專(zhuān)利名稱(chēng)：：雙黃連可溶性粉制備工藝與應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種具有抑菌、解熱、鎮(zhèn)咳之功效的中獸藥制劑及其制備工藝與應(yīng)用，特別是雙黃連可溶性粉制備工藝與應(yīng)用，本發(fā)明屬于中藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
：呼吸系統(tǒng)感染性疾病是影響畜禽養(yǎng)殖業(yè)的最常見(jiàn)病之一，特別是近年來(lái)混合感染、繼發(fā)感染、耐藥菌感染的出現(xiàn)，呈現(xiàn)發(fā)病率高、病源復(fù)雜化、常規(guī)藥物難以控制等特點(diǎn)，給養(yǎng)殖業(yè)帶來(lái)嚴(yán)重的損失。目前，治療此類(lèi)疾病常用化學(xué)合成的非甾體類(lèi)抗炎鎮(zhèn)痛藥，藥物殘留較為嚴(yán)重。中獸藥上，2005年版《中國(guó)獸藥典》收載了"雙黃連口服液"，但其有效成分相對(duì)較低，臨床用藥需要大劑量才會(huì)產(chǎn)生療效。雙黃連可溶性粉為純中藥提取的浸膏粉，有效成分含量較高，水溶性較好，適用于大規(guī)模養(yǎng)殖中的混飼、混飲給藥，且不易產(chǎn)生耐藥性，是畜禽呼吸道感染性疾病的必備良藥。畜禽呼吸系統(tǒng)感染在臨床上主要表現(xiàn)為體溫升高，可伴發(fā)疼痛，引起生理功能紊亂，產(chǎn)生各種炎癥反應(yīng)等。畜禽呼吸系統(tǒng)疾病主要是由于畜禽感染多種病原微生物導(dǎo)致，通過(guò)藥效試驗(yàn)證明，雙黃連可溶性粉具有抑菌、解熱、鎮(zhèn)咳作用，臨床治療畜禽呼吸系統(tǒng)疾病具有良好療效。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明目的是提供一種具有抑菌、解熱、鎮(zhèn)咳之功效的中獸藥雙黃連可溶性粉制備工藝與應(yīng)用。本發(fā)明雙黃連可溶性粉由下列重量份數(shù)的藥物組成:金銀花800-1000份、黃苳800-1000份、連翹1600-2000份。本發(fā)明雙黃連可溶性粉制備方法如下將上述金銀花加水煎煮二次，第一次1小時(shí)，第二次45分鐘，合并煎液，減壓濃縮(l:22.5)，冷至4560。C，加2040%石灰乳，使PH值達(dá)11.013.0，濾過(guò)，沉淀加23倍量95%乙醇，放置過(guò)60目篩，用50%硫酸調(diào)節(jié)PH至3.04.0，充分?jǐn)噭颍瑸V過(guò)，濾液用4050°/。的氫氧化鈉溶液中和至PH值到6.57.5，濾過(guò)，濾液減壓濃縮，干燥，備用；黃芩加水煎煮三次，第一次2小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至適量，用鹽酸調(diào)PH值至1.02.0,608(TC保溫，靜置，濾過(guò)，沉淀加適量水，攪勻，用20400/o氫氧化鈉溶液調(diào)PH值至7.0，加等量乙醇，攪拌使溶解，濾過(guò)，濾液用鹽酸調(diào)PH值至1.02.0，608(TC保溫，靜置，濾過(guò)，沉淀依次用適量水及不同濃度的乙醇洗至PH至7.0，揮盡乙醇，減壓干燥，備用；連翹粉碎，加水煎煮三次，每次1.5小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液于60。