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一種從含羞草中提取總黃酮的方法

發(fā)布時(shí)間:2025-05-02

專利名稱:一種從含羞草中提取總黃酮的方法
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明屬于黃酮提取方法技術(shù)領(lǐng)域,具體為一種從含羞草中提取總黃酮的方法。
背景技術(shù)
含羞草為豆科(Fabaceae)含羞草屬(Mimosaceae)植物含羞草(Mimosa pudica) 的全草,為亞灌木狀草本植物,又名知羞草、怕羞草、喝乎草、望江南、怕丑草,剌 含羞草等。含羞草原產(chǎn)于熱帶美洲,1645年由荷蘭人引入臺(tái)灣,主要分布在我國(guó)華 東、華南、西南等地的山坡叢林、路旁、濕地,今作為觀賞植物廣為栽培?!度珖?guó)中
草藥匯編》載含羞草"甘、濯、涼,具有清熱利尿、化痰止咳、安神lM的作用。 《廣西本草選編》記載"味甘微濯,性涼,有小毒。有安神鎮(zhèn)靜,涼血止血功效。
臨床多用于急性肝炎,神經(jīng)衰弱,失眠,肺結(jié)核咳血,血尿,小兒疳積,結(jié)膜炎,跌 打損傷,帶狀皰疹等癥。近年來(lái)有關(guān)于它治療糖尿病療效較好的報(bào)道。
含羞草中的主要化學(xué)成分為黃酮苷、酚類、氨基酸、有機(jī)酸、植物甾醇類等成分, 在含羞草較多的活性成分中,尤以黃酮苷類的含量較高且活性突出?,F(xiàn)已從含羞草中 分離得到的黃酮類化合物包括有葒草苷、異葒草苷、5,7,3' ,4'-四羥蒼6~C-[P-D-斧糖- (1—4) ]-P-D-葡糖黃酮碳苷、5,7,3' ,4' -四羥基-8-C-D-芹糖-(1—4) ]-e-D-葡糖黃酮碳苷、5,7,4,-三羥基-6-C-[。-L-鼠李糖(1—2)] -》-D-葡糖黃酮碳苷、7,8,3, ,4,-四羥基-6"C-[a-L-鼠李糖-(1—2)]-D-葡 糖黃酮CT、7,8,3, ,4,-四羥基-8-C-[a-L-鼠李||~(1—2)]-3-D"葡糖黃酮碳苷 等,其中所含的葒草苷、異荮草苷等黃酮苷類成分結(jié)構(gòu)較穩(wěn)定,不宜被 破壞,具 有抗氧化、降血壓、增加冠脈流量、降血脂、抗菌消炎等方面的活性。目前,尚未見 到從含羞草中提取純化總黃酮類化合物的報(bào)道。近年來(lái)從中草藥中提取黃酮類化合物的方法多采用超聲提取法、回流提取法及冷浸提取法,采用這些方法存在溶齊鵬量大、 提取時(shí)間長(zhǎng)、操作麻煩、工作效率較低等缺點(diǎn),且分離純化黃酮類成分多采用反復(fù)硅 膠柱色譜,操作步驟多,有機(jī)溶劑用量大,尤其是常要用到氯仿、甲醇等有害^U, 對(duì)環(huán)境造成污染,生產(chǎn)成本高。

發(fā)明內(nèi)容
針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中存在的上述問題,本發(fā)明的目的在于設(shè)計(jì)提供一種快速?gòu)暮卟?中提取總黃酮的方法的技術(shù)方案,該方法工藝簡(jiǎn)單,生產(chǎn)成本低,總黃酮的轉(zhuǎn)移率高。 所述的一種從含羞草中提取總黃酮的方法,其特征在于包括以下步驟
