專利名稱：利用pkc抑制劑來生產(chǎn)治療htlv－1感染的藥物的用途的制作方法
本申請要求1996年4月30日提交的美國臨時(shí)申請系列號60/024,938的優(yōu)先權(quán)。
本發(fā)明廣泛地涉及一種治療1型人T細(xì)胞親淋巴性病毒(HTLV-1)感染的方法。尤其，本發(fā)明提供一種抑制HTLV-1病毒的蛋白活性如Tax 1活性誘導(dǎo)的作用和抑制HTLV-1復(fù)制的方法。本發(fā)明特別提供利用特定種類的同功酶選擇性蛋白激酶C(PKC)抑制劑來治療HTLV-1感染和與此相關(guān)的疾病如T細(xì)胞白血病和HTLV-1誘導(dǎo)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病。
感染1型人T細(xì)胞親淋巴性病毒(HTLV-1)的人易于發(fā)展為成年T細(xì)胞白血病。另外，HTLV-1感染的人可能表現(xiàn)慢性神經(jīng)變性性疾病如熱帶強(qiáng)直性下身輕癱和脊髓病。本領(lǐng)域目前還沒有對HTLV-1感染的特定治療方法。對與HTLV-1感染相關(guān)的疾病的治療只是對癥治療并且該治療沒有提供令人滿意的結(jié)果。因此，本領(lǐng)域需要開發(fā)治療HTLV-1感染和與此相關(guān)疾病的治療劑。
白血病的特征是一種血形成細(xì)胞的贅生物增殖。不同類型的白血病按照所涉及的細(xì)胞類型分類并且根據(jù)疾病的持續(xù)時(shí)間分為急性和慢性白血病。如果不治療，所有類型的白血病都將致死。通常，死亡的原因是由白細(xì)胞浸潤骨髓和取代正常的造血細(xì)胞引起的并發(fā)癥。成年T細(xì)胞白血病可能與HTLV-1感染相關(guān)。在近四分之一世紀(jì)內(nèi)，全世界都在努力改進(jìn)白血病的治療。利用目前最好的治療方案治療，可以使得目前90％以上患急性成淋巴細(xì)胞白血病(ALL)的兒童得到完全緩解。然而，患ALL特別是T細(xì)胞白血病的成年人對該治療的反應(yīng)通常不如兒童，并且大多數(shù)試驗(yàn)僅產(chǎn)生50％或更少的完全緩解率，而且僅具有一年或更少的中等持續(xù)時(shí)間。因此，本領(lǐng)域仍舊需要開發(fā)新的治療與HTLV-1感染相關(guān)的成年T細(xì)胞白血病的治療劑。
HTLV-1感染也可能引起慢性神經(jīng)變性性疾病。慢性神經(jīng)變性性疾病如熱帶強(qiáng)直性下身輕癱和脊髓病可引起機(jī)能喪失、反射活性抑制和其它并發(fā)癥。通常，神經(jīng)變性性疾病的治療是保守的和對癥治療，不能完全痊愈。因此，本領(lǐng)域也需要開發(fā)新的治療與HTLV-1感染相關(guān)的慢性神經(jīng)變性性疾病的治療劑。
因此，本發(fā)明的目的是提供一種抑制感染細(xì)胞中1型人T細(xì)胞親淋巴性病毒復(fù)制的方法。
本發(fā)明的另一目的是提供一種抑制細(xì)胞中Tax 1病毒蛋白活性作用的方法。
本發(fā)明的另一目的是提供一種治療1型人T細(xì)胞親淋巴性病毒感染的哺乳動物的方法。
本發(fā)明的另一目的是提供一種治療與1型人T細(xì)胞親淋巴性病毒感染相關(guān)的成年T細(xì)胞白血病的方法。
本發(fā)明的另一目的是提供一種治療與1型人T細(xì)胞親淋巴性病毒感染相關(guān)的慢性神經(jīng)變性性疾病的方法。
通過一種或多種下列實(shí)施方案來提供本發(fā)明這些目的和其它目的。
本發(fā)明一個(gè)實(shí)施方案提供一種抑制細(xì)胞中1型人T細(xì)胞親淋巴性病毒復(fù)制的方法，它包括讓所述細(xì)胞與病毒復(fù)制抑制量的蛋白激酶C抑制劑接觸。
本發(fā)明另一實(shí)施方案提供一種抑制細(xì)胞中Tax1病毒蛋白活性作用的方法，它包括讓所述細(xì)胞與病毒蛋白活性抑制量的蛋白激酶C抑制劑接觸。
本發(fā)明另一實(shí)施方案提供一種治療1型人T細(xì)胞親淋巴性病毒感染的哺乳動物的方法，它包括給予所述哺乳動物治療有效量的蛋白激酶C抑制劑。
本發(fā)明另一實(shí)施方案提供一種治療與1型人T細(xì)胞親淋巴性病毒感染相關(guān)的成年T細(xì)胞白血病的方法，它包括給予需要該治療的成年人治療有效量的蛋白激酶Cβ同功酶選擇性抑制劑。