C以下減壓濃縮至相對(duì)密度為1.101.20(室溫)的清膏，放冷，加入46倍量乙醇，攪勻，靜置24小時(shí)，沉淀，濾過(guò)，濾液減壓回收乙醇，濃縮液噴霧干燥，與上述金銀花、黃芩提取物粉碎成細(xì)粉，加葡萄糖適量，混勻，6(TC以下干燥，即得。應(yīng)說(shuō)明的以下幾點(diǎn)鑒于大規(guī)模養(yǎng)殖時(shí)的需要，養(yǎng)殖戶(hù)可以選擇混飼、混飲給藥。雙黃連可溶性粉在獸藥臨床的具有抑菌、解熱、鎮(zhèn)咳作用，對(duì)畜禽呼吸系統(tǒng)疾病具有良好療效。金銀花對(duì)傷寒桿菌、副傷寒桿菌、大腸桿菌、變形桿菌、綠膿桿菌、百曰咳桿菌、霍亂弧菌、葡萄球菌、鏈球菌、肺炎雙球菌、腦膜炎球菌等均有抑制作用；對(duì)上呼吸道感染有關(guān)的不同病毒株有抑制或延緩細(xì)胞病變作用。黃芩對(duì)多種球菌、桿菌和耐藥的金黃色葡萄球菌有抑制作用，對(duì)流感病毒及皮膚真菌也有抑殺效果，體外試驗(yàn)有抑制阿米巴原蟲(chóng)生長(zhǎng)和殺滅鉤端螺旋體的作用。連翹對(duì)多種革蘭陽(yáng)性及陰性細(xì)菌均有抑制作用，在體外可抑制傷寒桿菌、副傷寒桿菌、大腸桿菌、痢疾桿菌、白喉?xiàng)U菌及霍亂弧菌、葡萄球菌、鏈球菌等。雙黃連可溶性粉能明顯抑制傷寒副傷寒疫苗導(dǎo)致的家兔發(fā)熱；能明顯延長(zhǎng)小白鼠咳嗽潛伏期和減少咳嗽次數(shù)；對(duì)臨床自然發(fā)病的上呼吸道感染病豬能明顯起到解熱、止咳作用。雙黃連可溶性粉也能明顯抑制由角叉菜膠引發(fā)的足腫脹炎癥癥狀，能拮抗由組織胺引起的毛細(xì)血管通透性增加；降低由酵母菌或大腸桿菌引起的體溫升高；降低由0.7%醋酸所致的扭體反應(yīng)。本發(fā)明臨床應(yīng)用效果見(jiàn)如下實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)l5雙黃連可溶性粉抑菌作用效果試驗(yàn)如下用瓊脂平板二倍稀釋法進(jìn)行。雙黃連可溶性粉原液最高、最低濃度分別為864mg/ml、6.75mg/ml。將濃度為1.2X107cfU/ml菌液5ul點(diǎn)種于系列濃度含藥平板上，并以不含藥的血平板點(diǎn)種作空白對(duì)照。37-C培養(yǎng)18h，觀察并記錄結(jié)果，平板有菌落生長(zhǎng)用"+"，無(wú)菌落生長(zhǎng)用"-"表示。結(jié)果顯示，雙黃連可溶性粉對(duì)金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血性鏈球菌、肺炎鏈球菌、大腸桿菌、傷寒桿菌6株細(xì)菌均有不同程度的體外抑菌作用。其中對(duì)肺炎鏈球菌、溶血性鏈球菌的作用最強(qiáng)，最低抑菌濃度為13.5mg/ml和54mg/ml;對(duì)金黃色葡萄球菌抑菌作用稍弱，MIC為108mg/ml，對(duì)表皮葡萄球菌的MIC為216mg/ml，對(duì)大腸桿菌、傷寒桿菌的MIC為432mg/ml。實(shí)驗(yàn)2雙黃連可溶性粉對(duì)傷寒副傷寒疫苗致熱家兔解熱作用試驗(yàn)效果如下傷寒副傷寒疫苗致家兔發(fā)熱模型將傷寒副傷寒疫苗稀釋后耳靜脈注射，lml/kg.bw，lh后測(cè)其升溫程度，以〉0.8"C視為合格。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分成為5組，艮P:(1)對(duì)照組試驗(yàn)兔稱(chēng)取體重，實(shí)驗(yàn)前一天下午和當(dāng)天上午，分別用電子測(cè)溫計(jì)，測(cè)肛溫(超過(guò)39"C或一日體溫波動(dòng)X).5'C者剔除)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物15只，體溫在38.639.2"C范圍，體溫波動(dòng)在0.3r，為適用試驗(yàn)兔，取其平均值做為基礎(chǔ)體溫。