專利名稱：：雙黃連可溶性粉制備工藝與應用的制作方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及一種具有抑菌、解熱、鎮(zhèn)咳之功效的中獸藥制劑及其制備工藝與應用，特別是雙黃連可溶性粉制備工藝與應用，本發(fā)明屬于中藥領域。
背景技術：
：呼吸系統(tǒng)感染性疾病是影響畜禽養(yǎng)殖業(yè)的最常見病之一，特別是近年來混合感染、繼發(fā)感染、耐藥菌感染的出現(xiàn)，呈現(xiàn)發(fā)病率高、病源復雜化、常規(guī)藥物難以控制等特點，給養(yǎng)殖業(yè)帶來嚴重的損失。目前，治療此類疾病常用化學合成的非甾體類抗炎鎮(zhèn)痛藥，藥物殘留較為嚴重。中獸藥上，2005年版《中國獸藥典》收載了"雙黃連口服液"，但其有效成分相對較低，臨床用藥需要大劑量才會產(chǎn)生療效。雙黃連可溶性粉為純中藥提取的浸膏粉，有效成分含量較高，水溶性較好，適用于大規(guī)模養(yǎng)殖中的混飼、混飲給藥，且不易產(chǎn)生耐藥性，是畜禽呼吸道感染性疾病的必備良藥。畜禽呼吸系統(tǒng)感染在臨床上主要表現(xiàn)為體溫升高，可伴發(fā)疼痛，引起生理功能紊亂，產(chǎn)生各種炎癥反應等。畜禽呼吸系統(tǒng)疾病主要是由于畜禽感染多種病原微生物導致，通過藥效試驗證明，雙黃連可溶性粉具有抑菌、解熱、鎮(zhèn)咳作用，臨床治療畜禽呼吸系統(tǒng)疾病具有良好療效。
發(fā)明內容本發(fā)明目的是提供一種具有抑菌、解熱、鎮(zhèn)咳之功效的中獸藥雙黃連可溶性粉制備工藝與應用。本發(fā)明雙黃連可溶性粉由下列重量份數(shù)的藥物組成:金銀花800-1000份、黃苳800-1000份、連翹1600-2000份。本發(fā)明雙黃連可溶性粉制備方法如下將上述金銀花加水煎煮二次，第一次1小時，第二次45分鐘，合并煎液，減壓濃縮(l:22.5)，冷至4560。C，加2040%石灰乳，使PH值達11.013.0，濾過，沉淀加23倍量95%乙醇，放置過60目篩，用50%硫酸調節(jié)PH至3.04.0，充分攪勻，濾過，濾液用4050°/。的氫氧化鈉溶液中和至PH值到6.57.5，濾過，濾液減壓濃縮，干燥，備用；黃芩加水煎煮三次，第一次2小時，第二、三次各1小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至適量，用鹽酸調PH值至1.02.0,608(TC保溫，靜置，濾過，沉淀加適量水，攪勻，用20400/o氫氧化鈉溶液調PH值至7.0，加等量乙醇，攪拌使溶解，濾過，濾液用鹽酸調PH值至1.02.0，608(TC保溫，靜置，濾過，沉淀依次用適量水及不同濃度的乙醇洗至PH至7.0，揮盡乙醇，減壓干燥，備用；連翹粉碎，加水煎煮三次，每次1.5小時，合并煎液，濾過，濾液于60。C以下減壓濃縮至相對密度為1.101.20(室溫)的清膏，放冷，加入46倍量乙醇，攪勻，靜置24小時，沉淀，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮液噴霧干燥，與上述金銀花、黃芩提取物粉碎成細粉，加葡萄糖適量，混勻，6(TC以下干燥，即得。應說明的以下幾點鑒于大規(guī)模養(yǎng)殖時的需要，養(yǎng)殖戶可以選擇混飼、混飲給藥。雙黃連可溶性粉在獸藥臨床的具有抑菌、解熱、鎮(zhèn)咳作用，對畜禽呼吸系統(tǒng)疾病具有良好療效。