專利名稱：米托蒽醌納米磷酸氫鈣制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，更具體的是涉及米托蒽醌納米磷酸氫鈣制劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
自上世紀(jì)70年代以來(lái)，我國(guó)癌癥死亡率一直呈持續(xù)增長(zhǎng)趨勢(shì)，70年代、90年代和 21世紀(jì)初每年死于癌癥的人數(shù)分別為70萬(wàn)、117萬(wàn)和150萬(wàn)，癌癥已經(jīng)成為嚴(yán)重威脅我國(guó)人民健康的頭號(hào)殺手。因此預(yù)防及治療癌癥是我國(guó)乃至全球所要面臨的一個(gè)重大問(wèn)題。治療癌癥常用的化療藥物很多，其中米托蒽醌便是那一種有效地抗腫瘤藥物，尤其對(duì)乳腺癌及惡性淋巴癌的治療具有很好的療效。然而化療藥物在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時(shí)也會(huì)對(duì)人體的正常細(xì)胞造成極大的損害，從而引起其他的副作用，對(duì)人體造成傷害。MA為一種蒽醌抗腫瘤新藥，其結(jié)構(gòu)及抗癌作用與阿霉素相近，因其無(wú)氨基糖結(jié)構(gòu)， 不產(chǎn)生自由基，且有抑制脂質(zhì)過(guò)氧化作用，故對(duì)心臟毒性較低。其作用機(jī)制表明，可視MA為細(xì)胞周期非特異性藥物，因它可殺滅任何細(xì)胞周期的癌細(xì)胞，增殖與非增殖細(xì)胞均受到抑制。分裂細(xì)胞比休止細(xì)胞對(duì)本品更敏感，S后期對(duì)米托蒽醌最敏感。它對(duì)惡性腫瘤細(xì)胞的作用是通過(guò)以下兩種機(jī)制(I)嵌入作為嵌入劑，它能嵌入到DNA堿基之間從而阻斷DNA合成與轉(zhuǎn)錄 (transcription),導(dǎo)致DNA鏈的膠連和鏈結(jié)構(gòu)的破壞。(2)酶抑制可抑制II型拓?fù)洚悩?gòu)酶(topoisomerase)的活性,從而導(dǎo)致基因組 DNA的崩解。納米藥劑的研制制有望解決化療毒副作用這個(gè)長(zhǎng)期困擾人們的問(wèn)題。納米藥劑指利用三維空間中至少有一維處于納米尺度范圍(I-IOOnm)或由它們作為基本單元構(gòu)成的納米材料為基材，來(lái)承載藥物而制備的新型藥物制劑。這種新型的藥物制劑能夠利用實(shí)體瘤的高通透性和滯留效應(yīng)(enhanced permeability and retention effect,EPR),有選擇的滲透并滯留在腫瘤組織部位，從而可以增加藥效并減少系統(tǒng)副作用。因而我們希望通過(guò)對(duì)米托蒽醌納米磷酸氫鈣制劑的研究，來(lái)以此能改善現(xiàn)有的納米治療技術(shù)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是設(shè)計(jì)并制備一種新型的米托蒽醌納米磷酸氫鈣制劑。本技術(shù)與現(xiàn)有的制備方法相比，制得的磷酸氫鈣納米粒子更加均勻，粒徑也更小(100納米以下)，因而可以在藥物載體方面有更好的應(yīng)用研究。米托蒽醌納米磷酸氫鈣制劑的制備方法，步驟如下I)分別配置100 900毫摩爾每升的氯化鈣和磷酸氫二鈉水溶液，備用。2)取一定量的氯化鈣加入相應(yīng)的米托蒽醌(氯化鈣與米托蒽醌摩爾比為5 : I I I)，超聲分散均勻后，將含有米托蒽醌藥物的氯化鈣水溶液加入到相應(yīng)的有機(jī)相(氯化鈣水溶液與有機(jī)相體積比為I : 50 I : 200)中，超聲均勻，組成A乳液，備用。
