(shí)施例1不同比例的粉防己堿(Tetrandrine)與SAHA的組合協(xié)同增效促進(jìn)H印G2 細(xì)胞死亡試驗(yàn)，見表2。表2 在考察相關(guān)化合物導(dǎo)致肝癌細(xì)胞株H印G2細(xì)胞死亡的試驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)當(dāng)單獨(dú)使用 5. Oil M粉防己堿或更低濃度、1.5 iiM SAHA或更低濃度時(shí)只有很少量的細(xì)胞死亡；即使增 加單藥的濃度至10. Oil M粉防己堿、2. Oil MSAHA時(shí)，也只有約10-20%細(xì)胞死亡；而當(dāng)兩 者在較低濃度下合用時(shí)(5.0^11粉防己堿+1.511|1 SAHA)則產(chǎn)生明顯的協(xié)同作用，導(dǎo)致約 32%的癌細(xì)胞死亡；當(dāng)兩者以10. Oil M粉防己堿+2. Oil M SAHA的比例合用時(shí)，則產(chǎn)生更加 顯著的協(xié)同作用，導(dǎo)致約85%的癌細(xì)胞死亡。實(shí)施例2不同比例的粉防己堿與LBH589的組合協(xié)同增效促進(jìn)H印G2細(xì)胞死亡試 驗(yàn)，見表3。表3 在考察相關(guān)化合物導(dǎo)致肝癌細(xì)胞株H印G2細(xì)胞死亡的試驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)當(dāng)單獨(dú)使用 5.0UM粉防己堿、0. 015 u M LBH589或更低濃度時(shí)只有很少量的細(xì)胞死亡；即使增加單藥 的濃度至10. 0 u M粉防己堿、0. 025 u MLBH589時(shí)，也只有約20%細(xì)胞死亡；而當(dāng)兩者在較低 濃度下合用時(shí)(5.011|1粉防己堿+0.01511|0^11589)則產(chǎn)生較明顯的協(xié)同作用，導(dǎo)致約20% 的癌細(xì)胞死亡；當(dāng)兩者以10. 0 u M粉防己堿+0. 025 u MLBH589的比例合用時(shí)，則產(chǎn)生更加顯 著的協(xié)同作用，導(dǎo)致91%的癌細(xì)胞死亡。實(shí)施例3不同比例的粉防己堿與LBH589的組合協(xié)同增效促進(jìn)PLC/PRF/5細(xì)胞死 亡試驗(yàn)，見表4。表 4 在考察相關(guān)化合物導(dǎo)致肝癌細(xì)胞株P(guān)LC/PRF/5細(xì)胞死亡的試驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)當(dāng)單獨(dú)使 用5. Oil M粉防己堿、0.015 iiM LBH589或更低濃度時(shí)只有約15%的細(xì)胞死亡；即使增加單 藥的濃度至7. 5 u M粉防己堿、0. 025 u MLBH589時(shí)，也只有約20-25%細(xì)胞死亡；而當(dāng)兩者在 較低濃度下合用時(shí)(5.011|1粉防己堿+0.01511|0^11589)則產(chǎn)生較明顯的協(xié)同作用，導(dǎo)致約 34%的癌細(xì)胞死亡；當(dāng)兩者以7. 5 ii M粉防己堿+0. 025 u M LBH589的比例合用時(shí)，則產(chǎn)生更 加顯著的協(xié)同作用，導(dǎo)致95%的癌細(xì)胞死亡。實(shí)施例4不同比例的粉防己堿與LBH589的組合協(xié)同增效促進(jìn)DLD1細(xì)胞死亡試 驗(yàn)，見表5。表 5 在考察相關(guān)化合物導(dǎo)致結(jié)腸癌細(xì)胞株DLDl細(xì)胞死亡的試驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)當(dāng)單獨(dú)使用 5. O μ M粉防己堿、0.02 μ M LBH589或更低濃度時(shí)只有約10%的細(xì)胞死亡；即使增加單藥的 濃度至10. O μ M粉防己堿、0. 03 μ M LBH589時(shí)，也只有約20%細(xì)胞死亡；而當(dāng)兩者在較低濃 度下合用時(shí)(5.0 μ M粉防己堿+0.02 μ M LBH589)則產(chǎn)生較明顯的協(xié)同作用，導(dǎo)致約23%的 癌細(xì)胞死亡；當(dāng)兩者以10. 0 μ M粉防己堿+0. 03 μ MLBH589的比例合用時(shí)，則產(chǎn)生更加顯著 的協(xié)同作用，導(dǎo)致82%的癌細(xì)胞死亡。實(shí)施例5不同比例的粉防己堿與LBH589的組合協(xié)同增效促進(jìn)Α549細(xì)胞死亡試 驗(yàn)，見表6。