專利名稱：用作法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑的新的三環(huán)n－氰亞胺類化合物的制作方法
背景專利申請(qǐng)WO 95/00497(1995年1月5日公開，Patent CooperationTreaty(PCT))公開抑制酶-法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶(FTase)和癌基因蛋白質(zhì)Ras法呢基化的化合物。致癌基因通常編碼信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的蛋白組分，該轉(zhuǎn)導(dǎo)通路導(dǎo)致刺激細(xì)胞生長(zhǎng)和有絲分裂的發(fā)生。在培養(yǎng)的細(xì)胞中的致癌基因的表達(dá)產(chǎn)生細(xì)胞轉(zhuǎn)化，其特征為細(xì)胞在軟瓊脂中的生長(zhǎng)能力以及由非-轉(zhuǎn)化細(xì)胞顯示的缺乏接觸抑制的細(xì)胞的濃集(dense foci)生長(zhǎng)。某些致癌基因的突變和/或超表達(dá)常常與人類中的癌癥有關(guān)。
為獲得轉(zhuǎn)化能力，Ras癌蛋白質(zhì)的前體必須經(jīng)歷位于羧基末端四肽中半胱氨酸殘基的法呢基化。因此，建議用催化該修飾的酶-法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶的抑制劑作為腫瘤的抗癌藥物，在該腫瘤中Ras有助于轉(zhuǎn)化。在許多人類癌癥，最顯著的為在50％以上的結(jié)腸癌和胰腺癌中，常常發(fā)現(xiàn)Ras的突變、致癌形式(Kohl等，Science，第260卷，1834-1837頁(yè)，1993)。
從目前對(duì)法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶的興趣來看，本領(lǐng)域所歡迎的貢獻(xiàn)為發(fā)現(xiàn)用于抑制法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶的另外的化合物。本發(fā)明提供這種貢獻(xiàn)。
本發(fā)明的概述以前未有用本發(fā)明的三環(huán)類化合物抑制法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶的報(bào)道。因此，本發(fā)明提供用本發(fā)明的三環(huán)類化合物抑制法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶的方法，該方法包括(ⅰ)在體外可以有效抑制法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶，但是不抑制香葉基香葉基蛋白轉(zhuǎn)移酶Ⅰ；(ⅱ)阻斷由轉(zhuǎn)化Ras形式(法呢基受體)誘導(dǎo)的表型變化，而該變化不被改造為香葉基香葉基受體的轉(zhuǎn)化Ras形式所誘導(dǎo)；(ⅲ)阻斷為法呢基受體的Ras的細(xì)胞內(nèi)加工，而不阻斷改造的香葉基香葉基受體的Ras的細(xì)胞內(nèi)加工；并(ⅳ)阻斷由轉(zhuǎn)化Ras誘導(dǎo)的培養(yǎng)基中細(xì)胞的異常生長(zhǎng)。在動(dòng)物模型中已經(jīng)證明本發(fā)明的數(shù)種化合物具有抗腫瘤活性。
本發(fā)明提供通過給予有效量的本發(fā)明的化合物從而抑制細(xì)胞(包括轉(zhuǎn)化細(xì)胞)異常生長(zhǎng)的方法。細(xì)胞的異常生長(zhǎng)指細(xì)胞不依賴于正常的調(diào)節(jié)機(jī)制生長(zhǎng)(如接觸抑制喪失)。這包括下列細(xì)胞的異常生長(zhǎng)(1)表達(dá)激活的Ras致癌基因的腫瘤細(xì)胞(腫瘤)；(2)其中由于另一個(gè)基因的致癌突變使Ras蛋白被激活的腫瘤細(xì)胞；和(3)其它產(chǎn)生異常Ras激活的增生性疾病的良性和惡性細(xì)胞。
由式1.0代表用于權(quán)利要求的方法的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物
其中a、b、c和d之一代表N或NR9，其中R9代表O-、-CH3或-(CH2)nCO2H，其中n為1-3，而其余的a、b、c和d基團(tuán)代表CR1或CR2；或每個(gè)a、b、c和d獨(dú)立選自CR1或CR2；每個(gè)R1和每個(gè)R2獨(dú)立選自H、鹵代、-CF3、-OR10(如-OCH3)、-COR10、-SR10(如-SCH3和-SCH2C6H5)、-S(O)tR11(其中t為0、1或2，如-SOCH3和-SO2CH3)、-SCN、-N(R10)2、-NR10R11、-NO2、-OC(O)R10、-CO2R10、-OCO2R11、-CN、-NHC(O)R10、-NHSO2R10、-CONHR10、-CONHCH2CH2OH、-NR10COOR11、-SR11C(O)OR11(如-SCH2CO2CH3)、-SR11N(R75)2，其中每個(gè)R75獨(dú)立選自H和-C(O)OR11(如-S(CH2)2NHC(O)O-t-丁基和-S(CH2)2NH2)、苯并三唑-1-基氧基、四唑-5-基硫基或取代的四唑-5-基硫基(如烷基取代的四唑-5-基硫基，像1-甲基-四唑-5-基硫基)、炔基、鏈烯基或烷基，所述烷基或鏈烯基任選被鹵素、-OR10或-CO2R10取代；R3和R4相同或不同，分別獨(dú)立代表H，R1和R2或R3和R4的任何取代基可以一起代表與苯環(huán)(環(huán)Ⅲ)稠合的飽和的或未飽和的C5-C7元環(huán)；R5、R6、R7和R8分別獨(dú)立代表H、-CF3、-COR10、烷基或芳基，所述烷基或芳基任選被-OR10、-SR10、-S(O)tR11、-NR10COOR11、-N(R10)2、-NO2、-COR10、-OCOR10、-OCO2R11、-CO2R10、-OPO3R10取代，或R5、R6、R7和R8之一與下述定義的R40一起代表-(CH2)r-，其中r為1-4，它可以被低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、-CF3或芳基取代，或R5與R6一起代表=O或=S，和/或R7與R8一起代表=O或=S；R10和R12獨(dú)立代表H、烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、雜芳基、芳基、芳烷基或-NR40R42，其中R40和R42獨(dú)立代表H、芳基、烷基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環(huán)烷基、雜環(huán)烷基烷基、雜烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、鏈烯基和炔基；R11代表烷基或芳基；X代表N、CH或C，使當(dāng)X為N或CH時(shí)，有一個(gè)用實(shí)線表示的與碳原子11相連的單鍵；或當(dāng)X為C時(shí)，有一個(gè)用實(shí)線和點(diǎn)線表示的與碳原子11相連的雙鍵；碳原子5和6之間的點(diǎn)線表示任選的雙鍵，使當(dāng)存在雙鍵時(shí)，A和B獨(dú)立代表-NO2、-R10、鹵代、-OR11、-OCO2R11或-OC(O)R10，當(dāng)碳原子5和6之間不存在雙鍵時(shí)，A和B分別獨(dú)立代表H2、-(OR11)2、H和鹵代、二鹵代、烷基和H、(烷基)2、-H和-OC(O)R10、H和-OR10、氧代、芳基和H、=NOR10或-O-(CH2)p-O-，其中p為2、3或4；和Z代表烷基、芳基、芳烷基、雜烷基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環(huán)烷基、雜環(huán)烷基烷基、-OR40、-SR40、-CR40R42或-NR40R42，其中R40和R42與上述定義相同；優(yōu)選在化合物(1.0)中，在碳原子11上有一個(gè)單鍵，X為碳，環(huán)上的3位、8位和10位優(yōu)選被鹵素取代；Z為-NHR40，優(yōu)選其中的R40為雜芳基烷基，更優(yōu)選為3或4-甲基吡啶基N-氧化物。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及抑制細(xì)胞異常生長(zhǎng)的藥用組合物，該組合物包括有效量的化合物(1.0)以及藥學(xué)上可接受的載體。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及抑制細(xì)胞(包括轉(zhuǎn)化細(xì)胞)異常生長(zhǎng)的方法，該方法包括給予需要此治療的哺乳動(dòng)物(如人類)有效量的化合物(1.0)。細(xì)胞的異常生長(zhǎng)指細(xì)胞不依賴于正常的調(diào)節(jié)機(jī)制生長(zhǎng)(如接觸抑制喪失)。這包括下列細(xì)胞的異常生長(zhǎng)(1)表達(dá)激活的Ras致癌基因的腫瘤細(xì)胞(腫瘤)；(2)其中由于另一個(gè)基因的致癌突變使Ras蛋白被激活的腫瘤細(xì)胞；(3)其它產(chǎn)生異常Ras激活的增生性疾病的良性和惡性細(xì)胞；和(4)由除Ras蛋白機(jī)制之外的其它機(jī)制激活的良性和惡性細(xì)胞。不希望受縛于任何理論，但是我們認(rèn)為這些化合物可以通過阻斷G-蛋白異戊二烯化，而抑制G-蛋白例如ras p21功能起作用，因此它們可以用于治療增生性疾病例如治療腫瘤生長(zhǎng)和癌癥，或者通過抑制ras法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶起作用，因此它們可以對(duì)于ras轉(zhuǎn)化的細(xì)胞具有抗增生活性。