(2)高劑量組發(fā)熱實(shí)驗(yàn)動(dòng)物14只，每l升水添加本品4g，于給藥后0.5、1、1.5、2、3、4、5h測(cè)肛溫，與基礎(chǔ)體溫比較，計(jì)算溫差。(3)中劑量組發(fā)熱實(shí)驗(yàn)動(dòng)物15只，每l升水添加本品2g，于給藥后0.5、1、1.5、2、3、4、5h測(cè)肛溫，與基礎(chǔ)體溫比較，計(jì)算溫差。(4)低劑量組發(fā)熱實(shí)驗(yàn)動(dòng)物15只，每l升水添加本品lg，于給藥后0.5、1、1.5、2、3、4、5h測(cè)肛溫，與基礎(chǔ)體溫比較，計(jì)算溫差。(5)阿司匹林組發(fā)熱實(shí)驗(yàn)動(dòng)物14只，于給藥后0.5、1、1.5、2、3、4、5h測(cè)肛溫，與基礎(chǔ)體溫比較，計(jì)算溫差。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)下表l:6<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>對(duì)傷寒副傷寒疫苗致熱家兔的解熱作用(x±s，n=10)注經(jīng)t檢驗(yàn)，與對(duì)照組相比，p〈0.05，**p<0.01由上表說(shuō)明，本發(fā)明雙黃連可溶性粉解熱作用起效快，32min起效，60rnin較好，其中高、中兩個(gè)劑量組也可明顯拮抗發(fā)熱高峰，低劑量組拮抗發(fā)熱高峰也顯示了一定的優(yōu)勢(shì)，顯示本藥有較前的解熱作用。實(shí)驗(yàn)3雙黃連可溶性粉鎮(zhèn)咳作用試驗(yàn)效果如下小鼠60只按體重隨機(jī)分為4組，灌胃給藥1次(0.2ml/10g)后lh，每鼠分別放入500ml的廣口瓶?jī)?nèi)，瓶口懸一片滴有25%氨水0.3ml的濾紙，30秒后取出，觀察并記錄小鼠2分鐘內(nèi)的咳嗽次數(shù)和咳嗽潛伏期，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。表2本發(fā)明雙黃連可溶性粉對(duì)氨水引咳的小鼠咳嗽潛伏期和咳嗽次數(shù)的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>從表2看出，本發(fā)明雙黃連可溶性粉高、中劑量組對(duì)氨水所致的小鼠咳嗽均有明顯的抑制作用，并能延長(zhǎng)其咳嗽潛伏期。實(shí)驗(yàn)4雙黃連可溶性粉對(duì)自然發(fā)病治療試驗(yàn)結(jié)果如下(1)病例的選擇按臨床診斷觀察和實(shí)驗(yàn)室檢査進(jìn)行診斷確定為非傳染性發(fā)熱性病豬，體溫40.(TC41.3。C，頻發(fā)咳嗽，呼吸加快，拱腰顫栗。另選健康豬只20頭作為健康對(duì)照組，試驗(yàn)前觀察豬群的采食、體溫等情況，臨床觀察正常方準(zhǔn)許參與試驗(yàn)。