1) 將含羞草全草晾干后粉碎成粗粉,過(guò)篩;
2) 將含羞草粗粉m滲漉筒中,用含水乙醇浸泡后,以含水乙醇進(jìn)行滲漉,收 集滲漉液;
3) 滲漉液真空M,回收乙醇,得到 液;
4) 脫色處理步驟3)得到的繊液用活性織聲脫色,抽濾,除去活性碳,
5) 步驟4)得到的濾液真空濃縮,得到濾液濃縮液;
6) 大孔樹脂純化將步驟5)得到的濾液濃縮液通過(guò)大孔吸附樹脂分離富集, 然后先用H20洗脫,再依次用10 70%含水乙醇進(jìn)行梯度洗脫,最后用70%丙酮洗脫, 分別收集3倍柱體積的各部位洗脫液,合并10 70%含水乙醇各部位的洗脫液,將合 并的洗脫液艦鄉(xiāng),得到洗脫繊夜;
7) 二次大 L樹脂純化將步驟6)中得到的洗脫l縮液通過(guò)大孔吸附樹脂柱分 離富集,然后先用H20洗脫,再依次用10 70%含水乙醇進(jìn)行梯度洗脫,最后用70% 丙酮洗脫,分別收集3倍柱體積的各部位洗脫液,合并20 60%含水乙醇各部位的洗 脫液,將合并的洗脫液Mil^t縮、再進(jìn)一步真空濃縮干燥,即得含羞草總黃酮提取物 干粉。
5戶,的一種從含羞草中提取總黃酮的方法,其特征在于步驟l)中含羞草全草挑
選后打成粗粉,過(guò)20 40目篩。
所述的一種從含羞草中提取總黃酮的方法,其特征在于步驟2)中將含羞草粗粉 m滲漉筒中,用50 80%的含水乙醇浸泡12 14小時(shí)后,用含羞草粗粉8 16倍 量的50 80%含水乙醇進(jìn)行滲漉提取,流速為4 6 mL/min,收集滲漉液。
阮述的一種從含羞草中提取總黃酮的方法,其特征在于步驟3)中滲漉液在水浴 溫度5(TC以下真空自,回收乙醇,得到 液。
所述的一種從含羞草中提取總黃酮的方法,其特征在于步驟4)中將、 液用粉 末狀活性炭在50。C以下超聲脫色30-60分鐘,活性炭的用量為含羞草粗粉用量的2-5 %,脫色1 2次,抽濾,除去活性炭,濾液備用。
戶皿的一種從含羞草中提取總黃酮的方法,其特征在于步驟5)中將濾液在50 °。以下真空 ,得到濾液^L縮液。
戶,的一種從含羞草中提取總黃酮的方法,其特征在于步驟6)、步驟7)中選用 20 60%含水乙醇進(jìn)行梯度洗脫。
戶,的一種從含羞草中提取總黃酮的方法,其特征在于步驟6)、步驟7)中所述 的 為5(TC以下真空MI。
所述的一種從含羞草中提取總黃酮的方法,其特征在于步驟6)中將洗脫WI液 真空亂縮千燥,得到干粉,將干粉加7jC溶解后進(jìn)入下步工藝。
大孔吸附樹脂是近代發(fā)展起來(lái)的一類有機(jī)高聚物吸附劑,廣泛應(yīng)用于中草 藥成分的提取分離。中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所試用大孔吸附樹脂對(duì)糖類、生 物堿、黃酮等進(jìn)行吸附,并在此基礎(chǔ)上用于天麻、赤勺、靈芝和照山白等中草 藥的提取分離,結(jié)果表明大孔吸附樹脂是分離中草藥水溶性成分的一種有效方 法,除無(wú)機(jī)礦物質(zhì)外,其它中藥有效部位均可不同程度的被樹脂吸附純化。
上述一種從含羞草中提取總黃酮的方法,其工藝簡(jiǎn)單、操作方便、設(shè),資少、
6M^、了溶劑用量,無(wú)環(huán)境污染,生產(chǎn)成本低。采用紫外法測(cè)定所得到的總黃酮提取物