表6 在考察相關(guān)化合物導(dǎo)致肺癌細(xì)胞株Α549細(xì)胞死亡的試驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)當(dāng)單獨(dú)使用 5. O μ M粉防己堿、0.02 μ M LBH589或更低濃度時(shí)只有約15%的細(xì)胞死亡；即使增加單藥的 濃度至10. O μ M粉防己堿、0. 03 μ M LBH589時(shí)，也只有約20%細(xì)胞死亡；而當(dāng)兩者在較低濃 度下合用時(shí)(5.0 μ M粉防己堿+0.02 μ M LBH589)則產(chǎn)生較明顯的協(xié)同作用，導(dǎo)致約30%的 癌細(xì)胞死亡；當(dāng)兩者以10. 0 μ M粉防己堿+0. 03 μ M LBH589的比例合用時(shí)，則產(chǎn)生更加顯著 的協(xié)同作用，導(dǎo)致76%的癌細(xì)胞死亡。實(shí)施例6不同比例的粉防己堿與SAHA的組合協(xié)同增效促進(jìn)D37細(xì)胞死亡試驗(yàn)，見 表7。表 7 在考察相關(guān)化合物導(dǎo)致神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞株D37細(xì)胞死亡的試驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)當(dāng)單獨(dú)使 用5. 0 μ M粉防己堿、0. 5 μ M SAHA或更低濃度時(shí)只有很少量的細(xì)胞死亡；即使增加單藥的 濃度至7. 5 μ M粉防己堿、1. 0 μ M SAHA時(shí)，也只有約20%細(xì)胞死亡；而當(dāng)兩者在較低濃度下 合用時(shí)(5.0 μ M粉防己堿+OjyMSAHA)則產(chǎn)生較明顯的協(xié)同作用，導(dǎo)致約21%的癌細(xì)胞死 亡；當(dāng)兩者以7. 5 μ M粉防己堿+1. 0 μ M SAHA的比例合用時(shí)，則產(chǎn)生更加顯著的協(xié)同作用， 導(dǎo)致99%的癌細(xì)胞死亡。實(shí)施例7不同比例的粉防己堿與LBH589的組合協(xié)同增效促進(jìn)D 37細(xì)胞死亡試 驗(yàn)，見表8。表8 在考察相關(guān)化合物導(dǎo)致神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞株D37細(xì)胞死亡的試驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)當(dāng)單獨(dú)使 用5. ομ M粉防己堿、0.01 μ M LBH589或更低濃度時(shí)只有很少量的細(xì)胞死亡；即使增加單 藥的濃度至7. 5 μ M粉防己堿、0. 015 μ MLBH589時(shí)，也只有約20%癌細(xì)胞死亡；而當(dāng)兩者在 較低濃度下合用時(shí)(5.(^11粉防己堿+0.0111|0^!1589)則產(chǎn)生較明顯的協(xié)同作用，導(dǎo)致約26 %的癌細(xì)胞死亡；當(dāng)兩者以7. 5 μ M粉防己堿+0. 015 μ MLBH589的比例合用時(shí)，則產(chǎn)生更加顯著的協(xié)同作用，導(dǎo)致99%的癌細(xì)胞死亡。
權(quán)利要求
一種藥物組合物，其特征在于，所述藥物組合物含有粉防己堿及粉防己堿類衍生物與組蛋白去乙?；敢种苿?。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，所述粉防己堿及粉防己堿類衍生 物與組蛋白去乙?；敢种苿┑哪柋葹?.0-20.0 0.001-5.0。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的藥物組合物，其特征在于，所述粉防己堿及粉防己堿類衍生 物與組蛋白去乙?；敢种苿┑哪柋葹?. 5-10. 0 0. 005-2. 0。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的藥物組合物，其特征在于，所述粉防己堿及粉防己堿類衍生 物為粉防己堿；組蛋白去乙酰化酶抑制劑為SAHA、MS275、LBH589、TSA或西達(dá)苯胺。