本發(fā)明另一實(shí)施方案提供一種治療與1型人T細(xì)胞親淋巴性病毒感染相關(guān)的慢性神經(jīng)變性性疾病的方法，它包括給予所述哺乳動物治療有效量的蛋白激酶Cβ同功酶選擇性抑制劑。
因此，本發(fā)明提供與治療HTLV-1感染和與此相關(guān)的疾病有效的化合物相關(guān)的技術(shù)。
本發(fā)明發(fā)現(xiàn)，特定種類的蛋白激酶C抑制劑，即蛋白激酶C的β-同功酶抑制劑，特別是PKC的β-同功酶選擇性抑制劑可在治療學(xué)上用于抑制HTLV-1病毒蛋白活性誘導(dǎo)的作用，特別是抑制病毒復(fù)制。因此，這些化合物可在治療學(xué)上用于治療HTLV-1感染的病人。
HTLV-1復(fù)制包括在產(chǎn)生性的感染和潛伏性感染的再活化過程中HTLV-1染色體組的繁殖。完整的潛伏性HTLV-1染色體組的再活化包括HTLV的復(fù)制，例如形成HTLV-染色體組的多重轉(zhuǎn)錄，適時(shí)進(jìn)行HTLV-1轉(zhuǎn)錄，HTLV-1表達(dá)，例如病毒特異性蛋白如Tax1的翻譯，病毒的裝配以及釋放感染性HTLV-1顆粒和HTLV-1蛋白。
HTLV-1病毒蛋白如Tax1通過與病毒系統(tǒng)以及宿主系統(tǒng)相互作用發(fā)揮其作用。HTLV-1病毒蛋白活性誘導(dǎo)的作用包括但不限制于調(diào)節(jié)HTLV-1病毒的轉(zhuǎn)錄以及改變其它細(xì)胞基因(Kwanyee等，自然23:776-778,1988；Tan等，Mol.Cell.Biol.9:1733-1745,1989；和Yoshimura等，EMBO J 9:2537-2542,1990)。Tax1病毒蛋白由HTLV-1感染的細(xì)胞通過細(xì)胞外分泌(Lindholm等，生物新聞.2:1034-1043,1990)。所分泌的細(xì)胞外Tax1可被周圍細(xì)胞溶解并激活細(xì)胞中的轉(zhuǎn)錄因子如NF-κB(Smith等，臨床研究雜志87:761-766,1991；Arima等，病毒雜志65:6892-6899,1991)。已表明，HTLV-1感染的細(xì)胞產(chǎn)生某些轉(zhuǎn)錄因子如NF-κB(Lindholm等，J.Virology70:2525-2532,1996)。
感染HTLV-1的人易于發(fā)展為成年T細(xì)胞白血病(Poiesz等，PNAS77:7415-7419,1980；Hinuma等，PNAS 78:6476-6480,1981)。另外，HTLV-1感染的人可能表現(xiàn)慢性神經(jīng)變性性疾病如熱帶強(qiáng)直性下身輕癱和脊髓病(Gessanin等，Lancet Ⅱ:407-410,1985,Osame等，LancetⅠ:1031-1032,1986)。
盡管不需限制于任何技術(shù)解釋，但申請人認(rèn)為PKC影響HTLV-1病毒蛋白活性和病毒復(fù)制。病毒蛋白Tax1直接與PKC相互作用并激活PKC(Lindholm等，病毒學(xué)雜志70:2525-2532,1996)。已證明，某些PKC抑制劑阻斷感染HTLV-1的細(xì)胞中Tax1誘導(dǎo)的細(xì)胞蛋白如NF-κB的激活(Lindholm等，病毒學(xué)雜志70:2525-2532,1996)。也已證明，PKC抑制阻斷了適時(shí)產(chǎn)生HTLV-1的mRNA，它是有效率地進(jìn)行病毒復(fù)制所需要的(Adchi等，生化及生物物理研究通訊169:469-475,1990)。其它支持PKC在有效地進(jìn)行HTLV-1復(fù)制中作用的證據(jù)是，PKC抑制劑減少牛白血病病毒的病毒，所述牛白血病病毒在結(jié)構(gòu)上和生物學(xué)上與HTLV-1類似(Jensen等，病毒學(xué)雜志66:4427-4433,1992)。因此，本發(fā)明所描述的PKC抑制劑化合物可通過抑制病毒蛋白活性，特別是通過抑制病毒復(fù)制，在治療學(xué)上治療HTLV-1感染和與此相關(guān)的疾病。
優(yōu)選地，本發(fā)明方法利用那些有效地抑制β同功酶的蛋白激酶C抑制劑。通常，在先有的技術(shù)中，將一組適宜的化合物描述為二-吲哚基馬來酰亞胺或大環(huán)的二-吲哚基馬來酰亞胺。在先有技術(shù)中公知的二-吲哚基馬來酰亞胺包括那些在美國專利5,621,098,5,552,396,5,545,636,5,481,003,5,491,242h 5,057,614中所描述的化合物，將所有這些引入本文供參考。尤其，大環(huán)的二-吲哚基馬來酰亞胺由式Ⅰ表示。這些化合物及其制備方法在美國專利5,552,396中描述，將其引入本文供參考。將這些化合物以治療有效量給予人來抑制HTLV-1病毒蛋白活性如Tax 1活性誘導(dǎo)的作用和抑制HTLV-1復(fù)制，或治療HTLV-1感染。也可以將這些化合物作為預(yù)防劑給予在可能上述疾病危險(xiǎn)中的病人。
