專利名稱：墨旱蓮多糖鐵絡合物制備方法及其應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥，特別是一種墨旱蓮多糖鐵絡合物制備方法及應用。
背景技術：
生物大分子與微量元素金屬離子在一定條件下反應形成的生物大分子金屬絡合物顯示出特異的生物活性，如氨基酸、核酸金屬絡合物。氨基酸金屬絡合物作飼料添加劑已有專利。如氨基酸與銅絡合物(波蘭格旦斯克大學Kaczmarek等人)，甘氨酸和三價鐵離子形成的絡合物(美國懷俄明州大學化學系Devore EC等人)。德國公開專利號為2209616 的藥用半胱氨酸和鋅形成的絡合物作為補鋅劑，該方法是把氧化鋅水溶液加入到半胱氨酸溶液中，用NaOH溶液調節(jié)pH而形成絡合物。又如美國專利號為3821192的說明書中公開了一種用葡萄糖、麥芽糖、低分子右旋糖苷與三氯化鐵反應形成糖鐵絡合物，其制備方法用三價鐵離子的水溶液與右旋糖苷溶液混合，并加入堿溶液直到三氯化鐵完全沉淀，此時PH低于7，經(jīng)攪拌加入堿使pH上升到 11以上溶液呈均一狀態(tài)為止，反應過程中溫度保持在80°C，不要超過95°C。為了使糖鐵絡合物充分沉淀出來要加入醇類溶液，經(jīng)離心分離、干燥、粉碎成所需顆粒。從上述專利文獻描述的產物是用氨基酸、葡萄糖、麥芽糖經(jīng)與金屬離子加熱反應，整個過程均需保持較高的反應溫度，而且制備出的絡合物作用單一，只用于治療仔豬缺鐵性貧血。墨旱蓮為菊科植物鱧腸的全草，因為搓揉它的莖葉時，可見黑色的汁液流出，所以又叫“墨旱蓮”。莖園柱形，綠褐色或帶紫紅色，有縱棱。葉對生，近無柄，線狀矩圓形至披針形，全緣或稍具齒，基部楔形，先端短尖或鈍，兩面密被白色粗毛，浸水后搓揉莖葉呈黑色。 花序頭狀，具有滋補肝腎，涼血止血的功效，用于牙齒松動、須發(fā)早白、眩暈耳鳴、腰膝酸、陰虛血熱、吐血、血衄、尿血、血痢、崩漏下血、外傷出血，但作為墨旱蓮多糖鐵絡合物的制備及應用至今未見有公開報道。

發(fā)明內容
針對上述情況，為克服現(xiàn)有技術的缺陷，本發(fā)明的目的就是提供一種墨旱蓮多糖鐵絡合物制備方法及應用，可有效解決墨旱蓮多糖鐵絡合物的制備，并有效用于食品添加劑和提高機體免疫力以及制備治療缺鐵性貧血的藥物中的問題。本發(fā)明解決的技術方案是，將干燥的墨旱蓮粉加蒸餾水溫浸、過濾，得墨旱蓮多糖溶液；在墨旱蓮多糖溶液中加入NaOH離子溶液調pH值，再加入檸檬酸三鈉及!^Cl3,邊滴加邊攪拌，同時由NaOH溶液調pH為8-10，當反應液中出現(xiàn)紅色不溶物質時，立即停止滴加 FeCl3溶液和NaOH溶液，離心除去沉淀，得墨旱蓮多糖鐵絡合物溶液；然后進行透析、醇沉， 得沉淀物，對沉淀物進行洗滌，得墨旱蓮多糖鐵絡合物，有效作為食品添加劑或制備藥物用。本發(fā)明的墨旱蓮多糖鐵絡合物是利用中藥材墨旱蓮為原料，在不需加壓的條件下，在水溶液中絡合反應快速獲得該產物。該產物作為食品添加劑或醫(yī)藥用，能夠有效提高機體免疫和治療缺鐵性貧血有著實用價值。以天然中藥材為原料，可以確保所生產的墨旱蓮多糖鐵絡合物無毒無副作用，另外生產方法簡單，易于大規(guī)模生產。本發(fā)明的墨旱蓮多糖鐵絡合物可做食品添加劑，也可以藥用，它是一種預防和治療缺鐵性貧血的藥物，還可以有效提高機體的免疫力。
具體實施例方式以下結合具體情況，對本發(fā)明的具體實施方式