可被抑制的細(xì)胞可以是表達(dá)激活的ras致癌基因的腫瘤細(xì)胞。例如，可以被抑制的細(xì)胞類型包括胰腺腫瘤細(xì)胞、肺癌細(xì)胞、骨髓性白血病腫瘤細(xì)胞、甲狀腺囊腫瘤細(xì)胞、骨髓增生異常腫瘤細(xì)胞、表皮癌腫瘤細(xì)胞、膀胱癌腫瘤細(xì)胞或結(jié)腸腫瘤細(xì)胞。而且，用化合物(1.0)治療的細(xì)胞異常生長(zhǎng)的抑制也可以是通過抑制ras法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶。該抑制可以是腫瘤細(xì)胞的抑制，其中Ras蛋白由于除Ras基因以外的基因的致癌突變而被激活。另外，化合物(1.0)可以抑制被除Ras蛋白以外的蛋白激活的腫瘤細(xì)胞。
本發(fā)明也提供通過給予需要此治療的哺乳動(dòng)物(如人類)有效量的化合物(1.0)從而抑制腫瘤生長(zhǎng)的方法，具體地講，本發(fā)明提供通過給予有效量的上述化合物，從而抑制表達(dá)激活的Ras致癌基因的腫瘤生長(zhǎng)的方法?？梢员灰种频哪[瘤的實(shí)例包括(但不限于)肺癌(如肺腺癌)、胰腺癌(如胰腺癌像外分泌胰腺癌)、結(jié)腸癌(如結(jié)腸直腸癌，像結(jié)腸腺癌和結(jié)腸腺瘤)、骨髓性白血病(如急性骨髓性白血病(AML))、甲狀腺囊癌、骨髓發(fā)育不良綜合征(MDS)、膀胱癌和表皮癌。
我們認(rèn)為本發(fā)明也提供抑制增生性疾病的方法，所述增生性疾病包括良性的和惡性的，其中Ras蛋白由于其它基因的致癌性突變而被異常激活，即Ras基因本身并不被突變激活為致癌形式，所述抑制通過給予需要此治療的哺乳動(dòng)物(如人類)有效量的在此所述的羰基哌嗪基和哌啶基化合物(1.0)而獲得。例如，其中Ras由于酪氨酸激酶致癌基因(如neu、src、abl、lck和fyn)的突變或超表達(dá)而使Ras被激活的良性的增生性神經(jīng)纖維瘤或腫瘤可以被在此所述的羰基哌嗪基和哌啶基化合物(1.0)所抑制。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及通過給予哺乳動(dòng)物特別是人類有效量的化合物(1.0)，從而抑制ras法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶和致癌基因蛋白質(zhì)Ras法呢基化的方法。給予病人抑制法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶的本發(fā)明的化合物可以用于治療上述癌癥。
本發(fā)明的詳述如在此所述，下列術(shù)語(yǔ)除特別指明外具有下列意義M+-代表質(zhì)譜中的分子的分子離子；MH+-代表質(zhì)譜中的分子的分子離子加氫；Bu-代表丁基；
Et-代表乙基；Me-代表甲基；Ph-代表苯基；苯并三唑-1-基氧基代表
1-甲基-四唑-5-基硫基代表
烷基-(包括烷氧基、烷基氨基和二烷基氨基的烷基部分)-代表包含1-20個(gè)碳原子，優(yōu)選1-6個(gè)碳原子的直鏈和支鏈的碳鏈；例如甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、叔丁基、正戊基、異戊基、已基等；其中所述烷基可任選和獨(dú)立被一個(gè)、兩個(gè)、三個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代鹵代、烷基、芳基、烷氧基、氨基、烷氨基、氰基、-CF3、二烷基氨基、羥基、氧代(=O)、苯氧基、-OCF3、雜環(huán)烷基、-SO2NH2、-NHSO2R10、-SO2NHR10、-SO2R10、-SOR10、-SR10、-NHSO2、-NO2、-CONR10、-NCOR10或-COOR10；烷氧基-通過氧原子與相鄰結(jié)構(gòu)元素共價(jià)相連的1-20個(gè)碳原子的烷基部分，例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、戊氧基、己氧基等；其中所述烷氧基可任選和獨(dú)立被一個(gè)、兩個(gè)、三個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代鹵代、烷基、芳基、烷氧基、氨基、烷氨基、氰基、-CF3、二烷氨基、羥基、氧代、苯氧基、-OCF3、雜環(huán)烷基、-SO2NH2、-NHSO2R10、-SO2NHR10、-SO2R10、-SOR10、-SR10、-NHSO2、-NO2、-CONR10、-NCOR10或-COOR10；鏈烯基-代表具有至少一個(gè)碳碳雙鍵和包含2-12個(gè)碳原子，優(yōu)選2-6個(gè)碳原子，最優(yōu)選3-6個(gè)碳原子的直鏈和支鏈碳鏈；其中所述鏈烯基可任選和獨(dú)立被一個(gè)、兩個(gè)、三個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代鹵代、烷基、芳基、烷氧基、氨基、烷氨基、氰基、-CF3、二烷氨基、羥基、氧代、苯氧基、-OCF3、雜環(huán)烷基、-SO2NH2、-NHSO2R10、-SO2NHR10、-SO2R10、-SOR10、-SR10、-NHSO2、-NO2、-CONR10、-NCOR10或-COOR10；炔基-代表具有至少一個(gè)碳碳三鍵和包含2-12個(gè)碳原子，優(yōu)選2-6個(gè)碳原子的直鏈和支鏈碳鏈；其中所述炔基可任選和獨(dú)立被一個(gè)、兩個(gè)、三個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代鹵代、烷基、芳基、烷氧基、氨基、烷氨基、氰基、-CF3、二烷氨基、羥基、氧代、苯氧基、-OCF3、雜環(huán)烷基、-SO2NH2、-NHSO2R10、-SO2NHR10、-SO2R10、-SOR10、-SR10、-NHSO2、-NO2、-CONR10、-NCOR10或-COOR10；芳基(包括芳烷基的芳基部分)-代表含有6-15個(gè)碳原子和具有至少一個(gè)芳香環(huán)(如芳基為苯基)的碳環(huán)基，其中所述芳基任選可與芳基、環(huán)烷基、雜芳基或雜環(huán)烷基環(huán)稠合；且其中所述芳基和/或所述稠合環(huán)上的任何可取代碳原子和氮原子可任選和獨(dú)立被一個(gè)、兩個(gè)、三個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代鹵代、烷基、芳基、烷氧基、氨基、烷氨基、氰基、-CF3、二烷氨基、羥基、氧代、苯氧基、-OCF3、雜環(huán)烷基、-SO2NH2、-NHSO2R10、-SO2NHR10、-SO2R10、-SOR10、-SR10、-NHSO2、-NO2、-CONR10、-NCOR10或-COOR10；芳烷基-代表如上定義的烷基，其中所述烷基部分的一個(gè)或多個(gè)氫原子被一個(gè)或多個(gè)芳基取代；其中所述芳烷基可任選和獨(dú)立被一個(gè)、兩個(gè)、三個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代鹵代、烷基、芳基、烷氧基、氨基、烷氨基、氰基、-CF3、二烷氨基、羥基、氧代、苯氧基、-OCF3、雜環(huán)烷基、-SO2NH2、-NHSO2R10、-SO2NHR10、-SO2R10、-SOR10、-SR10、-NHSO2、-NO2、-CONR10、-NCOR10或-COOR10；芳烷基的代表性實(shí)例包括芐基和二苯基甲基；環(huán)烷基-代表3-20個(gè)碳原子，優(yōu)選3-7個(gè)碳原子的支鏈或無(wú)支鏈的飽和碳環(huán)，其中所述環(huán)烷基可任選和獨(dú)立被一個(gè)、兩個(gè)、三個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代鹵代、烷基、芳基、烷氧基、氨基、烷氨基、氰基、-CF3、二烷氨基、羥基、氧代、苯氧基、-OCF3、雜環(huán)烷基、-SO2NH2、-NHSO2R10、-SO2NHR10、-SO2R10、-SOR10、-SR10、-NHSO2、-NO2、-CONR10、-NCOR10或-COOR10；環(huán)烷基烷基-代表上述定義的烷基，其中所述烷基部分的一個(gè)或多個(gè)氫原子被一個(gè)或多個(gè)環(huán)烷基取代；其中所述環(huán)烷基烷基可任選和獨(dú)立被一個(gè)、兩個(gè)、三個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代鹵代、烷基、芳基、烷氧基、氨基、烷氨基、氰基、-CF3、二烷氨基、羥基、氧代、苯氧基、-OCF3、雜環(huán)烷基、-SO2NH2、-NHSO2R10、-SO2NHR10、-SO2R10、-SOR10、-SR10、-NHSO2、-NO2、-CONR10、-NCOR10或-COOR10；鹵代-代表氟、氯、溴和碘；雜烷基-代表含有1-20個(gè)碳原子，優(yōu)選1-6個(gè)碳原子被1-3個(gè)選自-O-、-S-和-N-的雜原子間斷的直鏈和支鏈碳鏈，其中所述雜烷基鏈上的任何可取代的碳原子和氮原子可任選和獨(dú)立被一個(gè)、兩個(gè)、三個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代鹵代、C1-C6烷基、芳基、氰基、羥基、烷氧基、氧代、苯氧基、-CF3、-OCF3、氨基、烷氨基、二烷氨基、雜環(huán)烷基、-SO2NH2、-NHSO2R10、-SO2NHR10、-SO2R10、-SOR10、-SR10或-NHSO2、-NO2、-CONR10、-NCOR10或-COOR10；雜芳基-代表含有至少一個(gè)選自O(shè)、S和N的雜原子的環(huán)基，所述雜原子將碳環(huán)結(jié)構(gòu)間斷并具有足夠數(shù)目的離域pi電子以具有芳族特征，并且所述芳雜環(huán)基含有2-14個(gè)碳原子，其中所述雜芳基可任選與一個(gè)或多個(gè)芳基、環(huán)烷基、雜芳基或雜環(huán)烷基環(huán)稠合；其中所述雜芳基和/或所述稠合的環(huán)上的任何可取代的碳原子或氮原子可任選和獨(dú)立被一個(gè)、兩個(gè)、三個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代鹵代、C1-C6烷基、芳基、氰基、羥基、烷氧基、氧代、苯氧基、-CF3、-OCF3、氨基、烷氨基、二烷氨基、雜環(huán)烷基、-SO2NH2、-NHSO2R10、-SO2NHR10、-SO2R10、-SOR10、-SR10或-NHSO2、-NO2、-CONR10、-NCOR10或-COOR10。