金銀花對傷寒桿菌、副傷寒桿菌、大腸桿菌、變形桿菌、綠膿桿菌、百曰咳桿菌、霍亂弧菌、葡萄球菌、鏈球菌、肺炎雙球菌、腦膜炎球菌等均有抑制作用；對上呼吸道感染有關的不同病毒株有抑制或延緩細胞病變作用。黃芩對多種球菌、桿菌和耐藥的金黃色葡萄球菌有抑制作用，對流感病毒及皮膚真菌也有抑殺效果，體外試驗有抑制阿米巴原蟲生長和殺滅鉤端螺旋體的作用。連翹對多種革蘭陽性及陰性細菌均有抑制作用，在體外可抑制傷寒桿菌、副傷寒桿菌、大腸桿菌、痢疾桿菌、白喉桿菌及霍亂弧菌、葡萄球菌、鏈球菌等。雙黃連可溶性粉能明顯抑制傷寒副傷寒疫苗導致的家兔發(fā)熱；能明顯延長小白鼠咳嗽潛伏期和減少咳嗽次數(shù)；對臨床自然發(fā)病的上呼吸道感染病豬能明顯起到解熱、止咳作用。雙黃連可溶性粉也能明顯抑制由角叉菜膠引發(fā)的足腫脹炎癥癥狀，能拮抗由組織胺引起的毛細血管通透性增加；降低由酵母菌或大腸桿菌引起的體溫升高；降低由0.7%醋酸所致的扭體反應。本發(fā)明臨床應用效果見如下實驗實驗l5雙黃連可溶性粉抑菌作用效果試驗如下用瓊脂平板二倍稀釋法進行。雙黃連可溶性粉原液最高、最低濃度分別為864mg/ml、6.75mg/ml。將濃度為1.2X107cfU/ml菌液5ul點種于系列濃度含藥平板上，并以不含藥的血平板點種作空白對照。37-C培養(yǎng)18h，觀察并記錄結果，平板有菌落生長用"+"，無菌落生長用"-"表示。結果顯示，雙黃連可溶性粉對金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血性鏈球菌、肺炎鏈球菌、大腸桿菌、傷寒桿菌6株細菌均有不同程度的體外抑菌作用。其中對肺炎鏈球菌、溶血性鏈球菌的作用最強，最低抑菌濃度為13.5mg/ml和54mg/ml;對金黃色葡萄球菌抑菌作用稍弱，MIC為108mg/ml，對表皮葡萄球菌的MIC為216mg/ml，對大腸桿菌、傷寒桿菌的MIC為432mg/ml。實驗2雙黃連可溶性粉對傷寒副傷寒疫苗致熱家兔解熱作用試驗效果如下傷寒副傷寒疫苗致家兔發(fā)熱模型將傷寒副傷寒疫苗稀釋后耳靜脈注射，lml/kg.bw，lh后測其升溫程度，以〉0.8"C視為合格。實驗動物隨機分成為5組，艮P:(1)對照組試驗兔稱取體重，實驗前一天下午和當天上午，分別用電子測溫計，測肛溫(超過39"C或一日體溫波動X).5'C者剔除)，實驗動物15只，體溫在38.639.2"C范圍，體溫波動在0.3r，為適用試驗兔，取其平均值做為基礎體溫。(2)高劑量組發(fā)熱實驗動物14只，每l升水添加本品4g，于給藥后0.5、1、1.5、2、3、4、5h測肛溫，與基礎體溫比較，計算溫差。(3)中劑量組發(fā)熱實驗動物15只，每l升水添加本品2g，于給藥后0.5、1、1.5、2、3、4、5h測肛溫，與基礎體溫比較，計算溫差。(4)低劑量組發(fā)熱實驗動物15只，每l升水添加本品lg，于給藥后0.5、1、1.5、2、3、4、5h測肛溫，與基礎體溫比較，計算溫差。(5)阿司匹林組發(fā)熱實驗動物14只，于給藥后0.5、1、1.5、2、3、4、5h測肛溫，與基礎體溫比較，計算溫差。實驗結果見下表l:6<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>對傷寒副傷寒疫苗致熱家兔的解熱作用(x±s，n=10)注經(jīng)t檢驗，與對照組相比，p〈0.05，**p<0.01由上表說明，本發(fā)明雙黃連可溶性粉解熱作用起效快，32min起效，60rnin較好，其中高、中兩個劑量組也可明顯拮抗發(fā)熱高峰，低劑量組拮抗發(fā)熱高峰也顯示了一定的優(yōu)勢，顯示本藥有較前的解熱作用。