在本發(fā)明方法中所使用的優(yōu)選的化合物為式(Ⅰ)化合物或其可藥用鹽，前體藥物或酯
其中W為-O-、-S-、-SO-、-SO2-、-CO-、C2-C6亞烷基、取代的亞烷基、C2-C6亞烷烯、-芳基-、-芳基(CH2)mO-、-雜環(huán)-、-雜環(huán)-(CH2)mO-、-稠合的雙環(huán)-、-稠合的二環(huán)-(CH2)mO-、-NR3-、-NOR3-、-CONH-、或-NHCO-；X和Y獨(dú)立地為C1-C4亞烷基、取代的亞烷基、或者X、Y、和W一起合并形成-(CH2)n-AA-；R1為氫或不超過4個(gè)取代或未取代的取代基，所述取代基獨(dú)立地選自鹵素、C1-C4烷基、羥基、C1-C4烷氧基、鹵代烷基、硝基、-NR4R5-或-NHCO(C1-C4烷基)；R2為氫、CH3CO-、-NH2或羥基；R3為氫、-(CH2)m芳基、-C1-C4烷基、-COO(C1-C4烷基)、-CONR4R5、-(C=NH)NH2、-SO(C1-C4烷基)、-SO2(NR4R5)或-SO2(C1-C4烷基)；R4和R5獨(dú)立地為氫、C1-C4烷基、苯基、芐基或與它們所連接的氮一起形成飽和的或不飽和的5或6元環(huán)；AA為氨基酸殘基；m獨(dú)立地為0,1,2，或3；并且n獨(dú)立地為2,3,4或5。
在本發(fā)明中所使用的更優(yōu)選的化合物由式Ⅰ表示，其中-X-W-Y部分包含4-8個(gè)原子，所述原子可以是取代的或未取代的。最優(yōu)選地，-X-W-Y部分包含6個(gè)原子。
其它在本發(fā)明中所使用的優(yōu)選的化合物為那些式Ⅰ化合物，其中R1和R2為氫；并且W為取代的亞烷基、-O-、-S-、-CONH-、-NHCO-或-NR3-。在本發(fā)明中所使用的特別優(yōu)選的化合物為式Ⅰa化合物或其可藥用鹽，前體藥物或酯
其中Z為-(CH2)p-或-(CH2)p-O-(CH2)p-；R4為羥基、-SH、C1-C4烷基、-(CH2)m芳基、-NH(芳基)、-N(CH3)(CF3)、-NH(CF3)或-NR5R6；R5為氫或C1-C4烷基；R6為氫、C1-C4烷基或芐基；p為0,1，或2；并且m獨(dú)立地為2或3。最優(yōu)選的式Ⅰa化合物為下列化合物或其可藥用鹽、前體藥物或酯，其中Z為CH2；并且R4為-NH2、-NH(CF3)或-N(CH3)2。
其它在本發(fā)明方法中所使用的優(yōu)選的化合物為這樣的化合物，其中在式Ⅰ中的W為-O-,Y為取代的亞烷基，并且X為亞烷基。這些優(yōu)選的化合物為式Ⅰb化合物或其可藥用鹽、前體藥物或酯
其中Z為-(CH2)p-；R4為-NR5R6、-NH(CF3)或-N(CH3)(CF3)；R5和R6獨(dú)立地為H或C1-C4烷基；p為0,1，或2；并且m獨(dú)立地為2或3。最優(yōu)選的式Ⅰb化合物為那些化合物，其中p為1；并且R5和R6為甲基。
因?yàn)樗鼈兒瑝A性部分，所以，式Ⅰ、Ⅰa和Ⅰb化合物也可以以其可藥用酸加成鹽的形式存在。通常用于形成該鹽的酸包括無機(jī)酸如鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸和磷酸以及有機(jī)酸如對甲苯磺酸、甲磺酸、草酸、對溴苯磺酸、碳酸、琥珀酸、枸櫞酸、苯甲酸、乙酸和相關(guān)的無機(jī)和有機(jī)酸。因此，該可藥用鹽包括硫酸鹽、焦硫酸鹽、硫酸氫鹽、亞硫酸鹽、亞硫酸氫鹽、磷酸鹽、磷酸一氫鹽、磷酸二氫鹽、偏鱗酸鹽、焦磷酸鹽、氯化物、溴化物、碘化物、乙酸鹽、丙酸鹽、癸酸鹽、辛酸鹽、丙烯酸鹽、甲酸鹽、異丁酸鹽、庚酸鹽、丙炔酸鹽、草酸鹽、丙二酸鹽、琥珀酸鹽、辛二酸鹽、癸二酸鹽、富馬索酸鹽、馬來酸鹽、2-丁炔-1,4-二酸鹽、3-己炔-2,5-二酸鹽、苯甲酸鹽、氯苯甲酸鹽、羥基苯甲酸鹽、、甲氧基苯甲酸鹽、鄰苯二甲酸鹽、二甲苯磺酸鹽、苯基乙酸鹽、苯基丙酸鹽、苯基丁酸鹽、枸櫞酸鹽、乳酸鹽、馬尿酸鹽、β-羥基丁酸鹽、羥乙酸鹽、馬來酸鹽、酒石酸鹽、甲磺酸鹽、丙磺酸鹽、萘-1-磺酸鹽、萘-2-磺酸鹽、扁桃酸鹽等。特別地，使用鹽酸和甲磺酸鹽。