雜芳基的代表性實(shí)例包括例如法呢基、咪唑基、嘧啶基、三唑基、2-、3-或4-吡啶基或2-、3-或4-吡啶基N-氧化物，其中吡啶基N-氧化物可以表示為
雜芳基烷基-代表上述定義的烷基，其中一個(gè)或多個(gè)氫原子已被一個(gè)或多個(gè)雜芳基取代；其中所述雜芳基烷基可任選和獨(dú)立被一個(gè)、兩個(gè)、三個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代鹵代、烷基、芳基、烷氧基、氨基、烷氨基、氰基、-CF3、二烷氨基、羥基、氧代、苯氧基、-OCF3、雜環(huán)烷基、-SO2NH2、-NHSO2R10、-SO2NHR10、-SO2R10、-SOR10、-SR10、-NHSO2、-NO2、-CONR10、-NCOR10或-COOR10；實(shí)例為2-、3-或4-吡啶基甲基或2-、3-或4-吡啶基甲基N-氧化物；雜環(huán)烷基-代表含有3-15個(gè)碳原子，優(yōu)選4-6個(gè)碳原子的飽和的、支鏈或無(wú)支鏈的碳環(huán)，該碳環(huán)被1-3個(gè)選自-O-、-S-和-N-的雜原子間斷，其中任選所述環(huán)可以含有一個(gè)或兩個(gè)不賦予所述環(huán)芳族特征的不飽和鍵；其中所述環(huán)的任何可取代的碳原子和氮原子可任選和獨(dú)立被一個(gè)、兩個(gè)、三個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代鹵代、烷基、芳基、烷氧基、氨基、烷氨基、氰基、-CF3、二烷氨基、羥基、氧代、苯氧基、-OCF3、雜環(huán)烷基、-SO2NH2、-NHSO2R10、-SO2NHR10、-SO2R10、-SOR10、-SR10、-NHSO2、-NO2、-CONR10、-NCOR10或-COOR10。代表性雜環(huán)烷基可以包括2-或3-四氫呋喃基、2-或3-四氫噻吩基、1-、2-、3-或4-哌啶基、2-或3-吡咯烷基、1-、2-或3-哌嗪基、2-或4-二氧六環(huán)基、嗎啉基、
其中R1與上述定義相同，t為0、1或2。
雜環(huán)烷基烷基-代表上述定義的烷基，其中一個(gè)或多個(gè)氫原子已被一個(gè)或多個(gè)雜環(huán)烷基取代；其中任選所述環(huán)可以含有一個(gè)或兩個(gè)不賦予所述環(huán)芳族特征的不飽和鍵；其中所述雜環(huán)烷基烷基可任選和獨(dú)立被一個(gè)、兩個(gè)、三個(gè)或多個(gè)下列基團(tuán)取代鹵代、烷基、芳基、烷氧基、氨基、烷氨基、氰基、-CF3、二烷氨基、羥基、氧代、苯氧基、-OCF3、雜環(huán)烷基、-SO2NH2、-NHSO2R10、-SO2NHR10、-SO2R10、-SOR10、-SR10、-NHSO2、-NO2、-CONR10、-NCOR10或-COOR10。
下列溶劑和試劑用指定的縮寫表示四氫呋喃(THF)；乙醇(EtOH)；甲醇(MeOH)；乙酸(HOAc或AcOH)；乙酸乙酯(EtOAc)；N,N-二甲基甲酰胺(DMF)；三氟乙酸(TFA)；三氟乙酸酐(TFAA)；1-羥基苯并三唑(HOBT)；間-氯代過苯甲酸(MCPBA)；三乙胺(Et3N)；乙醚(Et2O)；氯代甲酸乙酯(ClCO2Et)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(DEC)。
取代基R1、R2、R3和R4的位置參照下列編號(hào)的環(huán)結(jié)構(gòu)
本發(fā)明的部分化合物可以以不同的立體異構(gòu)形式(如對(duì)映體和非對(duì)映體)存在。本發(fā)明包括所有此類立體異構(gòu)體，包括純的形式和包括外消旋混合物的混合物形式。例如，C-11位的碳原子可以以S或R立體構(gòu)型存在。
部分三環(huán)類化合物在性質(zhì)上是酸性的，例如那些具有羧基或酚羥基的化合物。這些化合物可以形成藥學(xué)上可接受的鹽。此類鹽的實(shí)例可以包括鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、鋁鹽、金鹽和銀鹽。也包括與藥學(xué)上可接受的胺例如氨、烷基胺、羥基烷基胺、N-甲基葡糖胺等形成的鹽。
某些堿性三環(huán)類化合物也可以形成藥學(xué)上可接受的鹽，如酸加成鹽。例如吡啶氮原子可以與強(qiáng)酸形成鹽，而具有堿性取代基例如氨基的化合物也可以與弱酸形成鹽。形成鹽的適當(dāng)?shù)乃岬膶?shí)例包括鹽酸、硫酸、磷酸、乙酸、檸檬酸、草酸、丙二酸、水楊酸、蘋果酸、富馬酸、琥珀酸、抗壞血酸、馬來酸、甲磺酸或其它的本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的無(wú)機(jī)酸和羧酸。用常規(guī)的方法，使游離堿形式與足量的所需酸接觸產(chǎn)生鹽可以制備所述鹽。所述游離堿形式可以通過用適當(dāng)?shù)南A水溶液例如氫氧化鈉、碳酸鉀、碳酸氫銨和碳酸氫鈉的稀水溶液處理所述鹽再生。所述游離堿形式和它們各自的鹽形式在某些物理性質(zhì)上略有不同，如在極性溶劑中的溶解度，但是對(duì)本發(fā)明的目的而言，所述酸和堿的鹽形式與它們各自的游離堿形式是等同的。
所有的此類酸和堿的鹽都是包括于本發(fā)明范圍的藥學(xué)上可接受的鹽，并且認(rèn)為對(duì)本發(fā)明的目的而言，所述酸和堿的鹽與相應(yīng)化合物的游離形式是等同的。
根據(jù)下列實(shí)施例所述方法和根據(jù)WO 95/10516(1995年4月20日公開，如見式400.00化合物的制備方法)所述方法，可以制備本發(fā)明的化合物。
在WO 95/10516的第57頁(yè)第7-16行，公開通過硝化式415.00化合物，在式1.0的吡啶環(huán)Ⅰ的C-3位上引入取代基的方法。然后，用公開的試劑或粉末狀鋅，或者在乙醇水溶液中用CuCl2或CuBr2將該硝基還原為相應(yīng)的胺。
根據(jù)下列流程Ⅰ可以制備本發(fā)明的化合物
其中Z1代表烷基、芳基、芳烷基、雜烷基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環(huán)烷基、雜環(huán)烷基烷基和-CR40R42；點(diǎn)線代表單鍵或雙鍵；a、b、c、d、A、B、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R11、R40和R42與上述定義相同。
參照流程1，在適當(dāng)?shù)膲A存在下，并任選在非-質(zhì)子溶劑中，在有效得到化合物(1.3)的量和條件下，使式(1.1)化合物(優(yōu)選其中R11為烷基，例如甲基)與式(2.1)的醇(R40OH)反應(yīng)可以制備式(1.3)化合物。適當(dāng)?shù)膲A包括有機(jī)堿，例如吡啶和三乙胺；或堿金屬和堿土金屬的無(wú)機(jī)堿，包括碳酸鹽如鈉、鋰、鉀和銫的碳酸鹽，氫氧化物例如鈉和鉀的氫氧化物；氫化物例如鈉或鉀的氫化物；和叔丁醇鈉，優(yōu)選氫化鈉。適當(dāng)?shù)姆?質(zhì)子溶劑包括乙醚、二甲基甲酰胺(DMF)、二甲基亞砜(DMSO)、四氫呋喃(THF)、二甲氧基乙烷(DME)和它們的混合物，優(yōu)選DMF。另外，該反應(yīng)可以用過量的所述醇在無(wú)水條件下進(jìn)行。對(duì)于每摩爾化合物(1.1)，所述醇(2.1)的量可以為約1-約10摩爾。溫度可以為0°-100℃，或所述反應(yīng)混合物的回流溫度。
在適當(dāng)?shù)膲A存在下并任選在非-質(zhì)子溶劑中，用制備上述化合物(1.3)所述的反應(yīng)條件，通過使式(1.1)化合物與式(1.1)的硫醇(R40SH)反應(yīng)產(chǎn)生化合物(1.5)，可以制備式(1.5)化合物。
在任選的非-質(zhì)子溶劑存在下，用制備上述化合物(1.3)所述的反應(yīng)條件，通過使式(2.0)化合物與式(2.7)的N-氰基亞胺酸酯反應(yīng)可以制備式(1.7)化合物。
根據(jù)下列流程Ⅱ可以制備本發(fā)明的化合物
其中a、b、c、d、A、B、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R8、R11、R40和R42與上述定義相同；點(diǎn)線代表單鍵或雙鍵。