干粉,提取物中總黃酮的含量為42.60%左右,其中葒草苷含Ki8.84X左右,總黃 酮的轉(zhuǎn)移率達(dá)76.56%左右,總黃酮的轉(zhuǎn)移率高。
本申請(qǐng)文件中涉及的百M(fèi)量除另有說(shuō)明外,液體的百M(fèi)量為體積比,固體的 百M(fèi)量為重量比。
具體實(shí)施例方式
現(xiàn)結(jié)合具體實(shí)施例,對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明,具體工藝步驟如下所述
1)原料處理將含羞草全草杉隨后打成粗粉,過(guò)20-40目篩;2)提取將含羞
草粗粉m滲漉筒中,用50%含水乙醇浸泡14小時(shí)后,用含羞草粗粉16倍量的50 %含水乙醇進(jìn)行滲漉提取,流速為5mL/min,收集滲漉液;3) Mffi濃縮提取液在 7jC浴鵬5CTC以下真空、Mg,回收乙醇,得到含2 mL 鄉(xiāng)、W每g含羞草粗粉;4) 脫色處理將步驟3)得到的濃縮液用粉末狀活性炭在5(TC以下超聲脫色30射中, 話性炭的用量為含羞草粗粉用量的2%,脫色l次,抽濾,除去活性碳,濾液備用; 5) MS濃縮將步驟4)得到的濾液繼續(xù)在5(TC以下真空濃縮到含lniL濾液WI液 /每g含羞草粗粉;6)大孔樹脂純化將步驟5)得到的濾液 液通過(guò)DiaionHP-20 大孔吸附樹脂分離富集,然后先用H20洗脫,再依次用10%含水乙醇、20%含水乙醇、 40%含水乙醇、60%含水乙醇、70°/。含水乙醇進(jìn)行梯度洗脫,最后用70%丙酮洗脫,分別 收集3倍柱^l只的各部位洗脫液,合并10-70%含水乙醇各部位的洗脫液,將合并的 洗脫液在5(TC以下真空濃縮,得到洗脫濃縮液;7) 二次大 L樹脂純化將步驟6) 中得到的洗脫濃縮液通過(guò)Diaion HP-20大孔吸附樹脂柱分離富集,然后先用H20洗 脫,再依次用10%含水乙醇、20%含水乙醇、40%含水乙醇、60%含水乙醇、70%含水乙 醇進(jìn)行梯度洗脫,最后用70%丙酮洗服分別收集3倍柱體積的各部位洗脫液,合并 20-60%含水乙醇各部位的洗脫液,將合并的洗脫液在50"以下真空 、千燥,即 得含羞草總黃酮提取物干粉。上述步驟6)中用H20洗脫除掉水溶性雜質(zhì),步驟7)
7中用H20和10%含水乙醇洗脫除掉7夂溶性雜質(zhì);最后都用70%丙酮洗脫除掉全部雜質(zhì), 再生大孔吸附樹脂。步驟6)中還可以將洗脫濃縮液真空濃縮^B喿,得到干粉,將干 粉加水溶解后進(jìn)入下步工藝。
申請(qǐng)人在步驟2)中采用60%含水乙醇、70%含水乙醇或80%含水乙醇浸泡后滲漉, 含羞草粗粉浸泡時(shí)間為12小時(shí),提取用含水乙醇用量為含羞草粗粉的8倍、10倍、 12倍或14倍量,流速為4 mL/min或6 mL/min;在步驟4)中活性炭的用量為含羞 草粗粉用量的3%或4%,超聲脫色時(shí)間為40辦中、50分鐘或60 6H中,脫色2次, 每次脫色處理均加入同樣量的活性炭;在步驟6)中采用15%含水乙醇、30%含水乙醇、 50%含水乙醇、60%含水乙醇進(jìn)行梯度洗脫,合并15-60%含水乙醇各部位;或者采用 20%含水乙醇、35%含水乙醇、45%含水乙醇、65°/。