專利名稱：化合物茯苓酸作為制備藥物的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及化合物茯苓酸(3β乙酰氧基16α羥基羊毛甾8，24(31)二烯21酸)的用途，尤其涉及在制藥領(lǐng)域中的用途。

背景技術(shù)：
化合物茯苓酸的結(jié)構(gòu)式為
該化合物的分子式為C33H52O5，白色針狀結(jié)晶，分子量528，該化合物可由中藥白茯苓中提取制備，目前尚無其該單一化合物在制藥中的應(yīng)用。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供化合物茯苓酸的新用途，即在制藥中的新應(yīng)用。
實(shí)際上，本項(xiàng)目涉及化合物茯苓酸作為制備治療或預(yù)防移植后排斥反應(yīng)的藥的應(yīng)用。
涉及化合物茯苓酸在制備治療或預(yù)防外周血淋巴細(xì)胞凋亡的藥中的應(yīng)用。
涉及化合物茯苓酸在制備治療或預(yù)防外周血CD4+和CD8+淋巴細(xì)胞數(shù)量百分比異常的藥中的應(yīng)用。
為了更好的理解本發(fā)明的實(shí)質(zhì)，下面用化合物茯苓酸與橄欖油的混合物的藥理實(shí)驗(yàn)及結(jié)果來說明其在制藥領(lǐng)域中的新用途，橄欖油僅僅作為載體，無實(shí)質(zhì)的藥理作用，實(shí)驗(yàn)中用使用相同的橄欖油的對(duì)照組進(jìn)行對(duì)比。
采用中藥白茯苓粉末150kg，乙醚冷浸三次，每次48小時(shí)，過濾，取冷浸液，減壓回收乙醚后得淡黃色浸膏(150g)，經(jīng)Si-gel C.C.CHCl3∶MeOH(50∶1-20∶1)處理，得Fr.1、Fr.2、Fr.3(20g)、Fr.4和Fr.5，五種物質(zhì)，取Fr.3(20g)再次予以Si-gel C.C.CHCl3∶MeOH(50∶1)處理，得Fr.3.1、Fr.3.2(15g)和Fr.3.3三種物質(zhì)，取Fr.3.2(15g)予以O(shè)DS C.C.MeOH∶H2O(85∶15)處理，得Fr.3.2.1、Fr.3.2.2、Fr.3.2.3(8g)Fr.3.2.4和Fr.3.2.5五種物質(zhì)，取Fr.3.2.3(8g)甲醇反復(fù)重結(jié)晶，化合物茯苓酸-白色結(jié)晶(1500mg)。消毒后與橄欖油混合成1mg/ml和10mg/ml兩種濃度備用。
1.毒性試驗(yàn) 口服給藥健康雄性SD大鼠，體重250-300克，清潔級(jí)，視給藥劑量選用1mg/ml或10mg/ml兩種濃度的茯苓酸橄欖油混合物予以0.5mg/kg，1.0mg/kg，2.0mg/kg，10.0mg/kg劑量分組，對(duì)照組采用相同體積的橄欖油，每組10只，予以灌胃治療，每日一次，觀察七天無一只死亡。
2.用常規(guī)藥理試驗(yàn)觀察了茯苓酸橄欖油溶液灌胃對(duì)大鼠外周血淋巴細(xì)胞線粒體膜電位的改變，外周血淋巴細(xì)胞凋亡百分比、外周血CD4+淋巴細(xì)胞和CD8+淋巴細(xì)胞數(shù)量百分比變化。試驗(yàn)結(jié)果證明，在1.0mg/kg和10mg/kg上述灌胃劑量條件下，茯苓酸可以有效降低外周血淋巴細(xì)胞凋亡百分比。小劑量茯苓酸(0.5m/kg，1.0mg/kg，2.0mg/kg)條件下，可以有效提高CD4+淋巴細(xì)胞數(shù)量百分比，在大劑量(10mg/kg)條件下，對(duì)CD4+淋巴細(xì)胞數(shù)量百分比調(diào)節(jié)不顯著。對(duì)各劑量茯苓酸均可有效提高CD8+淋巴細(xì)胞數(shù)量百分比。
上述結(jié)果說明，茯苓酸在一般情況下，可以有效降低外周血淋巴細(xì)胞凋亡；同時(shí)可以通過調(diào)整劑量，達(dá)到調(diào)節(jié)CD4+淋巴細(xì)胞和CD8+淋巴細(xì)胞數(shù)量百分比的目的。
3.茯苓酸抑制器官移植后排斥反應(yīng)的研究試驗(yàn)采用以Wister大鼠為供體，SD大鼠為受體，建立改良的Ono心臟移植模型，給模型予以10mg/kg的茯苓酸每日一次灌胃治療。通過對(duì)模型的供體心臟病理檢查、外周血淋巴細(xì)胞凋亡百分比、外周血CD4+淋巴細(xì)胞凋亡百分比、外周血CD4+淋巴細(xì)胞和CD8+淋巴細(xì)胞數(shù)量百分比進(jìn)行研究。結(jié)果表明在接受移植物的機(jī)體免疫狀態(tài)較為極端的條件下，一定劑量的茯苓酸(10mg/kg)可以有效發(fā)揮抗移植排斥反應(yīng)的作用，保護(hù)移植的心臟，同時(shí)保護(hù)外周血淋巴細(xì)胞減少其凋亡百分比，穩(wěn)定外周血CD8+淋巴細(xì)胞數(shù)量百分比，避免其異常增高，而且該特點(diǎn)具有相對(duì)特異性，即茯苓酸對(duì)外周血CD4+淋巴細(xì)胞數(shù)量百分比仍未見明顯調(diào)節(jié)作用。