參照流程Ⅱ，在適當(dāng)?shù)馁|(zhì)子或非-質(zhì)子溶劑存在下，在有效地得到化合物(1.1)的量和條件下，使式(2.0)化合物與式(2.9)N-氰基二硫代亞胺基碳酸酯(NCN=C-(SR11)2反應(yīng)可以制備式(1.1)化合物。適當(dāng)?shù)馁|(zhì)子溶劑包括C1-10鏈烷醇，例如甲醇、乙醇、丙醇、己醇、辛醇、癸醇等。適當(dāng)?shù)姆琴|(zhì)子溶劑如上所述。對(duì)于每摩爾化合物(2.0),N-氰基二硫代亞胺基碳酸酯(2.9)的量可以為約1-約10摩爾。溫度可以為0℃-100℃，或反應(yīng)混合物的回流溫度。
用任選的堿和/或任選的質(zhì)子或非-質(zhì)子溶劑(如上述的那些溶劑)，通過使式(1.1)化合物與式(2.6)胺(NHR40R42)反應(yīng)可以制備式(1.9)化合物。首先，使化合物(1.1)在約50℃-80℃溫度范圍內(nèi)與純胺(2.6)反應(yīng)。第二步，在堿例如氫化鈉和質(zhì)子溶劑例如DMSO或DMF存在下，使化合物(1.1)與約等摩爾量的胺(2.6)反應(yīng)。在第三步，在質(zhì)子溶劑例如乙醇中，使化合物(1.1)與過量的胺(2.6)反應(yīng)。在第四步，用催化量的堿例如氫化鈉，使化合物(1.1)與無(wú)水胺(2.6)反應(yīng)。在第五步，在非質(zhì)子傳遞溶劑例如DMF中，在約75℃溫度下，使化合物(1.1)與大于兩個(gè)當(dāng)量的胺(2.6)反應(yīng)。除特別指明外，溫度可以為0℃-100℃或反應(yīng)混合物的回流溫度，對(duì)于每摩爾化合物(1.1)，胺(2.6)的量可以為約1-約10摩爾。
在適當(dāng)?shù)姆?質(zhì)子溶劑存在下，在有效地產(chǎn)生化合物(2.4)的量和條件下，使式(2.0)化合物與式(2.2)的異硫氰酸酯(R40NCS)反應(yīng)，可以制備式(2.4)化合物。適當(dāng)?shù)姆?極性溶劑如上述。對(duì)于每摩爾的化合物(2.0)，異硫氰酸酯(2.2)的用量可以為約1-約10摩爾。溫度可以為0℃-100℃或反應(yīng)混合物的回流溫度。
在適當(dāng)?shù)姆?質(zhì)子溶劑存在下，在有效地產(chǎn)生化合物(2.4)的量和條件下，使式(2.4)化合物與氰氨化鉛(PbNCN)反應(yīng)，可以制備式(1.8)化合物。適當(dāng)?shù)姆?質(zhì)子溶劑如上述，優(yōu)選DMF。對(duì)于每摩爾的化合物(2.4)，氰氨化鉛的用量為約1-約10摩爾。溫度可以為0℃-100℃或反應(yīng)混合物的回流溫度。
用常規(guī)的方法，例如用有機(jī)溶劑從水中萃取反應(yīng)混合物、蒸發(fā)有機(jī)溶劑、然后經(jīng)硅膠或其它適當(dāng)?shù)膶游鼋橘|(zhì)層析，可以從反應(yīng)混合物中中分離式1.0化合物。
用下列實(shí)施例(不應(yīng)解釋為限制本發(fā)明的范圍)對(duì)本發(fā)明的化合物和其制備性原料進(jìn)行說明。
實(shí)施例1.4-(3-溴代-8-氯代-5,6-二氫-11H-苯并[5.6]環(huán)庚并[1,2-b]吡啶-11-亞基)-B-氰基-1-哌啶甲酰亞氨基硫代酸甲酯(carboximidothioate)
將4-(3-溴代-8-氯代-5,6-二氫-11H-苯并[5.6]環(huán)庚并[1,2-b]吡啶-11-亞基)-1-哌啶(40g,0.1mol)溶于600ml無(wú)水乙醇中。加入N-氰基二硫代亞氨基碳酸二甲酯(16.5g,0.11mol)，于干燥氮?dú)猸h(huán)境下回流2小時(shí)。蒸發(fā)至干得到棕色泡沫狀固體。經(jīng)硅膠層析，用25％-50％乙酸乙酯/己烷洗脫得到50.8g目標(biāo)化合物。FABMS M+1=489。
實(shí)施例2.4-[[[4-(3-溴代-8-氯代-5,6-二氫-11H-苯并[5.6]環(huán)庚并[1,2-b]吡啶-11-亞基)-1-哌啶基](氰基亞氨基)甲基]氨基]-1-哌啶羧酸乙酯
將4-(3-溴代-8-氯代-5,6-二氫-11H-苯并[5.6]環(huán)庚并[1,2-b]吡啶-11-亞基)-B-氰基-1-哌啶甲酰亞氨基硫代酸甲酯(0.1g,0.20mmol)溶于1ml4-氨基-1-哌啶羧酸乙酯中。于100℃攪拌18小時(shí)。使其冷卻至室溫。將該混合物加至水中，過濾產(chǎn)生的固體。將該固體溶于二氯甲烷中，經(jīng)硅膠層析，用5％甲醇/二氯甲烷洗脫，得到0.15g(34％)目標(biāo)產(chǎn)物。FABMS M+1=613。
實(shí)施例3.[[4-(3-溴代-8-氯代-5,6-二氫-11H-苯并[5.6]環(huán)庚并[1,2-b]吡啶-11-亞基)-1-哌啶基](4-吡啶基氨基)亞甲基]氨基]氨基氰(cyanamide)N1-氧化物
于氮?dú)猸h(huán)境、室溫下，將4-(3-溴代-8-氯代-5,6-二氫-11H-苯并[5.6]環(huán)庚并[1,2-b]吡啶-11-亞基)-B-氰基-1-哌啶甲酰亞氨基硫代酸甲酯(0.3g,0.60mmol)和4-氨基吡啶基-N-氧化物(0.07g,0.60mmol)溶于5ml二甲基亞砜中。在攪拌下，逐份加入氫化鈉(60％油分散液，24mg，0.6mmol)。攪拌2小時(shí)后，將該反應(yīng)混合物加至鹽水中，用20ml二氯甲烷萃取三次。合并萃取物，經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，蒸發(fā)得到油狀物。經(jīng)硅膠柱層析，用2％-10％甲醇/二氯甲烷洗脫，得到0.15g(47％)目標(biāo)化合物，為固體。FABMS M+1=549.1。
實(shí)施例4.[[4-(3-溴代-8-氯代-5,6-二氫-11H-苯并[5.6]環(huán)庚并[1,2-b]吡啶-11-亞基)-1-哌啶基](環(huán)丙基氨基)亞甲基]氨基氰
將4-(3-溴代-8-氯代-5,6-二氫-11H-苯并[5.6]環(huán)庚并[1,2-b]吡啶-11-亞基)-B-氰基-1-哌啶甲酰亞氨基硫代酸甲酯(0.15g,0.31mmol)溶于3ml無(wú)水乙醇中。加入環(huán)丙胺(0.3ml,4.30mmol)，于室溫下攪拌24小時(shí)后，將該反應(yīng)混合物加至鹽水中，用20ml二氯甲烷萃取三次。合并萃取物，經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，蒸發(fā)得到油狀物。該油狀物經(jīng)硅膠柱層析，用2％-10％甲醇/二氯甲烷洗脫，得到0.133g(86％)目標(biāo)化合物，為固體。FABMS M+1=498。
實(shí)施例5.[[4-(3-溴代-8-氯代-5,6-二氫-11 H-苯并[5.6]環(huán)庚并[1,2-b]吡啶-11-亞基)-1-哌啶基[[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]亞甲基]氨基氰
將4-(3-溴代-8-氯代-5,6-二氫-11H-苯并[5.6]環(huán)庚并[1,2-b]吡啶-11-亞基)-B-氰基-1-哌啶甲酰亞氨基硫代酸甲酯(0.5g,1.02mmol)溶于5mlDMF中。加入4-甲氧基芐胺(0.4ml,2.9mmol)，于75℃攪拌24小時(shí)后，加至鹽水中，用乙酸乙酯萃取三次。經(jīng)硫酸鎂干燥萃取物，過濾，蒸發(fā)至干。經(jīng)硅膠層析，用5％甲醇/二氯甲烷洗脫，得到0.4g(68％)目標(biāo)化合物。FABMS M+1=578。
實(shí)施例6.[[4-(3-溴代-8-氯代-5,6-二氫-11H-苯并[5.6]環(huán)庚并[1,2-b]吡啶-11-亞基)-1-哌啶基][(4-氟代苯基)氨基]亞甲基]氨基氰
將4-(3-溴代-8-氯代-5,6-二氫-11H-苯并[5.6]環(huán)庚并[1,2-b]吡啶-11-亞基)-B-氰基-1-哌啶甲酰亞氨基硫代酸甲酯(0.25g,0.51mmol)溶于2.5ml 4-氟代苯胺(analine)中。在攪拌下，于干燥氮?dú)猸h(huán)境中，加入約10mg氫化鈉，于100℃攪拌1小時(shí)。冷卻至室溫。加至鹽水中，用乙酸乙酯萃取三次。經(jīng)硫酸鎂干燥萃取物，過濾，蒸發(fā)至干，經(jīng)硅膠層析，用5％甲醇/二氯甲烷洗脫，得到0.155g(55％)目標(biāo)化合物。FABMSM+1=552。
實(shí)施例7.[[(4H-1,3-苯并二氧雜英(dioxin)-6-基)氨基][4-(3-溴代-8-氯代-5,6-二氫-11H-苯并[5.6]環(huán)庚并[1,2-b]吡啶-11-亞基)-1-哌啶基]亞甲基]氨基氰
將4-(3-溴代-8-氯代-5,6-二氫-11H-苯并[5.6]環(huán)庚并[1,2-b]吡啶-11-亞基)-N-(4H-1,3-苯并二氧雜英-6-基)-1-哌啶硫代甲酰胺(carbothioamide)(0.1g,0.198mmol)溶于無(wú)水N,N-二甲基甲酰胺(DMF)中。加入氰氨化鉛(98mg,0.39mmol)和芐基三乙基氯化銨(5mg)，于90℃攪拌2天。再加入氰氨化鉛(98mg,0.39mmol)和芐基三乙基氯化銨(5mg)，并攪拌24小時(shí)。加至鹽水中，用乙酸乙酯萃取三次。經(jīng)硫酸鎂干燥萃取物，過濾，蒸發(fā)至干，經(jīng)硅膠層析，用5％甲醇/二氯甲烷洗脫，得到39mg(38％)目標(biāo)化合物。FABMS M+1=701。
實(shí)施例8.[[4-(3,10-二溴代-8-氯代-5,6-二氫-11H-苯并[5.6]環(huán)庚并[1,2-b]吡啶-11-亞基)-1-哌啶基](3-吡啶基)亞甲基]氨基氰
