專利名稱：一種純化野生黨參皂苷的新方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于天然有機化學領(lǐng)域，涉及一種從大興安嶺野生黨參里提取黨參皂苷的方法，特別是涉及一種利用生物酶解、離子液體提取、超高壓純化黨參皂苷的新方法。
背景技術(shù)：
黨參，草質(zhì)纏繞藤本，有白色乳汁。根胡蘿卜狀圓形，長約30厘米，常在中部分枝。 莖長約1. 5米，分枝多，無毛。葉互生，葉片卵形或狹卵形，長1. 2 6. 5厘米，寬O. 6 5厘米，邊緣有波狀鋸齒，兩面有密或疏的短伏毛；葉柄長O. 6 2. 5厘米，常疏生開展的短毛， 花I 3朵生分枝頂端，花萼無毛，裂片5，狹矩圓形或矩圓狀披針形，長1. 6 1. 8厘米，花冠淡黃綠色，寬鐘狀，長1. 8 2. 4厘米，無毛，5淺裂，裂片正三角形，急尖，雄蕊5 ;子房半下位，3室，蒴果3瓣裂，有宿存花萼。
國內(nèi)一般用溶劑浸提法或微波提取，大孔樹脂純化生產(chǎn)黨參皂苷，存在著純度低， 產(chǎn)品質(zhì)量不穩(wěn)定等缺點。本發(fā)明的不同之處在于采用生物酶解加速有效成分的溶出，再用離子液體提取使皂苷提充分，超高壓進一步純化黨參皂苷，原料利用度高，產(chǎn)品純度高，它的意義不僅在于綜合利用當?shù)匾吧Y源，開發(fā)新產(chǎn)品，而且也對充分利用類似的林下資源提供了參考依據(jù)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明優(yōu)點
本發(fā)明主要采用生物酶解、離子液體提取、超高壓純化技術(shù)。本發(fā)明方法簡單易操作，適合大生產(chǎn)，成本低，選用的離子液體安全，無化學殘留。
為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是
—種采用生物酶解、離子液體提取、超高壓純化黨參皂苷的新方法，其步驟如下
(I)黨參根粉碎至20-40目，采用復(fù)合纖維素酶，酶用量為底物的O. 5-1%，在合適溫度下保溫2-4h ；
(2)用離子液體，在70_85°C提取l_2h，得到固液混合物；
(3)將混合物倒入超高壓容器中，在超高壓力200-400MPA下處理2_4min ；
(4)將所得液在60°C真空干燥，得皂苷粗品；
(5)將所得粗 品粉末，溶于甲醇加適量硅膠攪拌，烘干過60-80目篩，干法上樣，上工業(yè)級柱硅膠柱層析；
(6)以2_4BV/ h流速，用一定體積濃度乙醇在3 1-5 I條件下進行梯度洗脫， 薄層色譜法跟蹤監(jiān)測；
(7)收集各階段洗脫液濃縮，回收乙醇，減壓60°C真空干燥，得到含量為99%以上的皂苷成品。
具體實施例方式
實施例1 :一種采用生物酶解、離子液體提取、超高壓純化黨參皂苷的新方法，其步驟如下
(I) 50g黨參根粉碎至20目，采用復(fù)合纖維素酶，酶用量為底物的0.5%，保溫沉淀 2h ；
(2)用離子液體1-丁基-3-甲基咪唑鹽，在70°C，提取lh，得到固液混合物；
(3)將混合物倒入超高壓容器中，在超高壓200MPA條件下處理2min ；
(4)將所得液在60°C真空干燥，得皂苷粗品；
(5)將所得粗品粉末，溶于甲醇加適量硅膠攪拌，烘干過60目篩，干法上樣，上工業(yè)級柱200目硅膠柱層析；
(6)以2BV/h流速，用體積分數(shù)70^^80^^85%乙醇在3 I條件下進行梯度洗脫，薄層色譜法跟蹤監(jiān)測；
(7)收集各階段洗脫液濃縮，回收乙醇，減壓60°C真空干燥，得到含量為99. 2%的成品。
實施例2 :—種采用生物酶解、離子液體提取、超高壓純化黨參皂苷的新方法，其步驟如下
(I) 50g黨參根粉碎至30目，采用復(fù)合纖維素酶，酶用量為底物的O. 8%，保溫沉淀 3h ；
(2)用離子液體1- 丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸鹽，在80°C提取1. 5h，得到固液混合物；
(3)將混合物倒入超高壓容器中，在超高壓300MPA條件下處理3min ；
(4)將所得液在60°C真空干燥，得皂苷粗品；
(5)將所得粗品粉末，溶于甲醇加適量硅膠攪拌，烘干過80目篩，干法上樣，上工業(yè)級柱300目硅膠柱層析；
(6)以3BV/h流速，用體積分數(shù)70^^80^^85%乙醇在4 I條件下進行梯度洗脫，薄層色譜法跟蹤監(jiān)測；