3)取與含有米托蒽醌藥物的氯化鈣水溶液相同體積的磷酸氫二鈉水溶液，將其加入到相應(yīng)的有機(jī)相中，有機(jī)相的量與步驟2)取的有機(jī)相相同，超聲均勻，組成B乳液，備用。4)在磁子攪拌的條件下，將B乳液緩慢加入A乳液中，加入后，攪拌O. 5 2小時(shí)。5)將步驟四中的混合溶液加入乙醇中破乳，然后離心，最后將樣品自然烘干。注其中有機(jī)相由己醇，表面活性劑triton X-100和環(huán)己烷按照體積比I : I : 2 組成。整個(gè)制備過(guò)程簡(jiǎn)單快捷，制備周期最長(zhǎng)為三個(gè)小時(shí)，產(chǎn)率高。所制備的米托蒽醌納米磷酸氫鈣粒徑在40到100納米之間，粒徑分布均勻。本發(fā)明同傳統(tǒng)的乳化法制備納米粒子的優(yōu)勢(shì)在于I、采用本工藝制備米托蒽醌納米磷酸氫鈣制劑，制備過(guò)程極其簡(jiǎn)單。通過(guò)將氯化鈣和磷酸氫二鈉分別同有機(jī)相形成乳液，然后將兩種乳液混合均勻的方法，可以大大提高乳液中乳滴的穩(wěn)定性，制備的粒子粒徑較傳統(tǒng)的乳化法更均勻，因而使用更為安全有效。2、所制備的磷酸氫鈣具有優(yōu)良的生物相容性和生物可降解性。磷酸氫鈣可作補(bǔ)鈣劑被人們服用，具有安全可靠的性能，并且在腫瘤組織的酸性條件下，磷酸氫鈣能夠迅速降解來(lái)釋放出包埋的藥物，從而提高治療效果。因此，與現(xiàn)有的米托蒽醌藥物制劑相比，本發(fā)明涉及的米托蒽醌納米磷酸氫鈣制劑具有制備工藝簡(jiǎn)單，載藥率高等特點(diǎn)，制劑粒徑在40到150納米之間，載藥率在20%到 40%。有望有效降低米托蒽醌的毒副作用，故對(duì)癌癥的治療具有極其重要的研究?jī)r(jià)值。


圖I :按照以前方法制備的米托蒽醌納米磷酸氫鈣制劑的掃描電鏡照片。圖2 :按照實(shí)施例3制備的米托蒽醌納米磷酸氫鈣制劑的掃描電鏡照片。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的說(shuō)明。實(shí)施例I :I)分別配置100毫摩爾每升的氯化鈣和磷酸氫二鈉水溶液，備用。2)取O. I毫升的氯化鈣加入相應(yīng)的米托蒽醌(氯化鈣與米托蒽醌摩爾比為 5 I)，超聲分散均勻后，將含有米托蒽醌藥物的氯化鈣水溶液加入到5毫升有機(jī)相中，超聲均勻，組成A乳液，備用。3)取與含有米托蒽醌藥物的氯化鈣水溶液相同體積的磷酸氫二鈉水溶液，將其加入到5毫升有機(jī)相中，超聲均勻，組成B乳液，備用。4)在磁子攪拌的條件下，將B乳液緩慢加入A乳液中，加入后，攪拌2小時(shí)。5)將步驟四中的混合溶液加入乙醇中破乳，然后離心，最后將樣品自然烘干。實(shí)施例2 I)分別配置200毫摩爾每升的氯化鈣和磷酸氫二鈉水溶液，備用。2)取O. 2毫升的氯化鈣加入相應(yīng)的米托蒽醌(氯化鈣與米托蒽醌摩爾比為 5 I)，超聲分散均勻后，將含有米托蒽醌藥物的氯化鈣水溶液加入到5毫升有機(jī)相中，超聲均勻，組成A乳液，備用。