實驗3雙黃連可溶性粉鎮(zhèn)咳作用試驗效果如下小鼠60只按體重隨機分為4組，灌胃給藥1次(0.2ml/10g)后lh，每鼠分別放入500ml的廣口瓶內，瓶口懸一片滴有25%氨水0.3ml的濾紙，30秒后取出，觀察并記錄小鼠2分鐘內的咳嗽次數(shù)和咳嗽潛伏期，實驗結果見表2。表2本發(fā)明雙黃連可溶性粉對氨水引咳的小鼠咳嗽潛伏期和咳嗽次數(shù)的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>從表2看出，本發(fā)明雙黃連可溶性粉高、中劑量組對氨水所致的小鼠咳嗽均有明顯的抑制作用，并能延長其咳嗽潛伏期。實驗4雙黃連可溶性粉對自然發(fā)病治療試驗結果如下(1)病例的選擇按臨床診斷觀察和實驗室檢査進行診斷確定為非傳染性發(fā)熱性病豬，體溫40.(TC41.3。C，頻發(fā)咳嗽，呼吸加快，拱腰顫栗。另選健康豬只20頭作為健康對照組，試驗前觀察豬群的采食、體溫等情況，臨床觀察正常方準許參與試驗。表3臨床自然病例分組及處理藥物組別處理動物數(shù)雙黃連可溶性粉低劑量組感染，每1升水添加本品lg，連用3d20只雙黃連可溶性粉中劑量組感染，每l升水添加本品2g，連用3d20只雙黃連可溶性粉高劑量組感染，每l升水添加本品4g，連用3d20只安乃近藥物對照組感染，每包兌水50kg，連用3d20只感染對照組感染、不給藥20只健康對照組不感染、不給藥20只(2)人工發(fā)熱病例觀察指標觀察試驗兔正常體溫、造模體溫、給藥后0.5、1、1.5、2、3、4、5h體溫，試驗結果以體溫降幅均值和標準偏差表示，組間均值比較比較進行t檢驗分析。(3)臨床自然病例觀察指標主要觀察發(fā)熱、咳嗽、食欲、呼吸、精神等指標綜合評定療效。①治愈試驗5日內，病豬體溫、咳嗽、食欲、呼吸及精神等癥狀均恢復正常者；②顯效試驗5日內，病豬體溫、呼吸正常，咳嗽、食欲、精神明顯好轉；③有效試驗5日內，病豬體溫、咳嗽、呼吸、食欲、精神等癥狀有改善或緩解；④無效試驗5日內，病豬體溫、食欲、呼吸等臨床癥狀無減輕甚至加重或死亡者為無效。(4)自然發(fā)病治療試驗結果見表4:表4雙黃連可溶性粉對自然發(fā)病治療試驗結果組別數(shù)量治愈顯效有效無效總顯效率(%)總有效率(%)高劑量藥物試驗組2015320卯跳0中劑量藥物試驗組201342185.095低劑量藥物試驗組2087237585.0藥物對照組20863370.085結果見表4，高劑量、中劑量本發(fā)明雙黃連可溶性粉在癥候、體溫、咳嗽、食欲、精神等方面均有顯著療效，明顯優(yōu)于對照組藥安乃近注射液，總顯效率8分別為90%、85%，(P〈0.01);小劑量雙黃連可溶性粉和安乃近對仔豬感冒發(fā)熱均有較好的療效。由上述實驗l、2、3、4可以看出，本發(fā)明雙黃連可溶性粉對6株細菌均有不同程度的體外抑菌作用；對傷寒副傷寒疫苗致熱家兔的解熱作用，高、中兩個劑量組也可明顯拮抗發(fā)熱高峰，低劑量組拮抗發(fā)熱高峰也顯示了一定的優(yōu)勢，顯示本藥有較強的解熱作用對氨水所致的小鼠咳嗽均有明顯的抑制作用，并能延長其咳嗽潛伏期。對自然感染的病例高劑量、中劑量雙黃連可溶性粉在癥候、體溫、咳嗽、食欲、精神等方面均有顯著療效，明顯優(yōu)于對照組藥安乃近注射液，總顯效率分別為90%、85%,(P〈0.01)。