除了可藥用鹽外，也可以存在其它鹽。它們可在化合物的純化中、在其它鹽的制備中、或在化合物或中間體的鑒定和定性中作為中間體。
式Ⅰ、Ⅰa和Ⅰb化合物的可藥用鹽也可以以各種溶劑化物如與水、甲醇、乙醇、二甲基甲酰胺、乙酸乙酯等的溶劑化物的形式存在。也可以制備該溶劑化物的混合物。該溶劑化物的來源可以是結(jié)晶的溶劑、在制備或結(jié)晶的溶劑中固有的或外來的。
應(yīng)理解，可以存在式Ⅰ、Ⅰa和Ⅰb化合物的各種立體異構(gòu)體形式；例如，W可以在取代的亞烷基部分中包含手征性碳原子。通常將化合物制備成外消旋體并且可以方便地以該形式使用?；蛘撸绻枰赏ㄟ^常規(guī)技術(shù)分離或合成兩個(gè)獨(dú)立的對映異構(gòu)體。該外消旋體和獨(dú)立的對映異構(gòu)體及其混合物形成本發(fā)明方法中所使用的化合物部分。在本發(fā)明中所使用的化合物也包括式Ⅰ、Ⅰa和Ⅰb化合物的前體藥物。前體藥物是通過化學(xué)方法修飾并且可在其作用部位通過生物學(xué)方法滅活的藥物，而且，可通過一種或多種酶或其它體內(nèi)方法將其降解或修飾成母體生物活性形式?；蛟S，該前體藥物具有與母體不同的藥動學(xué)特性，能夠更容易地跨粘膜上皮吸收，具有更好的鹽形式或溶解性，和/或改善的系統(tǒng)穩(wěn)定性(例如血漿半衰期增加)。典型地，該化學(xué)修物飾包括1)、可通過酯酶或脂肪酶裂開的酯或酰胺；2)、可通過特異性或非特異性蛋白酶識別的肽；或3)、通過膜選擇前體藥物形式或修飾的前體藥物形式在作用部位蓄積的衍生物；或者上述1-3的任何組合。例如，在H.Bundaard,Design of Prodrug,(1985)中描述了選擇和制備適宜的前體藥物衍生物的常規(guī)方法。
Davis等在美國專利5,057,614中描述了各種二-吲哚-N-馬來酰亞胺衍生物的合成并且先前確定的美國專利5,552,396和Faul等在EP申請0 657 411 A1中描述了適用于本發(fā)明的優(yōu)選化合物的合成，所有這些引入本文供參考。
一種在本發(fā)明方法中使用的特別優(yōu)選的蛋白激酶-β抑制劑為上述美國專利5,552,396實(shí)施例5g中所描述的化合物((S)-3,4-[N,N’-1,1’-((2'''-乙氧基)-3'''(O)-4'''-(N,N-二甲基氨基)-丁烷)-二-(3,3’-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2,5-二酮鹽酸鹽)。該化合物是有效的蛋白激酶C抑制劑。與其它激酶相比其選擇蛋白激酶C并且是高度同功酶選擇性的，即它對β-1和β-2同功酶是選擇性的。該化合物的其它鹽也應(yīng)該是有利的，特別是甲磺酸鹽。
可通過在非反應(yīng)性有機(jī)溶劑，優(yōu)選有機(jī)溶劑/水混合物，并且最優(yōu)選水-丙酮中，將式Ⅱ化合物
與甲磺酸反應(yīng)來制備優(yōu)選的甲磺酸鹽。也可以使用其它溶劑如甲醇、丙酮、乙酸乙酯及其混合物。溶劑與水的比率不重要并且通常通過試劑的溶解性來確定。優(yōu)選的溶劑與水的比例通常為0.1∶1-100∶1，該比例為溶劑與水的體積比。優(yōu)選地，該比例為1∶1-20∶1并且最優(yōu)選5∶1-10∶1。最佳比例依賴于所選擇的溶劑并且優(yōu)選是丙酮，該溶劑與水的比例為9∶1。
盡管其它比例，特別是其中甲磺酸過量的比例是有效的，但該反應(yīng)通常包括大約等摩爾量的兩種試劑。將甲磺酸加到反應(yīng)中的速度不重要并且可以快速加入(＜5分鐘)或用6小時(shí)或更長時(shí)間加入。該反應(yīng)在0℃-回流的溫度范圍內(nèi)進(jìn)行。將反應(yīng)混合物攪拌直至通過X-射線粉末衍射確定完全形成鹽，這需要5分鐘-12小時(shí)。
優(yōu)選并且容易地將本發(fā)明鹽制備成結(jié)晶形式。當(dāng)干燥或暴露在20-60％相對濕度中時(shí)，可以很容易地將該鹽的三水合物轉(zhuǎn)化為一水合物。該鹽基本上是顯示確定熔點(diǎn)、雙折射和X-射線衍射圖形的結(jié)晶。通常該結(jié)晶具有少于10％的非晶形固體并且優(yōu)選具有少于5％并且最優(yōu)選少于1％的非晶形固體。
通過過濾或其它本領(lǐng)域已知的分離技術(shù)直接從反應(yīng)混合物中分離甲磺酸鹽，產(chǎn)率為50％-100％。如果需要，可使用重結(jié)晶或其它本領(lǐng)域已知的純化技術(shù)來進(jìn)一步純化該鹽。