從以上結(jié)果，可以得出本發(fā)明優(yōu)點(diǎn)在于 (1).本發(fā)明對(duì)已知化合物茯苓酸(3β乙酰氧基16α羥基羊毛甾8，24(31)二烯21酸)發(fā)掘了新的醫(yī)藥用途，開拓了一個(gè)新的應(yīng)用領(lǐng)域。
(2).本發(fā)明的茯苓酸提取自天然藥物，安全無毒，藥理作用強(qiáng)，預(yù)示著很好的藥理作用前景。
(3).本發(fā)明的產(chǎn)品配制成的藥物具有顯著的抗排斥反應(yīng)的藥理學(xué)作用。
(4).本發(fā)明的產(chǎn)品配制成的藥物具有顯著的降低接受移植的受體的外周血淋巴細(xì)胞凋亡的作用。
(5).本發(fā)明的產(chǎn)品配制成的藥物在一定條件和劑量下，具有特異性調(diào)節(jié)接受移植的受體的外周血CD8+淋巴細(xì)胞的藥理學(xué)作用。
(6).本發(fā)明的產(chǎn)品配制成的藥物在一定條件和劑量下，具有顯著調(diào)節(jié)CD4+和CD8+淋巴細(xì)胞數(shù)量百分比的作用。

具體實(shí)施例方式 下面描述本發(fā)明的幾個(gè)實(shí)施例，但本發(fā)明的內(nèi)容完全不局限于此。
實(shí)施例1 采用中藥白茯苓粉末150kg，乙醚冷浸三次，每次48小時(shí)，過濾，取冷浸液，減壓回收乙醚后得淡黃色浸膏(150g)，經(jīng)Si-gel C.C.CHCl3∶MeOH(50∶1-20∶1)處理，得Fr.1、Fr.2、Fr.3(20g)、Fr.4和Fr.5，五種物質(zhì)，取Fr.3(20g)再次予以Si-gel C.C.CHCl3∶MeOH(50∶1)處理，得Fr.3.1、Fr.3.2(15g)和Fr.3.3三種物質(zhì)，取Fr.3.2(15g)予以O(shè)DS C.C.MeOH∶H2O(85∶15)處理，得Fr.3.2.1、Fr.3.2.2、Fr.3.2.3(8g)Fr.3.2.4和Fr.3.2.5五種物質(zhì)，取Fr.3.2.3(8g)甲醇反復(fù)重結(jié)晶，化合物茯苓酸-白色結(jié)晶(1500mg)。與橄欖油混合成100mg/ml濃度混合物，消毒，密封后制成產(chǎn)品。
實(shí)施例2 用實(shí)施例1所得的化合物茯苓酸-白色結(jié)晶與橄欖油混合成10mg/ml濃度混合物，消毒，密封后制成產(chǎn)品。
實(shí)施例3 用實(shí)施例1所得的化合物茯苓酸-白色結(jié)晶200mg按照已知的方法制成膠囊劑成為產(chǎn)品。
權(quán)利要求
1.化合物茯苓酸在制備治療或預(yù)防移植排斥反應(yīng)的藥中的應(yīng)用。
2.化合物茯苓酸在制備治療或預(yù)防外周血淋巴細(xì)胞凋亡的藥中的應(yīng)用。
3.化合物茯苓酸在制備穩(wěn)定外周血CD8+淋巴細(xì)胞數(shù)量百分比的藥中的應(yīng)用。
4.化合物茯苓酸在制備調(diào)節(jié)外周血CD4+淋巴細(xì)胞數(shù)量百分比的藥中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及化合物茯苓酸在制藥領(lǐng)域中的用途，該產(chǎn)品具有降低移植手術(shù)后受體對(duì)移植物的排斥反應(yīng)，保護(hù)受體外周血淋巴細(xì)胞線粒體膜電位穩(wěn)定，減少外周血淋巴細(xì)胞凋亡百分比，穩(wěn)定外周血CD8+淋巴細(xì)胞數(shù)量百分比等功能，在非移植條件下，降低外周血淋巴細(xì)胞凋亡百分比，調(diào)節(jié)CD4+和CD8+淋巴細(xì)胞數(shù)量百分比等功能，用于治療在動(dòng)物和人類器官、組織、細(xì)胞等移植時(shí)降低移植物排斥反應(yīng)，調(diào)節(jié)、穩(wěn)定機(jī)體的淋巴細(xì)胞數(shù)量、比例和功能。
文檔編號(hào)A61P7/00GK101301295SQ200710144479
公開日2008年11月12日 申請(qǐng)日期2007年10月23日 優(yōu)先權(quán)日2007年10月23日
發(fā)明者劉宏宇, 張學(xué)峰, 帆 張 申請(qǐng)人:劉宏宇, 張學(xué)峰, 帆 張