3)取與含有米托蒽醌藥物的氯化鈣水溶液相同體積的磷酸氫二鈉水溶液，將其加入到5毫升有機(jī)相中，超聲均勻，組成B乳液，備用。4)在磁子攪拌的條件下，將B乳液緩慢加入A乳液中，加入后，攪拌2小時(shí)。5)將步驟四中的混合溶液加入乙醇中破乳，然后離心，最后將樣品自然烘干。實(shí)施例3 I)分別配置300毫摩爾每升的氯化鈣和磷酸氫二鈉水溶液，備用。2)取O. 3毫升的氯化鈣加入相應(yīng)的米托蒽醌(氯化鈣與米托蒽醌摩爾比為 3 1)，超聲分散均勻后，將含有米托蒽醌藥物的氯化鈣水溶液加入到10毫升有機(jī)相中，超聲均勻，組成A乳液，備用。3)取與含有米托蒽醌藥物的氯化鈣水溶液相同體積的磷酸氫二鈉水溶液，將其加入到10毫升有機(jī)相中，超聲均勻，組成B乳液，備用。4)在磁子攪拌的條件下，將B乳液緩慢加入A乳液中，加入后，攪拌I小時(shí)。5)將步驟四中的混合溶液加入乙醇中破乳，然后離心，最后將樣品自然烘干。制備的樣品如圖2所示，與現(xiàn)有技術(shù)生產(chǎn)的圖I相比，粒徑更加均勻可控，均在100 納米以下。實(shí)施例4 I)分別配置450毫摩爾每升的氯化鈣和磷酸氫二鈉水溶液，備用。2)取O. 3毫升的氯化鈣加入相應(yīng)的米托蒽醌(氯化鈣與米托蒽醌摩爾比為 3 1)，超聲分散均勻后，將含有米托蒽醌藥物的氯化鈣水溶液加入到10毫升有機(jī)相中，超聲均勻，組成A乳液，備用。3)取與含有米托蒽醌藥物的氯化鈣水溶液相同體積的磷酸氫二鈉水溶液，將其加入到10毫升有機(jī)相中，超聲均勻，組成B乳液，備用。4)在磁子攪拌的條件下，將B乳液緩慢加入A乳液中，加入后，攪拌I小時(shí)。5)將步驟四中的混合溶液加入乙醇中破乳，然后離心，最后將樣品自然烘干。實(shí)施例5 I)分別配置600毫摩爾每升的氯化鈣和磷酸氫二鈉水溶液，備用。2)取O. 5毫升的氯化鈣加入相應(yīng)的米托蒽醌(氯化鈣與米托蒽醌摩爾比為 3 1)，超聲分散均勻后，將含有米托蒽醌藥物的氯化鈣水溶液加入到10毫升有機(jī)相中，超聲均勻，組成A乳液，備用。3)取與含有米托蒽醌藥物的氯化鈣水溶液相同體積的磷酸氫二鈉水溶液，將其加入到10毫升有機(jī)相中，超聲均勻，組成B乳液，備用。4)在磁子攪拌的條件下，將B乳液緩慢加入A乳液中，加入后，攪拌O. 5小時(shí)。5)將步驟四中的混合溶液加入乙醇中破乳，然后離心，最后將樣品自然烘干。實(shí)施例6 I)分別配置750毫摩爾每升的氯化鈣和磷酸氫二鈉水溶液，備用。2)取O. 5毫升的氯化鈣加入相應(yīng)的米托蒽醌(氯化鈣與米托蒽醌摩爾比為 3 1)，超聲分散均勻后，將含有米托蒽醌藥物的氯化鈣水溶液加入到20毫升有機(jī)相中，超聲均勻，組成A乳液，備用。3)取與含有米托蒽醌藥物的氯化鈣水溶液相同體積的磷酸氫二鈉水溶液，將其加入到20毫升有機(jī)相中，超聲均勻，組成B乳液，備用。4)在磁子攪拌的條件下，將B乳液緩慢加入A乳液中，加入后，攪拌O. 5小時(shí)。5)將步驟四中的混合溶液加入乙醇中破乳，然后離心，最后將樣品自然烘干。實(shí)施例7:I)分別配置900毫摩爾每升的氯化鈣和磷酸氫二鈉水溶液，備用。2)取O. 5毫升的氯化鈣加入相應(yīng)的米托蒽醌(氯化鈣與米托蒽醌摩爾比為 5 1)，超聲分散均勻后，將含有米托蒽醌藥物的氯化鈣水溶液加入到20毫升有機(jī)相中，超聲均勻，組成A乳液，備用。3)取與含有米托蒽醌藥物的氯化鈣水溶液相同體積的磷酸氫二鈉水溶液，將其加入到20毫升有機(jī)相中，超聲均勻，組成B乳液，備用。4)在磁子攪拌的條件下，將B乳液緩慢加入A乳液中，加入后，攪拌O. 5小時(shí)。5)將步驟四中的混合溶液加入乙醇中破乳，然后離心，最后將樣品自然烘干。