含水乙醇進(jìn)行梯度洗脫,合并20-65% 含水乙醇各部位;在步驟7)中分別采用15%含水乙醇、25%含水乙醇、45%含水乙醇、 60%含水乙醇進(jìn)行梯度洗脫,合并25-60%含水乙醇各部位;或者采用20%含水乙醇、 30%含水乙醇、40%含水乙醇、50%含水乙醇、60%含水乙醇進(jìn)行梯度洗脫,合并30-60% 含水乙醇各部位;其它方法和上述具體工藝步驟相同,也基本旨繼到本發(fā)明所述的技 術(shù)效果。
上述步驟2)中用含羞^(guò)1i粉8 16倍量的意思是若含羞草粗粉為lkg,則溶劑 用量為8 16升。步驟3)中得到含2 mL濃縮、^/每g含羞草粗粉的意思是濃縮液 的濃縮程度由含羞草粗粉重量來(lái)決定,若含羞草粗粉為lg,則、 液體積為2毫升。 步驟5)中含1 mL搶液鄉(xiāng)M/每g含羞草粗粉的意思是濾液鄉(xiāng)液的、鵬禾號(hào)由 含羞草粗粉重量來(lái)決定,若含羞草粗粉為lg,則濾液 it縮液的的體積為1毫升。
本發(fā)明所述的從含羞草中提取總黃酮的方法,工藝簡(jiǎn)單、操作方便、設(shè) 資少、 M^了翻,量,無(wú)環(huán)境污染,生產(chǎn)成本低。采用紫外法測(cè)定所得到的總黃酮提取物 干粉,提取物中總黃酮的含量為42.60%左右,其中葒草苷含敏8.84%左右,總黃 酮的轉(zhuǎn)移率達(dá)76.56%左右,總黃酮的轉(zhuǎn)移率高。
權(quán)利要求
1、一種從含羞草中提取總黃酮的方法,其特征在于包括以下步驟1)將含羞草全草晾干后粉碎成粗粉,過(guò)篩;2)將含羞草粗粉裝入滲漉筒中,用含水乙醇浸泡后,以含水乙醇進(jìn)行滲漉,收集滲漉液;3)減壓濃縮滲漉液真空濃縮,回收乙醇,得到濃縮液;4)脫色處理步驟3)得到的濃縮液用活性炭超聲脫色,抽濾,除去活性碳,濾液備用;5)減壓濃縮步驟4)得到的濾液真空濃縮,得到濾液濃縮液;6)大孔樹脂純化將步驟5)得到的濾液濃縮液通過(guò)大孔吸附樹脂分離富集,然后先用H2O洗脫,再依次用10~70%含水乙醇進(jìn)行梯度洗脫,最后用70%丙酮洗脫,分別收集3倍柱體積的各部位洗脫液,合并10~70%含水乙醇各部位的洗脫液,將合并的洗脫液減壓濃縮,得到洗脫濃縮液;7)二次大孔樹脂純化將步驟6)中得到的洗脫濃縮液通過(guò)大孔吸附樹脂柱分離富集,然后先用H2O洗脫,再依次用10~70%含水乙醇進(jìn)行梯度洗脫,最后用70%丙酮洗脫,分別收集3倍柱體積的各部位洗脫液,合并20~60%含水乙醇各部位的洗脫液,將合并的洗脫液減壓濃縮、再進(jìn)一步真空濃縮干燥,即得含羞草總黃酮提取物干粉。
2、 如權(quán)利要求1所述的一種從含羞草中提取總黃酮的方法,其特征在于步驟l) 中含羞草全草挑選后打成粗粉,過(guò)20 40目篩。
3、 如權(quán)利要求1所述的一種從含羞草中提取總黃酮的方法,其特征在于步驟2) 中將含羞草粗粉裝入滲漉筒中,用50 80%的含水乙醇浸泡12 14小時(shí)后,用含羞 草粗粉8 16倍量的50 80%含水乙醇進(jìn)行滲漉提取,^il為4 6 mL/min,收集滲 漉液。
4、 如權(quán)利要求1所述的一種從含羞草中提取總黃酮的方法,其特征在于步驟3)中滲漉液在水浴溫度5(TC以下真空濃縮,回收乙醇,得到濃縮液。