將4-(3,10-二溴代-8-氯代-5,6-二氫-11H-苯并[5.6]環(huán)庚并[1,2-b]吡啶-11-亞基)-1-哌啶(0.2g,0.43mmol)溶于2ml DMF中。加入異丙基-N-氰基-3-吡啶亞胺酸酯[參見Chem.Pharm.Bull.42(12)2475(1994)](0.16g,0.86mmol)，于75℃攪拌24小時(shí)。加至鹽水中，用乙酸乙酯萃取三次。經(jīng)硫酸鎂干燥萃取物，過濾，蒸發(fā)至干，經(jīng)硅膠層析，用5％甲醇/二氯甲烷洗脫，得到0.16g目標(biāo)化合物。FABMS M+1=599。
實(shí)施例9.N-氰基-4-(3,10-二溴代-8-氯代-6,11-二氫-5H-苯并[5.6]環(huán)庚并[1,2-b]吡啶-11-基)-n’-(3-吡啶基甲基)-1-哌啶甲酰亞胺(carboximidamide)N1-氧化物
于干燥氮?dú)猸h(huán)境、135℃、攪拌下，將4-(3-溴代-8-氯代-5,6-二氫-11H-苯并[5.6]環(huán)庚并[1,2-b]吡啶-11-亞基)-B-氰基-1-哌啶甲酰亞胺基硫代酸甲酯(1.0g,1.76mmol)和3-氨基甲基吡啶基-N-氧化物(0.65g,5.8mmol)溶于10mlN,N-二甲基甲酰胺中。攪拌2小時(shí)后，將該反應(yīng)混合物加至鹽水中，用20ml二氯甲烷萃取三次。合并萃取物，經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，蒸發(fā)為油狀物，經(jīng)硅膠柱層析，用2％-10％甲醇/二氯甲烷洗脫，得到0.23g目標(biāo)化合物，為固體。FABMS M+1=563。
用上述方法并替換適當(dāng)?shù)脑噭?，制備下列表中所述的化合物?br> 原料的制備用下列制備實(shí)施例說明本發(fā)明化合物制備中使用的原料，這些實(shí)施例不應(yīng)解釋為限制本發(fā)明的范圍。用本領(lǐng)域已知的方法，例如在U.S.專利5089496、5151423、4454143、4355036,PCT/US94/11390(WO 95/10514)、PCT/US94/11391(WO 95/10515)、PCT/US94/11392(WO 95/10516)中所提出的方法以及Stanley R.Sandler和Wolf Karo在Organic Functional Group Preparations(第2版，Academic Press,Inc.,SanDiego,Califomia，第1-3卷，(1983)和J.March在Advanced OrganicChemistry,Reactions & Mechanisms,and Structure(第3版，John Wiley& Sons,New York,1346頁(yè)(1985))所述方法可以制備所述三環(huán)類化合物所用的原料如化合物(2.0)、無(wú)機(jī)堿和有機(jī)堿、N-氰基亞胺酸酯和醇類。本發(fā)明范圍的另外的反應(yīng)歷程和相似結(jié)構(gòu)對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的。
制備實(shí)施例7
步驟A
于-5℃，將15g(38.5mmol)4-(8-氯-3-溴代-5,6-二氫-11H-苯并[5,6]環(huán)庚并[1,2-b]吡啶-11-亞基)-1-哌啶-1-羧酸乙酯和150ml濃硫酸混合，然后加入3.89g(38.5mmol)硝酸鉀，攪拌4小時(shí)，將該混合物傾至3L冰中，用50％氫氧化鈉(水溶液)堿化。用二氯甲烷萃取，經(jīng)硫酸鎂干燥，然后過濾并真空濃縮為殘留物。使殘留物從丙酮中重結(jié)晶得到6.69g產(chǎn)物。
步驟B
將6.69g(13.1mmol)步驟A的產(chǎn)物和100ml 85％乙醇/水混合，然后加入0.66g(5.9mmol)氯化鈣和6.56g(117.9mmol)鐵，于回流下將該混合物加熱過夜。通過硅藻土過濾熱的反應(yīng)混合物，用熱乙醇洗滌濾餅。真空濃縮濾液得到7.72g產(chǎn)物。
步驟C
將7.70g步驟B的產(chǎn)物和35ml乙酸混合，然后加入45mlBr2的乙酸溶液，于室溫下將該混合物攪拌過夜。加入300ml 1N氫氧化鈉(水溶液)，然后加入75ml 50％氫氧化鈉(水溶液)，用乙酸乙酯萃取。經(jīng)硫酸鎂干燥萃取物，真空濃縮為殘留物。將殘留物經(jīng)層析(硅膠，20％-30％乙酸乙酯/己烷)純化得到3.47g產(chǎn)物(另外有1.28g部分純化的產(chǎn)物)。
步驟D
將0.557g(5.4mmol)亞硝酸叔丁酯和3ml DMF混合，將該混合物加熱至60℃-70℃。緩慢加入(滴加)2.00g(3.6mmol)步驟C產(chǎn)物和4ml DMF的混合物，然后將該混合物冷卻至室溫。于40℃再加入0.64ml亞硝酸叔丁酯，將該混合物再加熱至60℃-70℃達(dá)0.5小時(shí)。冷卻至室溫，將該混合物傾至150ml水中。用二氯甲烷萃取。經(jīng)硫酸鎂干燥萃取物，真空濃縮為殘留物。將殘留物層析(硅膠，10％-20％乙酸乙酯/己烷)得到0.74g產(chǎn)物。
步驟E
將0.70g(1.4mmol)步驟D的產(chǎn)物和8ml濃鹽酸(水溶液)混合，將該混合物于回流下加熱過夜。加入30ml 1N氫氧化鈉(水溶液)，然后加入5ml 50％氫氧化鈉(水溶液)，用二氯甲烷萃取。經(jīng)硫酸鎂干燥萃取物，真空濃縮得到0.59g目標(biāo)化合物。
制備實(shí)施例8
步驟A
制備8.1g得自制備實(shí)施例7的目標(biāo)化合物的甲苯溶液，加入17.3ml 1M DIBAL的甲苯溶液。于回流下，加熱該混合物，用40分鐘再緩慢(滴加)21ml 1M DIBAL的甲苯溶液。冷卻該反應(yīng)混合物至約0℃，加入700ml 1M鹽酸(水溶液)。分離并棄去有機(jī)相。用二氯甲烷洗滌水相，棄去萃取物，然后加入50％氫氧化鈉(水溶液)堿化水相。用二氯甲烷萃取，經(jīng)硫酸鎂干燥萃取物，真空濃縮得到7.30g目標(biāo)化合物，為對(duì)映體的外消旋混合物。
步驟B-對(duì)映體的分離
經(jīng)制備性手性層析(Chiralpack AD,5cm×50cm柱，用異丙醇/己烷+0.2％二乙胺洗脫)分離外消旋步驟A目標(biāo)化合物，得到目標(biāo)化合物的(+)-異構(gòu)體和(-)-異構(gòu)體。
制備實(shí)施例48步驟A
將6g(15.11mmol)WO 95/10516的制備實(shí)施例47B的目標(biāo)化合物和苯混合，加入2.3g(9.06mmol)碘。于回流下，將該混合物加熱3小時(shí)，冷卻，然后用50ml二氯甲烷稀釋。用5％亞硫酸氫鈉(水溶液)(3×80ml)洗滌有機(jī)相，然后用1M氫氧化鈉(水溶液)(2×80ml)洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥。濃縮的殘留物經(jīng)層析(硅膠，30％乙酸乙酯/己烷)得到3.2g(42％產(chǎn)率)碘代化合物。質(zhì)譜MH+=509。
步驟B
用與WO 95/10516實(shí)施例358步驟A所述基本相似的方法，水解步驟A的產(chǎn)物，得到碘代胺產(chǎn)物，產(chǎn)率為89％。
制備實(shí)施例49
用與WO 95/10516實(shí)施例358步驟A所述基本相似的方法，水解WO 95/10516實(shí)施例47步驟C的產(chǎn)物(2.42g)，得到1.39g(69％產(chǎn)率)溴代胺產(chǎn)物。
制備實(shí)施例51A
步驟A
將WO 95/10516制備實(shí)施例1步驟G的產(chǎn)物82.0g(0.26mol)與lL甲苯混合，然后加入20.06g(0.53mol)LiAlH4，于回流下將該反應(yīng)混合物加熱過夜。冷卻該混合物至室溫，加入約1L乙醚，然后滴加飽和的硫酸鈉(水溶液)至沉淀形成。過濾并在硫酸鎂中攪拌濾液30分鐘，然后真空濃縮，得到產(chǎn)物化合物，產(chǎn)率為83％。質(zhì)譜MH+=313。
步驟B
將24.32g(74.9mmol)步驟A的產(chǎn)物、500ml甲苯、83ml三乙胺和65.9ml氯代甲酸乙酯混合，于回流下將該混合物加熱過夜。冷卻至25℃，傾至200ml水中，用乙酸乙酯萃取。經(jīng)硫酸鎂干燥萃取物，真空濃縮為殘留物，層析(硅膠，50％乙酸乙酯/己烷)得到15g產(chǎn)物化合物。質(zhì)譜MH+=385。
步驟C
將3.2g(10.51mmol)四-正-丁基硝酸銨溶于25ml二氯甲烷中，加入2.2g(10.51mmol,1.5ml)TFAA。冷卻至0℃，然后于0℃將該混合物(通過導(dǎo)管)加至3.68g(9.56mmol)步驟B產(chǎn)物的50ml二氯甲烷溶液中，接著于0℃攪拌3小時(shí)。使該混合物溫?zé)嶂?5℃，同時(shí)攪拌過夜，然后用飽和的碳酸氫鈉(水溶液)萃取，經(jīng)硫酸鎂干燥。真空濃縮為殘留物，層析(硅膠，30％乙酸乙酯/己烷)得到1.2g產(chǎn)物化合物。質(zhì)譜MH+=430。
步驟D
將2.0g(4.7mmol)步驟C的產(chǎn)物與150ml 85％乙醇(水溶液)混合，加入2.4g(42mmol)鐵屑和0.24g(2.1mmol)氯化鈣，于回流下加熱16小時(shí)。通過硅藻土床過濾熱的混合液，用熱乙醇洗滌該硅藻土。真空濃縮濾液得到100％產(chǎn)率的產(chǎn)物化合物。質(zhì)譜MH+=400。
步驟E