實(shí)施例8 形態(tài)觀察、粒徑及其分布測(cè)定。取樣品溶液經(jīng)超速離心分離后，取出沉淀物，加蒸餾水少量使分散，滴于碳支持膜上制樣，在透射電鏡下觀察其形貌狀態(tài)并拍照，結(jié)果如圖2所述取制備的微乳樣品適量，稀釋，然后用粒徑測(cè)定儀測(cè)定微乳粒徑及分布。透射電鏡下觀察到米托蒽醌納米磷酸鈣微乳液呈均勻規(guī)則的球形粒子。實(shí)驗(yàn)測(cè)得的米托蒽醌納米磷酸鈣微乳粒徑在40_100nm范圍內(nèi)均勻分布。實(shí)施例9 載藥量的測(cè)定取上清液，加入一定量的Hcl，使藥物釋放出來(lái)，測(cè)定阿霉素的吸光度A，由藥物濃
度和吸光度的關(guān)系的出來(lái)藥物的濃度從而求出鹽酸米諾環(huán)素的含量，則
#7 里· ,。/、微乳種藥物含量ιΛΛ()/
■里(%)= 題 Xl_本實(shí)驗(yàn)的載藥量計(jì)算如下所示所取得納米碳酸鈣粒子的量0. 8-lmg,吸光值X為O. 272-0. 288，藥物濃度計(jì)算公式為y = O. 2192X+0. 004 計(jì)算的藥物濃度為 O. 06362-0. 06713mg/ml藥物總質(zhì)量0·1909-0. 2014。
權(quán)利要求
1.一種米托蒽醌納米磷酸氫鈣制劑的制備方法，步驟如下1)分別配置100 900毫摩爾每升的氯化鈣和磷酸氫二鈉水溶液，備用；2)取氯化鈣水溶液加入米托蒽醌，氯化鈣與米托蒽醌摩爾比為5: I I : 1，超聲分散均勻后，將含有米托蒽醌的氯化鈣水溶液加入到有機(jī)相中，氯化鈣水溶液與有機(jī)相體積比為I : 50 I : 200，超聲均勻，組成A乳液，備用；3)取與含有米托蒽醌的氯化鈣水溶液相同體積的磷酸氫二鈉水溶液，將其加入到有機(jī)相中，有機(jī)相的量與步驟2)取的有機(jī)相相同，超聲均勻，組成B乳液，備用；4)在磁子攪拌的條件下，將B乳液緩慢加入A乳液中，加入后，攪拌O.5 2小時(shí)；5)將步驟四中的混合溶液加入到乙醇中破乳，然后離心并用乙醇洗滌，最后將樣品自然烘干；上述有機(jī)相由己醇，表面活性劑triton X-100和環(huán)己烷按照體積比I : I : 2。
2.權(quán)利要求I的米托蒽醌納米磷酸氫鈣制劑，其特征是制劑粒徑在40到150納米之間，載藥率在20%到40%。
全文摘要
本發(fā)明涉及米托蒽醌納米磷酸氫鈣制劑及其制備方法。取氯化鈣水溶液加入米托蒽醌，氯化鈣與米托蒽醌摩爾比為5∶1～1∶1，超聲分散均勻后，將含有米托蒽醌的氯化鈣水溶液加入到有機(jī)相中，氯化鈣水溶液與有機(jī)相體積比為1∶50～1∶200，超聲均勻，組成A乳液；取與含有米托蒽醌的氯化鈣水溶液相同體積的磷酸氫二鈉水溶液，將其加入到有機(jī)相中、超聲均勻，組成B乳液；在磁子攪拌的條件下，將B乳液緩慢加入A乳液中，加入后，攪拌0.5～2小時(shí)；混合溶液加入到乙醇中破乳，然后離心并用乙醇洗滌，最后將樣品自然烘干；采用本發(fā)明制備米托蒽醌納米磷酸氫鈣制劑，制備工藝簡(jiǎn)單，制劑粒徑在40到150納米之間，載藥率在20％到40％。
文檔編號(hào)A61K9/14GK102579355SQ20121007379
公開(kāi)日2012年7月18日 申請(qǐng)日期2012年3月19日 優(yōu)先權(quán)日2012年3月19日
發(fā)明者常津, 王小敏, 王漢杰, 王生 申請(qǐng)人:天津大學(xué)