表3臨床自然病例分組及處理藥物組別處理動(dòng)物數(shù)雙黃連可溶性粉低劑量組感染，每1升水添加本品lg，連用3d20只雙黃連可溶性粉中劑量組感染，每l升水添加本品2g，連用3d20只雙黃連可溶性粉高劑量組感染，每l升水添加本品4g，連用3d20只安乃近藥物對(duì)照組感染，每包兌水50kg，連用3d20只感染對(duì)照組感染、不給藥20只健康對(duì)照組不感染、不給藥20只(2)人工發(fā)熱病例觀察指標(biāo)觀察試驗(yàn)兔正常體溫、造模體溫、給藥后0.5、1、1.5、2、3、4、5h體溫，試驗(yàn)結(jié)果以體溫降幅均值和標(biāo)準(zhǔn)偏差表示，組間均值比較比較進(jìn)行t檢驗(yàn)分析。(3)臨床自然病例觀察指標(biāo)主要觀察發(fā)熱、咳嗽、食欲、呼吸、精神等指標(biāo)綜合評(píng)定療效。①治愈試驗(yàn)5日內(nèi)，病豬體溫、咳嗽、食欲、呼吸及精神等癥狀均恢復(fù)正常者；②顯效試驗(yàn)5日內(nèi)，病豬體溫、呼吸正常，咳嗽、食欲、精神明顯好轉(zhuǎn)；③有效試驗(yàn)5日內(nèi)，病豬體溫、咳嗽、呼吸、食欲、精神等癥狀有改善或緩解；④無(wú)效試驗(yàn)5日內(nèi)，病豬體溫、食欲、呼吸等臨床癥狀無(wú)減輕甚至加重或死亡者為無(wú)效。(4)自然發(fā)病治療試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表4:表4雙黃連可溶性粉對(duì)自然發(fā)病治療試驗(yàn)結(jié)果組別數(shù)量治愈顯效有效無(wú)效總顯效率(%)總有效率(%)高劑量藥物試驗(yàn)組2015320卯跳0中劑量藥物試驗(yàn)組201342185.095低劑量藥物試驗(yàn)組2087237585.0藥物對(duì)照組20863370.085結(jié)果見(jiàn)表4，高劑量、中劑量本發(fā)明雙黃連可溶性粉在癥候、體溫、咳嗽、食欲、精神等方面均有顯著療效，明顯優(yōu)于對(duì)照組藥安乃近注射液，總顯效率8分別為90%、85%，(P〈0.01);小劑量雙黃連可溶性粉和安乃近對(duì)仔豬感冒發(fā)熱均有較好的療效。由上述實(shí)驗(yàn)l、2、3、4可以看出，本發(fā)明雙黃連可溶性粉對(duì)6株細(xì)菌均有不同程度的體外抑菌作用；對(duì)傷寒副傷寒疫苗致熱家兔的解熱作用，高、中兩個(gè)劑量組也可明顯拮抗發(fā)熱高峰，低劑量組拮抗發(fā)熱高峰也顯示了一定的優(yōu)勢(shì)，顯示本藥有較強(qiáng)的解熱作用對(duì)氨水所致的小鼠咳嗽均有明顯的抑制作用，并能延長(zhǎng)其咳嗽潛伏期。對(duì)自然感染的病例高劑量、中劑量雙黃連可溶性粉在癥候、體溫、咳嗽、食欲、精神等方面均有顯著療效，明顯優(yōu)于對(duì)照組藥安乃近注射液，總顯效率分別為90%、85%,(P〈0.01)。這些實(shí)驗(yàn)療效結(jié)果表明，雙黃連可溶性粉對(duì)畜禽呼吸道疾病引起的體溫升高，咳嗽、伴發(fā)疼痛，生理功能紊亂等癥狀療效確切。具體實(shí)施例實(shí)施例l本發(fā)明由下列重量份數(shù)的藥物制成:金銀花800份、黃芩800份、連翹1600份。本發(fā)明的雙黃連可溶性粉的制法為首先把金銀花加水煎煮二次，第一次1小時(shí)，第二次45分鐘，合并煎液，減壓濃縮l:2，冷至45i:，加25%石灰乳，使PH值達(dá)12.0，濾過(guò)，沉淀加2倍量95%乙醇，放置過(guò)60目篩，用50y。硫酸調(diào)節(jié)PH至3，充分?jǐn)噭?，濾過(guò)，濾液用4596的氫氧化鈉溶液中和至PH值到6.5，濾過(guò)，濾液減壓濃縮，干燥，備用；黃芩加水煎煮三次，第一次2小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至適量，用鹽酸調(diào)PH值至1.2，6(TC保溫，靜置，濾過(guò)，沉淀加適量水，攪勻，用25y。