5、 如權(quán)利要求1所述的一種從含羞草中提取總黃酮的方法,其特征在于步驟4)中將^it縮液用粉末狀活性炭在5(TC以下超聲脫色30-60射中,活性炭的用量為含羞草粗粉用量的2-5%,脫色1 2次,抽濾,除去活性炭,濾液備用。
6、 如權(quán)禾腰求1所述的一種從含羞草中提取總黃酮的方法,其特征在于步驟5)中將濾液在50°C以下真空 ,得到濾液,縮液。
7、 如權(quán)利要求1所述的一種從含羞草中提取總黃酮的方法,其特征在于步驟6)、步驟7)中選用20 60%含水乙醇進(jìn)行梯度洗脫。
8、 如權(quán)利要求1所述的一種從含羞草中提取總黃酮的方法,其特征在于步驟6)、步驟7)中呢悉的MiSM為5(rc以下真空^1。
9、 如權(quán)利要求1所述的一種從含羞草中提取總黃酮的方法,其特征在于步驟6)中將洗脫,液真空^L縮^B喿,得到干粉,將干粉加水溶解后進(jìn)入下步工藝。
全文摘要
一種從含羞草中提取總黃酮的方法,屬于黃酮提取方法技術(shù)領(lǐng)域。包括以下步驟含羞草粉碎成粗粉,過(guò)篩;將含羞草粗粉用含水乙醇浸泡后,以含水乙醇進(jìn)行滲漉;滲漉液減壓濃縮得到濃縮液;濃縮液用活性炭超聲脫色,濾液備用;濾液減壓濃縮得濾液濃縮液;大孔樹脂純化濾液濃縮液通過(guò)大孔吸附樹脂分離富集,用H<sub>2</sub>O和10~70%含水乙醇進(jìn)行梯度洗脫,合并10~70%含水乙醇各部位的洗脫液減壓濃縮;洗脫濃縮液二次大孔樹脂純化,合并20~60%含水乙醇各部位的洗脫液減壓濃縮、再進(jìn)一步真空濃縮干燥,得含羞草總黃酮提取物干粉。采用上述方法得到的提取物中總黃酮含量為42.60%左右,總黃酮轉(zhuǎn)移率達(dá)76.56%左右。
文檔編號(hào)A61K36/48GK101474240SQ20091009573
公開日2009年7月8日 申請(qǐng)日期2009年1月22日 優(yōu)先權(quán)日2009年1月22日
發(fā)明者珂 袁 申請(qǐng)人:浙江林學(xué)院

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  • 專利名稱::一種輔酶q10藥物組合物的制作方法技術(shù)領(lǐng)域::本發(fā)明涉及一種新的以輔酶Q10為活性成份的注射給藥的藥物組合物。背景技術(shù)::輔酶Q10是一種脂溶性醌類化合物,廣泛存在于植物、微生物細(xì)胞內(nèi)以及動(dòng)物的心臟、肝臟、脾臟和腎臟中,具有多種
  • 專利名稱::含有2-甲基-1,3-丙二醇的透明美容棒劑組合物的制作方法背景技術(shù)::本發(fā)明涉及透明的美容棒劑(stick)組合物,特別涉及具有改進(jìn)的透明度和穩(wěn)定性的除臭棒劑組合物。含有一元醇和或多元醇、皂類膠凝劑以及選擇性地含有水以及一種或多
  • 專利名稱:噻吩并[2,3-d]嘧啶二酮及其在自身免疫性疾病調(diào)節(jié)中的用途的制作方法技術(shù)領(lǐng)域:本發(fā)明涉及噻吩并[2,3-d]嘧啶二酮、其制備方法、包含所述化合物的藥物組合物以及它們?cè)谥委熤械挠猛?。特別地,在自身免疫性疾病調(diào)節(jié)中的用途。T-細(xì)胞在