將2.0g(5.2mmol)步驟D產(chǎn)物和20ml 48％HBr混合，將該混合物冷卻至-5℃。于-5℃將該混合物攪拌15分鐘，緩慢加入1.07g(15.5mmol)亞硝酸鈉的10ml水溶液。攪拌45分鐘后，用50％氫氧化鈉(水溶液)驟冷至pH約為10。用乙酸乙酯萃取，經(jīng)硫酸鎂干燥合并的萃取物，真空濃縮得到產(chǎn)物化合物。質(zhì)譜MH+=465。
步驟F
通過與WO 95/10516的實(shí)施例358步驟A所述基本相似的方法，水解步驟E的產(chǎn)物4.0g，得到1.39g產(chǎn)物化合物。質(zhì)譜MH+=392。
制備實(shí)施例53
步驟A
將14.95g(39mmol)WO 95/10516制備實(shí)施例34A的產(chǎn)物和150ml二氯甲烷混合，然后加入13.07g(42.9mmol)(nBU)4NNO3，將該混合物冷卻至0℃。用1.5小時(shí)緩慢加入(滴加)6.09ml(42.9mmol)TFAA的20ml二氯甲烷溶液。將該混合物保持于0℃過夜，然后順序用飽和的碳酸氫鈉(水溶液)、水和鹽水洗滌。經(jīng)硫酸鈉干燥有機(jī)溶液，真空濃縮為殘留物，殘留物經(jīng)層析(硅膠，乙酸乙酯/己烷梯度)分別得到4.32g產(chǎn)物化合物53(ⅰ)和1.90g產(chǎn)物化合物53(ⅱ)。
質(zhì)譜53(ⅰ):MH+=428.2；質(zhì)譜53(ⅱ):MH+=428.3。
步驟B
通過與WO 95/10516(1995年4月20日公開)的實(shí)施例358步驟A所述基本相似的方法，水解步驟A的化合物53(ⅱ)(0.20g)，得到0.16g產(chǎn)物化合物。
用指定的原料化合物和與制備實(shí)施例53步驟B所述基本相似的方法，制備表1化合物表1
制備實(shí)施例54步驟A
將22.0g(51.4mmol)制備實(shí)施例53步驟A產(chǎn)物53(ⅰ)、150ml 85％乙醇(水溶液)、25.85g(0.463mol)鐵粉和2.42g(21.8mmol)氯化鈣混合，于回流下加熱過夜。加入12.4g(0.222mol)鐵粉和1.2g(10.8mmol)氯化鈣，于回流下加熱2小時(shí)。再加入12.4g(0.222mol)鐵粉和1.2g(10.8mmol)氯化鈣，再于回流下加熱2小時(shí)。通過硅藻土過濾熱的混合物，用50ml熱乙醇洗滌該硅藻土，真空濃縮濾液為殘留物。加入100ml無(wú)水乙醇，濃縮為殘留物，殘留物經(jīng)層析(硅膠，甲醇/二氯甲烷梯度洗脫)得到16.47g產(chǎn)物化合物。
步驟B
將16.47g(41.4mmol)制備實(shí)施例54步驟A的產(chǎn)物化合物和150ml48％HBr(水溶液)混合并冷卻至-3℃。緩慢加入(滴加)18ml溴，然后緩慢(滴加)8.55g(0.124mol)NaNO2的85ml水溶液。于-3℃至0℃攪拌45分鐘，然后通過加入50％氫氧化鈉(水溶液)調(diào)節(jié)pH=10。用乙酸乙酯萃取，用鹽水洗滌萃取物，經(jīng)硫酸鈉干燥萃取物。濃縮為殘留物，層析(硅膠，乙酸乙酯/己烷梯度洗脫)分別得到10.6g產(chǎn)物化合物54(ⅰ)和3.28g產(chǎn)物化合物54(ⅱ)。
質(zhì)譜54(ⅰ):MH+=461.2；質(zhì)譜54(ⅱ):MH+=539。
制備實(shí)施例55
該目標(biāo)化合物是已知的，并且可以通過Bioorg.& Med.Cherr.Lett.(3,No.6,1073-1078(1993))所述方法制備。
制備實(shí)施例56
步驟A
將2.04g WO 95/10516(1995年4月20日公開)制備實(shí)施例44的產(chǎn)物、1.3ml PBr3、1.0ml Et3N和20ml CH2Br2混合，于回流下加熱該混合物過夜。冷卻該混合物，用二氯甲烷稀釋，用1N氫氧化鈉(水溶液)洗滌。經(jīng)硫酸鎂干燥，真空濃縮得到1.22g(53％產(chǎn)率)產(chǎn)物化合物。質(zhì)譜MH+=541。
步驟B
將0.3g制備實(shí)施例56步驟A的產(chǎn)物化合物和8ml正丁胺混合，于120℃在密封的試管中攪拌48小時(shí)。真空濃縮為殘留物，經(jīng)制備板層析(硅膠，1.5-2.5％甲醇/二氯甲烷)純化得到80mg(27％)產(chǎn)物化合物。質(zhì)譜MH+=534。
步驟C
將66mg制備實(shí)施例56步驟B的產(chǎn)物化合物、4ml無(wú)水乙醇和15ml濃鹽酸混合，于回流下攪拌60小時(shí)。將該反應(yīng)混合物冷卻至約0℃，加入氫氧化鉀堿化。用二氯甲烷萃取，經(jīng)硫酸鎂干燥萃取物，真空濃縮得到46mg(81％產(chǎn)率)產(chǎn)物化合物。質(zhì)譜MH+=462。
制備實(shí)施例57
步驟A
將1.19g WO 95/10516制備實(shí)施例44產(chǎn)物、10ml無(wú)水DMF、0.2g NaH(60％礦物油液)和0.19ml甲基碘混合，于室溫下攪拌過夜。真空濃縮為殘留物，用二氯甲烷稀釋殘留物，用飽和的碳酸氫鈉(水溶液)洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥。真空濃縮得到1.13g(92％產(chǎn)率)產(chǎn)物化合物。質(zhì)譜MH+=493。
步驟B
用與制備實(shí)施例56步驟C所述基本相似的方法，水解步驟A產(chǎn)物1.13g，得到0.61g(63％產(chǎn)率)產(chǎn)物化合物。
制備實(shí)施例58
步驟A
將1.07g(3.52mmol)四丁基硝酸銨、4ml無(wú)水二氯甲烷和0.743g(3.52mmol)TFAA混合，于室溫下，將產(chǎn)生的混合物加至1.22g(3.20mmol)WO 95/10516制備實(shí)施例37的目標(biāo)化合物的8ml無(wú)水二氯甲烷溶液中。于室溫下攪拌過夜，然后用20ml飽和的碳酸氫鈉(水溶液)和20ml鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥。真空濃縮并層析殘留物(硅膠，乙酸乙酯/己烷)，得到0.216g產(chǎn)物化合物58(ⅰ)和0.27g產(chǎn)物化合物58(ⅱ)。質(zhì)譜58(ⅰ):MH+=426。m.p.58(ⅰ)97.5-99.2℃。
步驟B
根據(jù)與WO 95/10516制備實(shí)施例47步驟B所述基本相似的方法，還原步驟A產(chǎn)物58(ⅰ)，得到產(chǎn)物化合物。質(zhì)譜MH+=396。
步驟C
根據(jù)與WO 95/10516制備實(shí)施例47步驟C所述基本相似的方法，使步驟B產(chǎn)物與HBr和溴反應(yīng)，得到產(chǎn)物化合物。質(zhì)譜MH+=459。
步驟D
根據(jù)與制備實(shí)施例56步驟C所述基本相似的方法，水解步驟C產(chǎn)物0.83g，得到產(chǎn)物化合物0.56g。質(zhì)譜MH+=387。
制備實(shí)施例60
步驟A
將16.25g(40.83mmol)WO/10516制備實(shí)施例47步驟B產(chǎn)物與7.14g(61.11mmol)NOBF4的100ml二氯甲烷中的淤漿混合，將該混合物攪拌3小時(shí)。加入100ml鄰-二氯苯，并加熱5小時(shí)，從該混合物中蒸餾二氯甲烷。真空濃縮為殘留物，加入200ml二氯甲烷，用水(2×200ml)洗滌。經(jīng)硫酸鎂干燥，真空濃縮得到殘留物，經(jīng)層析(硅膠，20％乙酸乙酯/己烷)得到4.1g產(chǎn)物化合物60(ⅰ)和4.01g產(chǎn)物化合物60(ⅱ)。質(zhì)譜60(ⅰ):MH+=418。質(zhì)譜60(ⅱ):MH+=401。
步驟B
根據(jù)與WO 95/10516實(shí)施例358步驟A所述基本相同的方法，水解3.4g步驟A的產(chǎn)物60(ⅱ)，得到3.01g產(chǎn)物化合物。質(zhì)譜MH+=329。
根據(jù)與制備實(shí)施例60步驟B所述基本相同的方法，用制備實(shí)施例60步驟A的產(chǎn)物60(ⅰ)，制備下列化合物
(制備實(shí)施例60A)質(zhì)譜MH+=346。
制備實(shí)施例66
將50.0g(20.5mmol)8-氯-5,6-二氫-11H-苯并[5,6]環(huán)庚并[1,2-b]吡啶-11-酮冷卻至0℃，用20分鐘緩慢加入75ml(93.69mmol)一氯化硫，然后用15分鐘緩慢加入25ml(48.59mmol)溴。于95℃加熱20小時(shí)，加入12.5ml(24.3mmol)溴，并再加熱24小時(shí)。冷卻該混合物，于0℃緩慢加至二氯甲烷和1N氫氧化鈉(水溶液)的混合物中。用水洗滌有機(jī)相，經(jīng)硫酸鎂干燥，真空濃縮為殘留物。層析殘留物(硅膠，500ml二氯甲烷，然后0.2％-5％(10％氫氧化銨的甲醇溶液)/二氯甲烷洗脫)，然后再一次經(jīng)層析(硅膠，3％-8.5％乙酸乙酯/己烷)得到8.66g產(chǎn)物化合物。質(zhì)譜MH+=322。
制備實(shí)施例67
將0.16g(0.46mmol)4-(8-甲基-5,6-二氫-11H-苯并[5,6]環(huán)庚并[1,2-b]吡啶-11-亞基)-1-乙氧基羰基-哌啶溶于2ml乙醇中，加入4ml 12NHCl。于85℃加熱該溶液3小時(shí)，然后冷卻至25℃。用50％氫氧化鈉(水溶液)調(diào)至pH=10，用50ml乙酸乙酯萃取數(shù)次。合并有機(jī)層，經(jīng)硫酸鎂干燥，真空濃縮得到產(chǎn)物化合物。
制備實(shí)施例68
步驟A