本領(lǐng)域技術(shù)人員將知道，本發(fā)明蛋白激酶C抑制劑治療有效量為足以抑制HTLV-1復(fù)制或抑制病毒蛋白活性如Tax1的量。測定HTLV-1復(fù)制和病毒蛋白活性如Tax1活性的方法是在本領(lǐng)域技術(shù)人員能力內(nèi)的事情。該量特別依賴于治療劑中該化合物的濃度和病人的體重而改變。通常，蛋白激酶C抑制劑作為治療HTLV-1感染的治療劑給予的量將由主治醫(yī)師根據(jù)疾病的狀況確定。作為指導(dǎo)方針，當(dāng)確定適宜的劑量時(shí)，將考慮感染的程度、免疫系統(tǒng)的抵抗力、白細(xì)胞的數(shù)量、病毒的感染量、病人的體重和年齡。
通常，適宜的劑量為在治療部位產(chǎn)生的蛋白激酶C抑制劑的濃度在0.5nM-200μM，通常在0.5nM-20μM，并且更常見在大約0.5nM-200nM范圍內(nèi)的劑量。預(yù)期，在很多狀況下，0.5nM-20nM的血漿濃度應(yīng)該是足夠的。
為了獲得這些治療濃度，可給予需要治療的病人大約0.001mg/天/kg體重-50.0mg/天/kg體重的蛋白激酶C抑制劑。通常，應(yīng)該需要不超過大約10.0mg/天/kg體重的蛋白激酶C抑制劑。如上所述，上述劑量可根據(jù)具體情況改變。
可在本領(lǐng)域容易獲得的幾個(gè)試驗(yàn)裝置中評估本發(fā)明化合物的功效。可測定本發(fā)明化合物對所培養(yǎng)的T細(xì)胞系的生長和存活的作用，其中，所述T細(xì)胞系來自患有與HTLV-1感染相關(guān)的成年T細(xì)胞白血病的病人。也可以測定本發(fā)明化合物對感染細(xì)胞中HTLV-1病毒復(fù)制的作用。也可以測定本發(fā)明化合物對病毒蛋白如Tax1激活所培養(yǎng)細(xì)胞中細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子如NF-κB的能力的作用。見Lindholm等，J.Virology70:2525-2532,1996，將其引入本文供參考。預(yù)期，對于患有HTLV-1感染和與此相關(guān)疾病的病人來說，本發(fā)明化合物減弱病毒蛋白如Tax1誘導(dǎo)的作用、減少病毒復(fù)制和/或抑制HTLV-1感染的T細(xì)胞的生長的能力是有益的臨床作用。
優(yōu)選地，在給藥前，將式Ⅰ化合物及其優(yōu)選的式Ⅰa和Ⅰb化合物配制成制劑。通過已知的方法，利用公知的和容易獲得的賦形劑來制備適宜的藥用制劑。在本發(fā)明方法適用的組合物的制備中，通常，將活性組分與載體混合，或用載體稀釋，或包封在可以以膠囊、小藥囊、紙和其它容器形式存在的載體中。當(dāng)載體用作稀釋劑時(shí)，它可以是固體、半固體或液體物質(zhì)，用作活性組分的載體、賦形劑或介質(zhì)。因此，該組合物可以以片劑、丸劑、粉劑、錠劑、小藥囊、扁囊劑、酏劑、懸浮劑、乳劑、溶液劑、糖漿劑、氣霧劑(作為固體或在液體介質(zhì)中)、軟的和硬的明膠膠囊劑、栓劑、無菌注射溶液和無菌包裝粉劑形式存在，用于口服或局部應(yīng)用。
一些適宜的載體、賦形劑和稀釋劑包括乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露糖醇、淀粉、阿拉伯膠、磷酸鈣、藻酸鹽、西黃蓍膠、明膠、硅酸鈣、微晶纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、纖維素、糖漿、甲基纖維素、羥基苯甲酸甲基和丙基酯、滑石粉、硬脂酸鎂和礦物油。另外，制劑中可包括潤滑劑、濕潤劑、乳化和懸浮劑、防腐劑、甜味劑和調(diào)味劑?？梢詫⒈景l(fā)明組合物配制成給藥后快速、持續(xù)或延遲釋放活性組分的制劑。優(yōu)選地，將本發(fā)明組合物配制成單位劑量形式，各劑量包含大約0.05mg-大約3g，通常大約為750mg的活性組分。然而，已知，所給予的治療劑量將由醫(yī)生根據(jù)相關(guān)情況決定，所述情況包括所治療疾病的嚴(yán)重性、所給予的化合物和給藥途徑。因此，上述劑量范圍不以任何方式限定本發(fā)明。術(shù)語“單位劑量形式”是指通過物理方法完全分離的單位，它適用于作為人或其它哺乳動物單位劑量，各單位中含預(yù)先測定產(chǎn)生所需治療作用量的活性物質(zhì)和適宜的藥用載體。
除了上述制劑外，大多數(shù)制劑可通過口服給予，在本發(fā)明方法中所使用的化合物也可以局部給予。局部制劑包括軟膏、霜劑和凝膠。