這些實驗療效結果表明，雙黃連可溶性粉對畜禽呼吸道疾病引起的體溫升高，咳嗽、伴發(fā)疼痛，生理功能紊亂等癥狀療效確切。具體實施例實施例l本發(fā)明由下列重量份數(shù)的藥物制成:金銀花800份、黃芩800份、連翹1600份。本發(fā)明的雙黃連可溶性粉的制法為首先把金銀花加水煎煮二次，第一次1小時，第二次45分鐘，合并煎液，減壓濃縮l:2，冷至45i:，加25%石灰乳，使PH值達12.0，濾過，沉淀加2倍量95%乙醇，放置過60目篩，用50y。硫酸調節(jié)PH至3，充分攪勻，濾過，濾液用4596的氫氧化鈉溶液中和至PH值到6.5，濾過，濾液減壓濃縮，干燥，備用；黃芩加水煎煮三次，第一次2小時，第二、三次各1小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至適量，用鹽酸調PH值至1.2，6(TC保溫，靜置，濾過，沉淀加適量水，攪勻，用25y。氫氧化鈉溶液調PH值至7.0，加等量乙醇，攪拌使溶解，濾過，濾液用鹽酸調PH值至l.O，7(TC保溫，靜置，濾過，沉淀依次用適量水及不同濃度的乙醇洗至PH至7.0，揮盡乙醇，減壓干燥，備用；連翹粉碎，加水煎煮三次，每次1.5小時，合并煎液，濾過，濾液于6(TC以下減壓濃縮至相對密度為1.10的清膏，放冷，加入4倍量乙醇，攪勻，靜置2小時，沉淀，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮液噴霧干燥，與上述金銀花、黃芩提取物粉碎成細粉，加葡萄糖適量，混勻，6(TC以下干燥，即得。實施例29本發(fā)明由下列重量份數(shù)的藥物制成金銀花900份、黃芩900份、連翹1800份。本發(fā)明的雙黃連可溶性粉的制法為將上述金銀花加水煎煮二次，第一次1小時，第二次45分鐘，合并煎液，減壓濃縮2.2，冷至5(TC,加30%石灰乳，使PH值達13,濾過，沉淀加3倍量95%乙醇，放置過60目篩，用50%硫酸調節(jié)PH至4，充分攪勻，濾過，濾液用5096的氫氧化鈉溶液中和至PH值到7，濾過，濾液減壓濃縮，干燥，備用；黃芩加水煎煮三次，第一次2小時，第二、三次各1小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至適量，用鹽酸調PH值至2.0，80'C保溫，靜置，濾過，沉淀加適量水，攪勻，用40y。氫氧化鈉溶液調PH值至7.0，加等量乙醇，攪拌使溶解，濾過，濾液用鹽酸調PH值至2.0，8(TC保溫，靜置，濾過，沉淀依次用適量水及不同濃度的乙醇洗至PH至7.0，揮盡乙醇，減壓干燥，備用；連翹粉碎，加水煎煮三次，每次1.5小時，合并煎液，濾過，濾液于60。C以下減壓濃縮至相對密度為1.20(室溫)的清膏，放冷，加入6倍量乙醇，攪勻，靜置4小時，沉淀，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮液噴霧干燥，與上述金銀花、黃芩提取物粉碎成細粉，加葡萄糖適量，混勻，60'C以下干燥，即得。權利要求1、雙黃連可溶性粉制備工藝，本發(fā)明由下列重量份數(shù)的藥物制成金銀花800-1000份、黃芩800-1000份、連翹1600-2000份；其特征在于包括以下步驟首先把金銀花加水煎煮二次，第一次1小時，第二次45分鐘，合并煎液，減壓濃縮到1∶2～2.5，冷至45～60℃，加20～40％石灰乳，使PH值達11.0～13.0，濾過，沉淀加2～3倍量95％乙醇，放置過60目篩，用50％硫酸調節(jié)PH至3～4，充分攪勻，濾過，濾液用40～50％的