將2g(5.22mmol)WO/10516制備實(shí)施例1F的目標(biāo)化合物溶于2.6ml無(wú)水N-甲基吡咯烷酮中。加入0.87g(9.4mmol)CuCN和0.139g(0.93mmol)碘化鈉。于200℃、氮?dú)猸h(huán)境下，將該混合物加熱20小時(shí)，冷卻至25℃，重復(fù)研磨，與5份50ml二氯甲烷和7M氫氧化銨(水溶液)混合。用7M氫氧化銨洗滌有機(jī)層至有機(jī)層不再顯藍(lán)色或綠色。經(jīng)硫酸鎂干燥合并的有機(jī)層，真空濃縮為殘留物。層析(硅膠，70％乙酸乙酯/己烷)，然后從乙酸乙酯/己烷中重結(jié)晶得到產(chǎn)物化合物。m.p.=152.4-153.5℃。質(zhì)譜MH+=374。
步驟B
將4.08g(10.93mmol)步驟A的產(chǎn)物溶于12M HCl中，于85℃加熱18小時(shí)。真空濃縮為殘留物。將殘留物溶于175ml甲醇中，用HCl氣體飽和，于回流下加熱18小時(shí)。真空濃縮得到產(chǎn)物化合物，為鹽酸鹽。質(zhì)譜MH+=335。
制備實(shí)施例69
于0℃將75g(0.196mol)WO 95/10516實(shí)施例1步驟F的產(chǎn)物和300ml二氯甲烷混合，緩慢加入(滴加)72g(0.236mol)四丁基硝酸銨和35ml(0.247mol)TFAA的500ml二氯甲烷溶液。于25℃攪拌過夜，緩慢加入(滴加)1L飽和的碳酸氫鈉(水溶液)。分離各層，用鹽水洗滌有機(jī)相，經(jīng)硫酸鎂干燥。真空濃縮為殘留物，層析兩次(1kg硅膠，乙酸乙酯/二氯甲烷梯度)得到8.63g產(chǎn)物化合物69(ⅰ)和34g產(chǎn)物化合物(ⅱ)。使化合物69(ⅰ)從二氯甲烷/己烷中重結(jié)晶得到純化的產(chǎn)物化合物69(ⅰ)。m.p.=186℃-187℃；質(zhì)譜(FAB)MH+=401。
制備實(shí)施例69A
將0.4g(1mmol)WO 95/10516(1995年4月20日公開)實(shí)施例47步驟B產(chǎn)物和0.2ml(1.2mmol)2,5-二乙氧基四氫呋喃于3ml冰乙酸中混合，于回流下加熱1.5小時(shí)。冷卻該混合物，用飽和的碳酸氫鈉(水溶液)洗滌，然后用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥，真空濃縮為殘留物。層析(硅膠，5％-15％乙酸乙酯/二氯甲烷)得到0.34g產(chǎn)物化合物。質(zhì)譜(FAB)MH+=448。
制備實(shí)施例70
步驟A
于0℃將13.8g(34.7mmol)WO 95/10516實(shí)施例47步驟B產(chǎn)物和90ml水混合，加入6.9ml濃硫酸的45ml水溶液，攪拌該混合物。緩慢加入(滴加)2.55g(40mmol)亞硝酸鈉的75ml水溶液，于0℃-5℃攪拌0.5小時(shí)。加入35.1g硫酸銅的135ml水的沸騰溶液，于100℃加熱15分鐘。冷卻該混合物，用二氯甲烷(2×200ml)萃取，用鹽水洗滌萃取物，經(jīng)硫酸鎂干燥，真空濃縮為殘留物。層析(硅膠，1.5％-10％甲醇/二氯甲烷)得到11.36g產(chǎn)物化合物。
步驟B
于0℃，將11.36g(28.5mmol)步驟A產(chǎn)物和12.4g(34.7mmol)N-
11)如果R3、R4、R5和R6都是H，且R2是
則R1不能是2-呋喃基或3-呋喃基；12)當(dāng)R2、R4、R5和R6都是H，且R3是甲氧基時(shí)，則R1不能是苯基、2-羧基苯基、4-胍基苯基、4-硝基苯基、3,5-二硝基苯基、4-(二苯基膦?；谆?苯基、4-(2’-二乙基膦?；已趸?苯基、4-(3’-二乙基膦?；趸?苯基、4-(乙基膦?；谆?苯基、4-(乙基，甲基膦?；谆?苯基、4-(芐基，乙基膦酰基甲基)苯基、4-(乙基，異丙基膦?；谆?苯基、4-(二乙基膦?；谆?苯基、4-(二甲基膦?；谆?苯基、4-(二正丁基膦?；谆?苯基、
13)當(dāng)R4、R5和R6都是H,R2是芐基或甲基，且R3是甲氧基時(shí)，R1不能是4-(二乙基膦?；谆?苯基；14)當(dāng)R2、R4、R5和R6都是H，且R3是乙氧基時(shí)，R1不能是苯基、4-正丁氧基苯基、4-異丙氧基苯基、4-甲氧基苯基或4-乙氧基苯基；15)當(dāng)R2、R4、R5和R6都是H，且R3是正丙氧基時(shí)，R1不能是4-乙氧基苯基；16)當(dāng)R2、R4、R5和R6都是H，且R3是甲基時(shí)，R1不能是苯基、4-胍基苯基、4-(二乙基膦?；谆?苯基、或
(制備實(shí)施例70-A)m.p.=155℃-157℃，質(zhì)譜MH+=465。
步驟D
根據(jù)與WO 95/10516實(shí)施例358步驟A所述基本相同的方法，水解步驟C產(chǎn)物1.18g(2.89mmol)，得到0.95g產(chǎn)物化合物。質(zhì)譜(FAB)MH+=337。
制備實(shí)施例71
步驟A
將1.01g(19.9mmol)制備實(shí)施例48步驟A產(chǎn)物、30ml DMF、1.33g(6.96mmol)2,2-二氟-2-(氟代磺?；?-乙酸甲酯和0.75g(3.97g)CuI混合。于60℃-80℃將該混合物加熱3小時(shí)，然后濃縮為殘留物。用水稀釋殘留物，用二氯甲烷萃取，真空濃縮為殘留物。層析(硅膠，30％乙酸乙酯/己烷，然后10％甲醇/二氯甲烷+氫氧化銨)，得到0.15g產(chǎn)物化合物。質(zhì)譜MH+=451.1。
步驟B
用與WO 95/10516制備實(shí)施例1步驟G基本相同的方法，水解步驟A的產(chǎn)物，得到所述產(chǎn)物化合物。質(zhì)譜MH+=379。
制備實(shí)施例72
步驟A
將20g(50mmol)WO 95/10516制備實(shí)施例1步驟F產(chǎn)物溶于400ml濃硫酸中，冷卻至-5℃，分小份加入5.1g(50mmol)硝酸鉀。攪拌3小時(shí)后，冷卻該混合物，用50％氫氧化鈉(水溶液)緩慢堿化。用二氯甲烷(3×500ml)萃取，經(jīng)硫酸鎂干燥合并的萃取物，真空濃縮為殘留物。層析(硅膠，50％乙酸乙酯/己烷)得到16.33g產(chǎn)物化合物(72ⅰ)和2.6g產(chǎn)物化合物(72ⅱ)。質(zhì)譜72(ⅰ)和72(ⅱ)MH+=428。
步驟B
用與WO 95/10516制備實(shí)施例358步驟A基本相同的方法，水解步驟A的產(chǎn)物(72ⅰ)5.46g(12.76mmol)，得到產(chǎn)物化合物4.34g。質(zhì)譜MH+=356。
制備實(shí)施例73
步驟A
將1.6g制備實(shí)施例54步驟B的產(chǎn)物(54ⅰ)、12ml二氯甲烷和1.16g四丁基硝酸銨混合，冷卻至0℃，緩慢加入(滴加)0.8g TFAA的2ml二氯甲烷溶液。于0℃攪拌6小時(shí)，將該混合物于0℃放置過夜，然后順序用飽和的碳酸氫鈉(水溶液)、水和鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥。真空濃縮為殘留物，然后層析(硅膠，30％乙酸乙酯/己烷)得到0.38g產(chǎn)物化合物。
步驟B
用與WO 95/10516實(shí)施例358步驟A所述基本相同的方法，水解步驟A的產(chǎn)物0.38g，得到產(chǎn)物化合物0.235g。
制備實(shí)施例75.4-(3-溴代-8-氯代-5,6-二氫-11H-苯并[5.6]環(huán)庚并[1,2-b]吡啶-11-亞基)-N-(4H-1,3-苯并二氧雜英-6-基)-1-哌啶硫代甲酰胺
將4-(3-溴代-8-氯代-5,6-二氫-11H-苯并[5.6]環(huán)庚并[1,2-b]吡啶-11-亞基)-1-哌啶(0.5g,1.61mmol)溶于5ml無(wú)水四氫呋喃中。加入4H-1,3-苯并二氧雜英-6-基)異硫氰酸酯(0.34g,1.77mmol)，于室溫下攪拌24小時(shí)。蒸發(fā)該反應(yīng)混合物為油狀物，硅膠層析，用1％-5％甲醇/二氯甲烷洗脫，得到0.893g目標(biāo)化合物。FABMS M+1=694。
測(cè)定1．體外酶測(cè)定根據(jù)WO/10515或WO 95/10516公開的方法，可以測(cè)定FPT IC50(體外酶測(cè)定中對(duì)法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶的抑制)。該數(shù)據(jù)表明本發(fā)明的化合物為部分純化的大鼠腦法呢基蛋白轉(zhuǎn)移酶(FPT)的Ras-CVLS法呢基化的抑制劑。該數(shù)據(jù)也表明本發(fā)明的化合物被認(rèn)為是部分純化的大鼠腦FPT的Ras-CVLS法呢基化的有效的抑制劑(IC50＜10μM)。
2．細(xì)胞測(cè)定COS IC50值指抑制Ras加工的COS細(xì)胞活性，根據(jù)WO/10515或WO 95/10516公開的方法測(cè)定。
用本發(fā)明所述化合物制備藥用組合物時(shí)，惰性、藥學(xué)上可接受的載體可以為固體或液體。固體形式制劑包括粉末劑、片劑、分散顆粒劑、膠囊劑、扁膠囊劑和栓劑。粉末劑和片劑含有約5-約70％的活性成分。適合的固體載體是本領(lǐng)域已知的，如碳酸鎂、硬脂酸鎂、滑石粉、蔗糖、乳糖。片劑、粉末劑、扁膠囊劑和膠囊劑可以用作適合口服給藥的固體劑型。
制備栓劑時(shí)，首先將低熔點(diǎn)蠟例如脂肪酸甘油酯或可可油的混合物融化，通過攪拌將所述活性成分均勻分散于其中。然后將熔化的均勻的混合物傾至常規(guī)大小的模具中，使其冷卻、固化。
液體制劑包括溶液、懸浮液和乳液。作為實(shí)例包括胃腸外注射的水或水-丙二醇溶液。
液體制劑也可以包括鼻內(nèi)給藥的溶液。
適合吸入的氣霧劑制劑可以包括溶液和粉末形式的固體，可以與藥學(xué)上可接受的載體例如惰性壓縮氣體混合。
固體制劑也包括在使用前即刻轉(zhuǎn)化為液體形式制劑以供口服或胃腸外給藥的制劑。此類液體形式包括溶液、懸浮液和乳液。