(7)收集各階段洗脫液濃縮，回收乙醇，減壓60°C真空干燥，得到含量為99. 5%的成品。
實施例3 :—種采用生物酶解、離子液體提取、超高壓純化黨參皂苷的新方法，其步驟如下
(I) IOOg黨參根粉碎至40目，采用復(fù)合纖維素酶，酶用量為底物的1%，保溫沉淀 4h ；
(2)用離子液體1-己基-3-甲基咪唑六氟磷酸鹽，在85°C提取2h，得到固液混合物；
(3)將混合物倒入超高壓容器中，在超高壓400MPA，條件下處理4min ；
(4)將所得液在60°C真空干燥，得皂 苷粗品；
(5)將所得粗品粉末，溶于甲醇加適量硅膠攪拌，烘干過60目篩，干法上樣，上工業(yè)級柱200目硅膠柱層析；
(6)以4BV/h流速，用體積分數(shù)70^^80^^85%乙醇在5 I條件下進行梯度洗脫，薄層色譜法跟蹤監(jiān)測；
(7)收集各階段洗脫液濃縮，回收乙醇，減壓60°C真空干燥，得到含量為99. 1%的成品 。
權(quán)利要求
1.一種采用生物酶解、離子液體提取、超高壓純化黨參皂苷的新方法，其步驟如下 (1)黨參根粉碎至20-40目，采用復(fù)合纖維素酶，酶用量為底物的0.5-1%，保溫沉淀時間 2~4h ； (2)用離子液體，在70-85°C提取l_2h，得到固液混合物； (3)將混合物倒入超高壓容器中，在超高壓200-400MPA條件下處理2_4min； (4)將所得液在60°C真空干燥，得皂苷粗品； (5)將所得粗品粉末，溶于甲醇加適量硅膠攪拌，烘干過60-80目篩，干法上樣，上工業(yè)級柱硅膠柱層析； (6)以2-4BV/h流速，用一定體積濃度乙醇在3 1-5 I條件下進行梯度洗脫，薄層色譜法跟蹤監(jiān)測； (7)收集各階段洗脫液濃縮，回收乙醇，減壓60°C真空干燥，得到含量為99%以上的成品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種采用生物酶解、離子液體提取、超高壓純化黨參皂苷的新方法，其特征是在所述的步驟(I)中，酶解溫度為45-50°C。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種采用生物酶解、離子液體提取、超高壓純化黨參皂苷的新方法，其特征是在所述的步驟(2)中，離子液體為1- 丁基-3-甲基咪唑鹽或1- 丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸鹽或1-己基-3-甲基咪唑六氟磷酸鹽的一種。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種采用生物酶解、離子液體提取、超高壓純化黨參皂苷的新方法，其特征是在所述的步驟(5)中，層析硅膠為200-300目。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種采用生物酶解、離子液體提取、超高壓純化黨參皂苷的新方法，其特征是在所述的步驟￠)中，洗脫的乙醇體積濃度分別為
全文摘要
本發(fā)明屬于天然有機化學領(lǐng)域，涉及一種從大興安嶺野生黨參里提取黨參皂苷的方法，特別是涉及一種利用生物酶解、離子液體提取、超高壓純化黨參皂苷的新方法。本發(fā)明優(yōu)點1、應(yīng)用生物酶解技術(shù)，使細胞內(nèi)有效成分充分溶出。2、離子液體提取，具有良好的溶解有效成分能力，且具有溶劑和催化劑的雙重功能。3、超高壓提取是在常溫下進行的，因此避免了因熱效應(yīng)引起的有效成分結(jié)構(gòu)變化、損失以及生理活性降低，同時超高壓技術(shù)減少雜質(zhì)成分溶出的同時，提高了皂苷的收率。本發(fā)明利用生物酶解、離子液體提取與超高壓藕聯(lián)技術(shù)，先用生物酶解促使皂苷充分溶出，再用離子液體催化提取，再經(jīng)超高壓純化，最后經(jīng)過硅膠柱層析二次純化，使黨參皂苷純度提高到99.5％。
文檔編號A61K36/344GK103040902SQ20121059553
公開日2013年4月17日 申請日期2012年12月13日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月13日
發(fā)明者張亞紅, 姚德坤, 姚德利, 萬莉 申請人:大興安嶺林格貝有機食品有限責任公司