5.權(quán)利要求1-4任一所述的藥物組合物在制備治療結(jié)胃癌、腦瘤、卵巢癌、乳腺癌、結(jié) 腸癌、肝癌、肺癌、腎癌、肉瘤、胰腺癌、前列腺癌或神經(jīng)膠質(zhì)瘤的藥物中的應(yīng)用。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，在制備治療肝癌的藥物中的應(yīng)用中，粉防 己堿與組蛋白去乙酰化酶抑制劑的摩爾比為2. 5-10. 0 0. 01-2. 0。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于，在制備治療肝癌的藥物中的應(yīng)用中，所述 粉防己堿和SAHA的摩爾比為2. 5-10. 0 1. 0-2. 0 ；或所述粉防己堿和LBH589的摩爾比為 2. 5-10. 0 0. 01-0. 025。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的應(yīng)用，其特征在于，在制備治療肝癌的藥物中的應(yīng)用中，所述 粉防己堿和SAHA的摩爾比為5. 0-10. 0 1. 5-2. 0 ；或所述粉防己堿和LBH589的摩爾比為 5.0-10.0 0.015-0.025。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于，在制備治療肝癌的藥物中的應(yīng)用中， 所述粉防己堿和SAHA的摩爾比為10.0 2.0 ；或所述粉防己堿和LBH589的摩爾比為 7. 5 0. 025 或 10. 0 0. 025。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于，在制備治療結(jié)腸癌、肺癌的藥物中的應(yīng) 用中，所述粉防己堿和LBH589的摩爾比為2. 5-10. 0 0.01-0.03。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的應(yīng)用，其特征在于，在制備治療結(jié)腸癌、肺癌的藥物中的應(yīng) 用中，所述粉防己堿和LBH589的摩爾比為5. 0-10. 0 0.02-0.03。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的應(yīng)用，其特征在于，在制備治療結(jié)腸癌、肺癌的藥物中的應(yīng) 用中，所述粉防己堿和LBH589的摩爾比為10 0.03。
13.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，在制備治療神經(jīng)膠質(zhì)瘤的藥物的應(yīng)用 中，所述粉防己堿與組蛋白去乙酰化酶抑制劑的摩爾比為2. 5-7. 5 0. 005-1. 0。
14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的應(yīng)用，其特征在于，在制備治療神經(jīng)膠質(zhì)瘤的藥物的應(yīng)用 中，所述粉防己堿與SAHA的摩爾比為2. 5-7. 5 0. 25-1. 0 ；或所述粉防己堿與LBH589的 摩爾比為 2.5-7.5 0.005-0.015。
15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的應(yīng)用，其特征在于，在制備治療神經(jīng)膠質(zhì)瘤的藥物的應(yīng)用 中，所述粉防己堿與SAHA的摩爾比為5. 0-7. 5 0. 5-1. 0 ；或所述粉防己堿與LBH589的摩 爾比為 5. 0-7. 5 0. 01-0. 015。
16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的應(yīng)用，其特征在于，在制備治療神經(jīng)膠質(zhì)瘤的藥物的應(yīng)用 中，所述粉防己堿與SAHA的摩爾比為7. 5 1.0 ；或所述粉防己堿與LBH589的摩爾比為 7. 5 0. 015。
17.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物組合物中的粉防己堿及粉防己堿類衍生物和組蛋白去乙?；敢种苿┩瑫r(shí)使用或以任何先后的順序使用.
全文摘要
本發(fā)明涉及一種含有粉防己堿及粉防己堿類衍生物與組蛋白去乙?；?HDAC)抑制劑的藥物組合物及其在制備治療結(jié)腸癌、肝癌、肺癌、腎癌、胃癌、腦瘤、肉瘤、胰腺癌、卵巢癌、乳腺癌、前列腺癌或神經(jīng)膠質(zhì)瘤的藥物中的應(yīng)用，本發(fā)明藥物組合物具有顯著的協(xié)同效應(yīng)，提高了藥物的療效，降低了給藥劑量，減少了副作用的發(fā)生。
文檔編號(hào)A61K31/167GK101836989SQ200910129319
公開日2010年9月22日 申請(qǐng)日期2009年3月19日 優(yōu)先權(quán)日2009年3月19日
發(fā)明者趙鐳 申請(qǐng)人:鼎泓國(guó)際投資(香港)有限公司