本發(fā)明的化合物也可以經(jīng)透皮釋放。透皮組合物可以為霜?jiǎng)?、洗液、氣霧劑和/或乳液，可以包括本領(lǐng)域常規(guī)用于該目的的基質(zhì)的透皮貼劑或儲(chǔ)存形式。
優(yōu)選所述化合物口服給藥。
優(yōu)選所述藥用制劑為單位劑型。在此類劑型中，該制劑可以再分為含有適當(dāng)量的活性成分，如有效量以達(dá)到所需目的的單位劑量。
根據(jù)特定的應(yīng)用，單位劑量制劑中活性化合物的量可以變化，或者在約0.1mg至1000mg，更優(yōu)選在約1mg至300mg之間調(diào)整。
實(shí)際使用的劑量可以根據(jù)病人的需要和所治療的疾病的嚴(yán)重程度變化。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以決定特定情況下的適合的劑量。一般而言，治療從小于所述化合物最佳劑量的較小劑量開始。此后，逐漸增加劑量至獲得該情況下的最佳效果。為方便起見，可以將總?cè)談┝糠珠_，并根據(jù)需要全天分次給藥。
本發(fā)明的化合物和其藥學(xué)上可接受的鹽的給藥量和給藥頻率由臨床醫(yī)生根據(jù)對(duì)下列因素，如年齡、病人的身體狀況和身高、體重以及治療的癥狀的嚴(yán)重程度進(jìn)行判斷調(diào)整?？诜o藥推薦的劑量一般為10mg-2000mg/天，優(yōu)選10-1000mg/天，分2-4個(gè)亞劑量給藥以阻斷腫瘤生長(zhǎng)。當(dāng)在此劑量范圍內(nèi)給藥時(shí)，所述化合物是非毒性的。
下列為含有本發(fā)明化合物的藥用劑型的實(shí)例。本發(fā)明在藥用組合物方面的范圍不受所提供的實(shí)施例的限制。
藥用劑型實(shí)施例實(shí)施例A-片劑
生產(chǎn)方法將組分1和2在適當(dāng)?shù)幕旌掀髦谢旌?0-15分鐘。用組分3將該混合物制粒。如果需要，將該濕顆粒通過粗篩(如1/4”,0.63cm)磨細(xì)。干燥濕顆粒。如果需要過篩干燥顆粒，與組分4混合，混合10-15分鐘。加入組分5并混合1-3分鐘。將該混合物壓制成適當(dāng)大小，在適當(dāng)?shù)钠瑒┰O(shè)備上稱重。
實(shí)施例B-膠囊劑
<p>生產(chǎn)方法將組分1、2和3在適當(dāng)?shù)幕旌掀髦谢旌?0-15分鐘。加入組分4，混合1-3分鐘。在適當(dāng)?shù)难b膠囊機(jī)上將該混合物填充入適當(dāng)?shù)膬刹糠值挠裁髂z膠囊中。
盡管結(jié)合上述特定的實(shí)施方案對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了描述，但是對(duì)本領(lǐng)域普通技術(shù)人員而言許多變通、修改和變化是顯而易見的。所有的此類變通、修改和變化均在本發(fā)明的宗旨和范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1．下式的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物
其中a、b、c和d之一代表N或NR9，其中R9代表O-、-CH3或-(CH2)nCO2H，其中n為1-3，而其余的a、b、c和d基團(tuán)代表CR1或CR2；或每個(gè)a、b、c和d獨(dú)立選自CR1或CR2；每個(gè)R1和每個(gè)R2獨(dú)立選自H、鹵代、-CF3、-OR10(如-OCH3)、-COR10、-SR10(如-SCH3和-SCH2C6H5)、-S(O)tR11(其中t為0、1或2，如-SOCH3和-SO2CH3)、-SCN、-N(R10)2、-NR10R11、-NO2、-OC(O)R10、-CO2R10、-OCO2R11、-CN、-NHC(O)R10、-NHSO2R10、-CONHR10、-CONHCH2CH2OH、-NR10COOR11、-SR11C(O)OR11(如-SCH2CO2CH3)、-SR11N(R75)2，其中每個(gè)R75獨(dú)立選自H和-C(O)OR11(如-S(CH2)2NHC(O)O-t-丁基和-S(CH2)2NH2)、苯并三唑-1-基氧基、四唑-5-基硫基或取代的四唑-5-基硫基(如烷基取代的四唑-5-基硫基，像1-甲基-四唑-5-基硫基)、炔基、鏈烯基或烷基，所述烷基或鏈烯基任選被鹵素、-OR10或-CO2R10取代；R3和R4相同或不同，分別獨(dú)立代表H,R1和R2或R3和R4的任何取代基可以一起代表與苯環(huán)(環(huán)Ⅲ)稠合的飽和的或未飽和的C5-C7元環(huán)；R5、R6、R7和R8分別獨(dú)立代表H、-CF3、-COR10、烷基或芳基，所述烷基或芳基任選被OR10、-SR10、-S(O)tR11、-NR10COOR11、-N(R10)2、-NO2、-COR10、-OCOR10、-OCO2R11、-CO2R10、OPO3R10，或R5、R6、R7和R8之一與下述定義的R40一起代表-(CH2)r-，其中r為1-4，它可以被低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、-CF3或芳基取代，或R3與R6一起代表=O或=S，和/或R7與R8一起代表=O或=S；R10和R12獨(dú)立代表H、烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、雜芳基、芳基、芳烷基或-NR40R42，其中R40和R42獨(dú)立代表H、芳基、烷基、芳烷基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環(huán)烷基、雜環(huán)烷基烷基、雜烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、鏈烯基和炔基；R11代表烷基或芳基；X代表N、CH或C，使當(dāng)X為N或CH時(shí)，有一個(gè)用實(shí)線表示的與碳原子11相連的單鍵；或當(dāng)X為C時(shí)，有一個(gè)用實(shí)線和點(diǎn)線表示的與碳原子11相連的雙鍵；碳原子5和6之間的點(diǎn)線表示任選的雙鍵，使當(dāng)存在雙鍵時(shí)，A和B獨(dú)立代表-NO2、-R10、鹵代、-OR11、-OCO2R11或-OC(O)R10，當(dāng)碳原子5和6之間不存在雙鍵時(shí)，A和B分別獨(dú)立代表H2、-(OR11)2、H和鹵代、二鹵代、烷基和H、(烷基)2、-H和-OC(O)R10、H和-OR10、氧代、芳基和H、=NOR10或-O-(CH2)p-O-，其中p為2、3或4；和Z代表烷基、芳基、芳烷基、雜烷基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環(huán)烷基、雜環(huán)烷基烷基、-OR40、-SR40、-CR40R42或-NR40R42，其中R40和R42與上述定義相同；優(yōu)選在化合物(1.0)中，在碳原子11上有一個(gè)單鍵，X為碳，環(huán)上的3位、8位和10位優(yōu)選被鹵素取代；Z為-NHR40，優(yōu)選其中的R40為雜芳基烷基，更優(yōu)選為3或4-甲基吡啶基N-氧化物。
2．權(quán)利要求1的化合物，其中a為N,R1為H；R2、R3和R4為鹵代；X為CH；R5、R6、R7和R8為氫。
3．權(quán)利要求2的化合物，其中Z為-NR40R42。
4．權(quán)利要求3的化合物，其中R40為H,R42為雜芳基烷基。
5．權(quán)利要求4的化合物，其中R42為2-、3-或4-吡啶基甲基N-氧化物。
6．權(quán)利要求1的化合物選自實(shí)施例1-83化合物中的任何一種。
7．權(quán)利要求1的化合物選自實(shí)施例9的化合物。
8．抑制細(xì)胞異常生長(zhǎng)的藥用組合物，該組合物包含有效量的權(quán)利要求1的化合物以及藥學(xué)上可接受的載體。
9．抑制細(xì)胞異常生長(zhǎng)的方法，該方法包括給予有效量的權(quán)利要求1的化合物。
10．權(quán)利要求9的方法，其中所述被抑制的細(xì)胞為表達(dá)激活的ras致癌基因的腫瘤細(xì)胞。
11．權(quán)利要求9的方法，其中所述被抑制的細(xì)胞為胰腺腫瘤細(xì)胞、肺癌細(xì)胞、骨髓性白血病腫瘤細(xì)胞、甲狀腺囊腫瘤細(xì)胞、骨髓增生異常腫瘤細(xì)胞、表皮癌腫瘤細(xì)胞、膀胱癌腫瘤細(xì)胞或結(jié)腸腫瘤細(xì)胞。
12．權(quán)利要求9的方法，其中所述細(xì)胞異常生長(zhǎng)的抑制通過抑制ras法尼基蛋白轉(zhuǎn)化酶產(chǎn)生。
13．為抑制腫瘤細(xì)胞的權(quán)利要求9的方法，其中所述Ras蛋白由于Ras基因以外基因的致癌突變而被激活。
全文摘要
公開為酶—法尼基蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑的新的三環(huán)N－氰亞胺化合物和藥用組合物。也公開抑制Ras功能并因此抑制細(xì)胞異常生長(zhǎng)的方法。該方法包括給予生物體系新的三環(huán)N－氰亞胺化合物。具體地講,該方法抑制哺乳動(dòng)物,如人類細(xì)胞的異常生長(zhǎng)。
文檔編號(hào)A61K31/445GK1226246SQ97196817
公開日1999年8月18日 申請(qǐng)日期1997年7月29日 優(yōu)先權(quán)日1996年7月31日
發(fā)明者A·B·庫(kù)珀, J·J·-S·王, R·G·洛維, J·A·德賽, A·K·薩克瑟納, V·M·吉里賈瓦拉布漢, R·J·多爾 申請(qǐng)人:先靈公司