氫氧化鈉溶液中和至PH值到6.5～7.5，濾過，濾液減壓濃縮，干燥，備用；黃芩加水煎煮三次，第一次2小時，第二、三次各1小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至適量，用鹽酸調PH值至1.0～2.0，60～80℃保溫，靜置，濾過，沉淀加適量水，攪勻，用20～40％氫氧化鈉溶液調PH值至7.0，加等量乙醇，攪拌使溶解，濾過，濾液用鹽酸調PH值至1.0～2.0，60～80℃保溫，靜置，濾過，沉淀依次用適量水及不同濃度的乙醇洗至PH至7.0，揮盡乙醇，減壓干燥，備用；連翹粉碎，加水煎煮三次，每次1.5小時，合并煎液，濾過，濾液于60℃以下減壓濃縮至相對密度為1.10～1.20的清膏，放冷，加入4～6倍量乙醇，攪勻，靜置2～4小時，沉淀，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮液噴霧干燥，與上述金銀花、黃芩提取物粉碎成細粉，加葡萄糖適量，混勻，60℃以下干燥，即得。2、如權利要求1所述的雙黃連可溶性粉制備工藝，其特征在于包括以下步驟首先把金銀花加水煎煮二次，第一次1小時，第二次45分鐘，合并煎液，減壓濃縮l:2，冷至45X:，加25%石灰乳，使PH值達12.0，濾過，沉淀加2倍量95%乙醇，放置過60目篩，用5(m硫酸調節(jié)PH至3，充分攪勻，濾過，濾液用4596的氫氧化鈉溶液中和至PH值到6.5，濾過，濾液減壓濃縮，干燥，備用；黃芩加水煎煮三次，第一次2小時，第二、三次各1小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至適量，用鹽酸調PH值至1.2，60'C保溫，靜置，濾過，沉淀加適量水，攪勻，用259&氫氧化鈉溶液調PH值至7.0，加等量乙醇，攪拌使溶解，濾過，濾液用鹽酸調PH值至l.O，7(TC保溫，靜置，濾過，沉淀依次用適量水及不同濃度的乙醇洗至PH至7.0，揮盡乙醇，減壓干燥，備用；連翹粉碎，加水煎煮三次，每次1.5小時，合并煎液，濾過，濾液于6(TC以下減壓濃縮至相對密度為1.10的清膏，放冷，加入4倍量乙醇，攪勻，靜置2小時，沉淀，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮液噴霧干燥，與上述金銀花、黃芩提取物粉碎成細粉，加葡萄糖適量，混勻，6(TC以下干燥，即得。3、如權利要求1所述的雙黃連可溶性粉制備工藝所獲得的雙黃連可溶性粉在畜禽呼吸道感染性疾病中的應用。全文摘要本發(fā)明雙黃連可溶性粉制備工藝，由下列重量份數(shù)的藥物制成金銀花800-1000份、黃芩800-1000份、連翹1600-2000份；其特征在于包括以下步驟首先把金銀花加水煎煮二次，第一次1小時，第二次45分鐘，合并煎液，黃芩加水煎煮三次，合并煎液，濾過，濾液濃縮，減壓干燥，備用；連翹粉碎，加水煎煮三次，沉淀，濾過，濃縮液噴霧干燥，與上述金銀花、黃芩提取物粉碎成細粉，加葡萄糖適量，即得。本發(fā)明雙黃連可溶性粉具有有效成分含量高、毒副作用小、無藥殘，可供大規(guī)模養(yǎng)殖混飼、混飲給藥，貯存、運輸方便，符合新獸藥制劑特點。本發(fā)明適用于畜禽道感染性疾病，療效確切。文檔編號A61K9/14GK101554407SQ200910115410公開日2009年10月14日申請日期2009年5月25日優(yōu)先權日2009年5月25日發(fā)明者付寧靜,徐曉曦,徐桃枝,楊彥平申請人:江西中成中藥原料有限公司