通常，利用(1)油狀基質(zhì)，即含固定油或烴如白凡士林或礦物油的基質(zhì)，或(2)吸收基質(zhì)，即含無水物質(zhì)或可吸收水物質(zhì)如無水羊毛脂的基質(zhì)來制備軟膏劑。通常，在油狀或吸收基質(zhì)形成后，將活性組分(化合物)加到可獲得所需濃度的基質(zhì)量中。
霜劑是油/水乳劑。它們包括典型地含固定油、烴等如蠟、凡士林、礦物油等的油相(內(nèi)相)和含水和任何水溶性物質(zhì)如添加的鹽的水相(連續(xù)相)。利用乳化劑，例如表面活性劑如十二烷基硫酸鈉；親水膠體如阿拉伯膠樣粘土，鋁硅酸鎂鹽等來穩(wěn)定兩相。通常，基于乳化形成時(shí)，以獲得所需濃度的量加入活性組分(化合物)。
凝膠包含選自油狀基質(zhì)、水或乳劑-懸浮液基質(zhì)的基質(zhì)。向基質(zhì)中加入膠凝劑，該凝膠劑在基質(zhì)中形成一種新基質(zhì)來增加其粘度。凝膠劑的實(shí)例為羥丙基纖維素、丙烯酸聚合物等。通常，在加入凝膠劑前，將活性組分以所需濃度加到該制劑中。
局部用藥制劑中所加入的化合物的量不是重要的；該化合物的濃度應(yīng)該在一個(gè)范圍內(nèi)，該范圍足以讓準(zhǔn)備應(yīng)用的制劑以釋放所需量化合物到達(dá)所需治療部位的量應(yīng)用到受影響的組織區(qū)域。
應(yīng)用到受影響組織的局部應(yīng)用制劑的常規(guī)量依賴于制劑中化合物的濃度。通常，該制劑將以獲得大約1-500μg化合物/cm2受影響組織的量應(yīng)用于受影響組織。優(yōu)選地，所應(yīng)用的化合物的量大約為30-300μg/cm2，更優(yōu)選大約為50-200μg/cm2，并且最優(yōu)選大約為60-100μg/cm2。
下列制劑的實(shí)例僅用于說明而不以任何方式限定本發(fā)明范圍。制劑1利用下列組分制備硬明膠膠囊量(mg/膠囊)活性劑 5干燥淀粉200硬脂酸鎂10總量215mg將上述組分混合并以460mg的量填充到硬明膠膠囊中。制劑2利用下列組分制備片劑量(mg/膠囊)活性劑 15微晶纖維素 10發(fā)煙二氧化硅10硬脂酸 5總量 40mg將上述組分混合并壓片，每片重665mg。制劑3如下制備各含60mg活性組分的片劑量(mg/膠囊)活性劑 60mg淀粉45mg微晶纖維素 35mg聚乙烯吡咯烷酮(10％的水溶液) 4mg羧甲基淀粉鈉4.5mg硬脂酸鎂0.5mg滑石粉 1mg總量 150mg將上述組分、淀粉和纖維素通過45目美國篩并徹底混合。將聚乙烯吡咯烷酮的溶液與所得到的粉劑混合，然后通過14目美國篩。將由此得到的顆粒在50℃下干燥并通過18目美國篩。然后，將預(yù)先通過60目美國篩的羧甲基淀粉鈉、硬脂酸鎂和滑石粉加到該顆粒中，混合后，將其在在壓片機(jī)上壓片，得到每片重150mg的片劑。
在上述說明書中已經(jīng)描述了本發(fā)明的原理、優(yōu)選的實(shí)施方案和作用方式。然而，本文中要保護(hù)的本發(fā)明不解釋為用于限定所公開的特定形式，因?yàn)樗鼈儗⒈豢醋魇怯脕碚f明而不是限制。本領(lǐng)域技術(shù)人員可進(jìn)行改變，在不違背本發(fā)明精神情況下。
權(quán)利要求
1.一種抑制感染細(xì)胞中1型T細(xì)胞親淋巴性病毒復(fù)制的方法，它包括讓所述細(xì)胞與病毒復(fù)制抑制量蛋白激酶C的β同功酶抑制劑接觸。
2.權(quán)利要求1方法，其中蛋白激酶C的β同功酶抑制劑為二-吲哚基馬來酰亞胺或大環(huán)的二-吲哚基馬來酰亞胺。
3.權(quán)利要求1方法，其中所述抑制劑是同功酶選擇性的并且其中同功酶的選擇性選自β-1和β-2同功酶。
4.權(quán)利要求3方法，其中蛋白激酶C抑制劑為式(Ⅰ)化合物或其可藥用鹽、前體藥物或酯
其中W為-O-、-S-、-SO-、-SO2-、-CO-、C2-C6亞烷基、取代的亞烷基、C2-C6亞烯基、-芳基-、-芳基(CH2)mO-、-雜環(huán)-、-雜環(huán)-(CH2)mO-、-稠合的二環(huán)-、-稠合的二環(huán)-(CH2)mO-、-NR3-、-NOR3-、-CONH-或-NHCO-；X和Y獨(dú)立地為C1-C4亞烷基、取代的亞烷基、或者X、Y和W一起合并形成-(CH2)n-AA-；R1為氫或不超過4個(gè)取代或未取代的取代基，所述取代基獨(dú)立地選自鹵素、C1-C4烷基、羥基、C1-C4烷氧基、鹵代烷基、硝基、-NR4R5-或-NHCO(C1-C4烷基)；R2為氫、CH3CO-、-NH2或羥基；R3為氫、-(CH2)m芳基、-C1-C4烷基、-COO(C1-C4烷基)、-CONR4R5、-(C=NH)NH2、-SO(C4-C4烷基)、-SO2-(NR4R5)或-SO2(C1-C4烷基)；R4和R5獨(dú)立地為氫、C1-C4烷基、苯基、芐基或與它們所連接的氮一起形成飽和的或不飽和的5或6元環(huán)；AA為氨基酸殘基；m獨(dú)立地為0,1,2，或3；并且n獨(dú)立地為2,3,4或5。