氫氧化鈉溶液調(diào)PH值至7.0，加等量乙醇，攪拌使溶解，濾過(guò)，濾液用鹽酸調(diào)PH值至l.O，7(TC保溫，靜置，濾過(guò)，沉淀依次用適量水及不同濃度的乙醇洗至PH至7.0，揮盡乙醇，減壓干燥，備用；連翹粉碎，加水煎煮三次，每次1.5小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液于6(TC以下減壓濃縮至相對(duì)密度為1.10的清膏，放冷，加入4倍量乙醇，攪勻，靜置2小時(shí)，沉淀，濾過(guò)，濾液減壓回收乙醇，濃縮液噴霧干燥，與上述金銀花、黃芩提取物粉碎成細(xì)粉，加葡萄糖適量，混勻，6(TC以下干燥，即得。實(shí)施例29本發(fā)明由下列重量份數(shù)的藥物制成金銀花900份、黃芩900份、連翹1800份。本發(fā)明的雙黃連可溶性粉的制法為將上述金銀花加水煎煮二次，第一次1小時(shí)，第二次45分鐘，合并煎液，減壓濃縮2.2，冷至5(TC,加30%石灰乳，使PH值達(dá)13,濾過(guò)，沉淀加3倍量95%乙醇，放置過(guò)60目篩，用50%硫酸調(diào)節(jié)PH至4，充分?jǐn)噭?，濾過(guò)，濾液用5096的氫氧化鈉溶液中和至PH值到7，濾過(guò)，濾液減壓濃縮，干燥，備用；黃芩加水煎煮三次，第一次2小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至適量，用鹽酸調(diào)PH值至2.0，80'C保溫，靜置，濾過(guò)，沉淀加適量水，攪勻，用40y。氫氧化鈉溶液調(diào)PH值至7.0，加等量乙醇，攪拌使溶解，濾過(guò)，濾液用鹽酸調(diào)PH值至2.0，8(TC保溫，靜置，濾過(guò)，沉淀依次用適量水及不同濃度的乙醇洗至PH至7.0，揮盡乙醇，減壓干燥，備用；連翹粉碎，加水煎煮三次，每次1.5小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液于60。C以下減壓濃縮至相對(duì)密度為1.20(室溫)的清膏，放冷，加入6倍量乙醇，攪勻，靜置4小時(shí)，沉淀，濾過(guò)，濾液減壓回收乙醇，濃縮液噴霧干燥，與上述金銀花、黃芩提取物粉碎成細(xì)粉，加葡萄糖適量，混勻，60'C以下干燥，即得。權(quán)利要求1、雙黃連可溶性粉制備工藝，本發(fā)明由下列重量份數(shù)的藥物制成金銀花800-1000份、黃芩800-1000份、連翹1600-2000份；其特征在于包括以下步驟首先把金銀花加水煎煮二次，第一次1小時(shí)，第二次45分鐘，合并煎液，減壓濃縮到1∶2～2.5，冷至45～60℃，加20～40％石灰乳，使PH值達(dá)11.0～13.0，濾過(guò)，沉淀加2～3倍量95％乙醇，放置過(guò)60目篩，用50％硫酸調(diào)節(jié)PH至3～4，充分?jǐn)噭?，濾過(guò)，濾液用40～50％的氫氧化鈉溶液中和至PH值到6.5～7.5，濾過(guò)，濾液減壓濃縮，干燥，備用；黃芩加水煎煮三次，第一次2小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至適量，用鹽酸調(diào)PH值至1.0～2.0，60～80℃保溫，靜置，濾過(guò)，沉淀加適量水，攪勻，用20～40％氫氧化鈉溶液調(diào)PH值至7.0，加等量乙醇，攪拌使溶解，濾過(guò)，濾液用鹽酸調(diào)PH值至1.0～2.0，60～80℃保溫，靜置，濾過(guò)，沉淀依次用適量水及不同濃度的乙醇洗至PH至7.0，揮盡乙醇，減壓干燥，備用；連翹粉碎，加水煎煮三次，每次1.5小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液于60℃以下減壓濃縮至相對(duì)密度為1.10～1.20的清膏，放冷，加入4～6倍量乙醇，攪勻，靜置2～4小時(shí)，沉淀，濾過(guò)，濾液減壓回收乙醇，濃縮液噴霧干燥，與上述金銀花、黃芩提取物粉碎成細(xì)粉，加葡萄糖適量，混勻，60℃以下干燥，即得。2、如權(quán)利要求1所述的雙黃連可溶性粉制備工藝，其特征在于包括以下步驟首先把金銀花加水煎煮二次，第一次1小時(shí)，第二次45分鐘，合并煎液，減壓濃縮l:2，冷至45X:，加25%石灰乳，使PH值達(dá)12.0，濾過(guò)，沉淀加2倍量95%乙醇，放置過(guò)60目篩，用5(m硫酸調(diào)節(jié)PH至3，充分?jǐn)噭颍瑸V過(guò)，濾液用4596的氫氧化鈉溶液中和至PH值到6.5，濾過(guò)，濾液減壓濃縮，干燥，備用；黃芩加水煎煮三次，第一次2小時(shí)，第二、三次各1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至適量，用鹽酸調(diào)PH值至1.2，60'C保溫，靜置，濾過(guò)，沉淀加適量水，攪勻，用259&氫氧化鈉溶液調(diào)PH值至7.0，加等量乙醇，攪拌使溶解，濾過(guò)，濾液用鹽酸調(diào)PH值至l.O，7(TC保溫，靜置，濾過(guò)，沉淀依次用適量水及不同濃度的乙醇洗至PH至7.0，揮盡乙醇，減壓干燥，備用；連翹粉碎，加水煎煮三次，每次1.5小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液于6(TC以下減壓濃縮至相對(duì)密度為1.10的清膏，放冷，加入4倍量乙醇，攪勻，靜置2小時(shí)，沉淀，濾過(guò)，濾液減壓回收乙醇，濃縮液噴霧干燥，與上述金銀花、黃芩提取物粉碎成細(xì)粉，加葡萄糖適量，混勻，6(TC以下干燥，即得。3、如權(quán)利要求1所述的雙黃連可溶性粉制備工藝所獲得的雙黃連可溶性粉在畜禽呼吸道感染性疾病中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明雙黃連可溶性粉制備工藝，由下列重量份數(shù)的藥物制成金銀花800-1000份、黃芩800-1000份、連翹1600-2000份；其特征在于包括以下步驟首先把金銀花加水煎煮二次，第一次1小時(shí)，第二次45分鐘，合并煎液，黃芩加水煎煮三次，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮，減壓干燥，備用；連翹粉碎，加水煎煮三次，沉淀，濾過(guò)，濃縮液噴霧干燥，與上述金銀花、黃芩提取物粉碎成細(xì)粉，加葡萄糖適量，即得。本發(fā)明雙黃連可溶性粉具有有效成分含量高、毒副作用小、無(wú)藥殘，可供大規(guī)模養(yǎng)殖混飼、混飲給藥，貯存、運(yùn)輸方便，符合新獸藥制劑特點(diǎn)。本發(fā)明適用于畜禽道感染性疾病，療效確切。文檔編號(hào)A61K9/14GK101554407SQ200910115410公開(kāi)日2009年10月14日申請(qǐng)日期2009年5月25日優(yōu)先權(quán)日2009年5月25日發(fā)明者付寧?kù)o,徐曉曦,徐桃枝,楊彥平申請(qǐng)人:江西中成中藥原料有限公司