5.權(quán)利要求4方法，其中蛋白激酶C抑制劑為式(Ⅰa)化合物或其可藥用鹽，前體藥物或酯
其中Z為-(CH2)p-或-(CH2)p-O-(CH2)p-；R4為羥基、-SH、C1-C4烷基、-(CH2)m芳基、-NH(芳基)、-N(CH3)(CF3)、-NH(CF3)或-NR5R6；R5為氫或C1-C4烷基；R6為氫、C1-C4烷基或芐基；p為0,1，或2；并且m獨(dú)立地為2或3。
6.權(quán)利要求4方法，其中蛋白激酶C抑制劑為式(Ⅰb)化合物或其可藥用鹽、前體藥物或酯
其中Z為-(CH2)p-；R4為-NR5R6、-NH(CF3)或-N(CH3)(CF3)；R5和R6獨(dú)立地為H或C1-C4烷基；p為0,1，或2；并且m獨(dú)立地為2或3。
7.權(quán)利要求4方法，其中蛋白激酶C抑制劑包含(S)-3,4-[N,N’-1,1’-((2”-乙氧基)-3'''(O)-4'''-(N,N-二甲基氨基)-丁烷)-二-(3,3’-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2,5-二酮或其可藥用酸的鹽。
8.權(quán)利要求7方法，其中可藥用酸的鹽選自鹽酸鹽和甲磺酸鹽。
9.一種抑制細(xì)胞中Tax1病毒蛋白活性作用的方法，它包括讓所述細(xì)胞與病毒蛋白活性抑制量的蛋白激酶C的β同功酶抑制劑接觸。
10.權(quán)利要求9方法，其中蛋白激酶C的β同功酶抑制劑為二-吲哚基馬來酰亞胺或大環(huán)的二-吲哚基馬來酰亞胺。
11.權(quán)利要求9方法，其中所述抑制劑是同功酶選擇性的并且其中同功酶的選擇性選自β-1和β-2同功酶。
12.權(quán)利要求11方法，其中蛋白激酶C抑制劑為式(Ⅰ)化合物或其可藥用鹽、前體藥物或酯
其中W為-O-、-S-、-SO-、-SO2-、-CO-、C2-C6亞烷基、取代的亞烷基、C2-C6亞烯基、-芳基-、-芳基(CH2)mO-、-雜環(huán)-、-雜環(huán)-(CH2)mO-、-稠合的二環(huán)-、-稠合的二環(huán)-(CH2)mO-、-NR3-、-NOR3-、-CONH-或-NHCO-；X和Y獨(dú)立地為C1-C4亞烷基、取代的亞烷基、或者X、Y和W一起合并形成-(CH2)n-AA-；R1為氫或不超過4個(gè)取代或未取代的取代基，所述取代基獨(dú)立地選自鹵素、C1-C4烷基、羥基、C1-C4烷氧基、鹵代烷基、硝基、-NR4R5-或-NHCO(C1-C4烷基)；R2為氫、CH3CO-、-NH2或羥基；R3為氫、-(CH2)m芳基、-C1-C4烷基、-COO(C1-C4烷基)、-CONR4R5、-(C=NH)NH2、-SO(C1-C4烷基)、-SO2-(NR4R5)或-SO2(C1-C4烷基)；R4和R5獨(dú)立地為氫、C1-C4烷基、苯基、芐基或與它們所連接的氮一起形成飽和的或不飽和的5或6元環(huán)；AA為氨基酸殘基；m獨(dú)立地為0,1,2，或3；并且n獨(dú)立地為2,3,4或5。
13.權(quán)利要求12方法，其中蛋白激酶C抑制劑為式(Ⅰa)化合物或其可藥用鹽、前體藥物或酯
其中Z為-(CH2)p-或-(CH2)p-O-(CH2)p-；R4為羥基、-SH、C1-C4烷基、-(CH2)m芳基、-NH(芳基)、-N(CH3)(CF3)、-NH(CF3)或-NR5R6；R5為氫或C1-C4烷基；R6為氫、C1-C4烷基或芐基；p為0,1，或2；并且m獨(dú)立地為2或3。
14.權(quán)利要求12方法，其中蛋白激酶C抑制劑為式(Ⅰb)化合物或其可藥用鹽、前體藥物或酯
其中Z為-(CH2)p-；R4為-NR5R6、-NH(CF3)或-N(CH3)(CF3)；R5和R6獨(dú)立地為H或C1-C4烷基；p為0,1，或2；并且m獨(dú)立地為2或3。
15.權(quán)利要求12方法，其中所述蛋白激酶C抑制劑包含(S)-3,4-[N,N’-1,1’-((2'''-乙氧基)-3'''(O)-4'''-(N,N-二甲基氨基)-丁烷)-二-(3,3’-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2,5-二酮或其可藥用酸的鹽。
16.權(quán)利要求15方法，其中可藥用酸的鹽選自鹽酸鹽和甲磺酸鹽。
17.一種治療感染1型人T細(xì)胞親淋巴性病毒的哺乳動物的方法，它包括給予所述哺乳動物治療有效量的蛋白激酶C的β同功酶抑制劑。
18.權(quán)利要求17方法，其中蛋白激酶C的β同功酶抑制劑為二-吲哚基馬來酰亞胺或大環(huán)的二-吲哚基馬來酰亞胺。
19.權(quán)利要求17方法，其中所述抑制劑是同功酶選擇性的并且其中同功酶的選擇性選自β-1和β-2同功酶。
20.權(quán)利要求19方法，其中蛋白激酶C抑制劑為式(Ⅰ)化合物或其可藥用鹽、前體藥物或酯
其中W為-O-、-S-、-SO-、-SO2-、-CO-、C2-C6亞烷基、取代的亞烷基、C2-C6亞烯基、-芳基-、-芳基(CH2)mO-、-雜環(huán)-、-雜環(huán)-(CH2)mO-、-稠合的二環(huán)-、-稠合的二環(huán)-(CH2)mO-、-NR3-、-NOR3-、-CONH-或-NHCO-；X和Y獨(dú)立地為C1-C4亞烷基、取代的亞烷基、或者X、Y和W一起合并形成-(CH2)n-AA-；R1為氫或不超過4個(gè)取代或未取代的取代基，所述取代基獨(dú)立地選自鹵素、C1-C4烷基、羥基、C1-C4烷氧基、鹵代烷基、硝基、-NR4R5-或-NHCO(C1-C4烷基)；R2為氫、CH3CO-、-NH2或羥基；R4為氫、-(CH2)m芳基、-C1-C4烷基、-COO(C1-C4烷基)、-CONR4R5、-(C=NH)NH2、-SO(C1-C4烷基)、-SO2-(NR4R5)或-SO2(C1-C4烷基)；R4和R5獨(dú)立地為氫、C1-C4烷基、苯基、芐基或與它們所連接的氮一起形成飽和的或不飽和的5或6元環(huán)；AA為氨基酸殘基；m獨(dú)立地為0,1,2，或3；并且n獨(dú)立地為2,3,4或5。
21.權(quán)利要求20方法，其中蛋白激酶C抑制劑為式(Ⅰa)化合物或其可藥用鹽、前體藥物或酯
其中Z為-(CH2)p-或-(CH2)p-O-(CH2)p-；R4為羥基、-SH、C1-C4烷基、-(CH2)m芳基、-NH(芳基)、-N(CH3)(CF3)、-NH(CF3)或-NR5R6；R5為氫或C1-C4烷基；R6為氫、C1-C4烷基或芐基；p為0,1，或2；并且m獨(dú)立地為2或3。
22.權(quán)利要求20方法，其中蛋白激酶C抑制劑為式(Ⅰb)化合物或其可藥用鹽、前體藥物或酯
其中Z為-(CH2)p-；R4為-NR5R6、-NH(CF3)或-N(CH3)(CF3)；R5和R6獨(dú)立地為H或C1-C4烷基；p為0,1，或2；并且m獨(dú)立地為2或3。
23.權(quán)利要求20方法，其中所述蛋白激酶C抑制劑包含(S)-3,4-[N,N’-1,1’-((2'''-乙氧基)-3'''(O)-4'''-(N,N-二甲基氨基)-丁烷)-二-(3,3’-吲哚基)]-1(H)-吡咯-2,5-二酮或其可藥用酸的鹽。
24.權(quán)利要求23方法，其中可藥用酸的鹽選自鹽酸鹽和甲磺酸鹽。
25.一種治療與1型人T細(xì)胞親淋巴性病毒感染相關(guān)的成年T細(xì)胞白血病的方法，它包括給予需要該治療的所述成年人治療有效量的蛋白激酶C的β同功酶抑制劑。
26.一種治療與1型人T細(xì)胞病毒感染相關(guān)的慢性神經(jīng)變性性疾病的方法，它包括給予需要該治療的所述哺乳動物治療有效量的蛋白激酶C的β同功酶抑制劑。
27.權(quán)利要求26方法，其中所述慢性神經(jīng)變性性疾病選自熱帶強(qiáng)直性下身輕癱和脊髓病。
全文摘要
本文公開了利用同功酶選擇性PKC抑制劑特別是應(yīng)用同功酶選擇性PKC抑制劑(S)－3,4－[N,N’－1,1’－((2”－乙氧基)－3”’(O)－4”’－(N,N－二甲基氨基)－丁烷)－二－(3,3’－吲哚基)]－1(H)－吡咯－2,5－二酮鹽酸鹽來治療1型人T細(xì)胞親淋巴性病毒感染的方法。
文檔編號A61K31/407GK1231608SQ97198160
公開日1999年10月13日 申請日期1997年8月28日 優(yōu)先權(quán)日1996年8月30日
發(fā)明者M·R·吉勞塞克, D·K·維斯, L·E·斯特拉姆 申請人:伊萊利利公司