作詳細說明。本發(fā)明在具體實施中是由以下步驟實現(xiàn)的①將干燥的墨旱蓮粉加入蒸餾水或飲用水中，墨旱蓮粉與蒸餾水或飲用水的重量比為 1 10-25(具體還可采用 1 12，1 14，1 16，1 18，1 20，1 22，1 24 的重量比)，60-95°C (具體還可采用 65°C，70°C，75°C，8(TC，85°C，9(rC )溫浸 1-3 次，每次 2-6h (根據(jù)溫度的高低和墨旱蓮粉數(shù)量的多少，具體還可采用池，4h，5h,原則是溫度越高， 物料少，浸泡的時間越短，反之亦然)，過濾后得墨旱蓮多糖溶液；②將!^eCl3加入水中，配制成濃度為211101/1的!^(13離子溶液；將NaOH加入水中， 配制成濃度為2mol/L的NaOH離子溶液；③在步驟①制備的墨旱蓮多糖溶液中逐滴加入濃度為2mol/L的NaOH離子溶液至 PH值為8-10，每IOOg干燥的墨旱蓮制成的墨旱蓮多糖溶液中加入檸檬酸三鈉0. 5-5g，攪拌溶解，60-80°C水浴下逐滴加入濃度為2mol/L的FeCl3溶液，邊滴加邊攪拌，同時滴加濃度為2mol/L的NaOH溶液保持pH為8_10，進行絡合反應，當反應液中出現(xiàn)紅色不溶物質時，立即停止滴加FeCl3溶液和NaOH溶液，離心除去沉淀，得墨旱蓮多糖鐵絡合物溶液；④對墨旱蓮多糖鐵絡合物溶液裝入透析袋進行透析，透析袋的截留分子量為 8000-14000，透析液加入質量濃度為95%的乙醇至乙醇含量達到80%，靜置10-1 過夜， 棄去上清液，得沉淀物，先用無水乙醇將沉淀物洗至上清液無色，再用丙酮和乙醚各洗滌一次，得墨旱蓮多糖鐵絡合物。必要時，根據(jù)需要，將墨旱蓮多糖鐵絡合物粉碎制成所需的顆粒。本發(fā)明制備方法穩(wěn)定可靠，并經(jīng)多次(12次以上)實驗得到了相同或相近似的結果，而且所制備的墨旱蓮多糖鐵絡合物經(jīng)試驗取得了突出的有益技術效果，有關實驗資料如下以低鐵飼料輔以少量放血，快速建立缺鐵性貧血的大鼠模型。實驗組灌服墨旱蓮多糖鐵絡合物，對照組灌服與墨旱蓮多糖鐵絡合物溶液濃度相當?shù)牧蛩醽嗚F溶液。1.墨旱蓮多糖鐵絡合物提高缺鐵性貧血大鼠免疫力的實驗健康SPF級雄性SD大鼠共50只，4周齡，體重100士20g血紅蛋白(Hb)彡IlOg/ L。大鼠用不銹鋼籠子及器皿使其生活在無鐵環(huán)境，并嚴防外來鐵污染及彼此間的交叉污染。設空白對照組(10只)，將造模組大鼠按體重隨機分為4組，分別為①低劑量治療組， 每天每只大鼠給藥量為20mg/Kg。②中劑量治療組，每天每只大鼠給藥量為40mg/Kg。③高劑量治療組，每天每只大鼠給藥量為60mg/Kg。④模型對照組，不予給藥。每6天眼眶靜脈采血測血常規(guī)、Si、紅細胞免疫相關指標。各組大鼠紅細胞免疫功能的情況比較見表1，中、高劑量的墨旱蓮多糖鐵絡合物能顯著提升貧血大鼠體內 RBC-C3bR(P < 0. 05)，各劑量墨旱蓮多糖鐵絡合物均能有效降低RBC-IcR(P < 0. 01)，說明其能改善紅細胞免疫功能。表1墨旱蓮多糖鐵絡合物對IDA大鼠紅細胞免疫功能的影響
RBC-C3bR (%)RBC-IcR (%)
治療前治療后P治療前治療后P
空白對照組 13 3127±4.1632.56±1338> 0. 0520.92±10581794±6. 51> 0. 05模型對照組 13 31.06 ±13853115±9.74> 0. 053524±3.533228±4. 31> 0. 05低劑量治療組 13 2531±9.592082 ±9.14> 0. 0536.97±10161253±5. 88< 0. 01中劑量治療組 13 2261±7.123238 ±9.80< 0. 053482±5.371767 ±8. 40< 0. 01高劑量治療組 13 25.38±101139.62±1189< 0. 014873±8.2614.39±13. 27< 0. 01上述藥理實驗結果表明，本發(fā)明所制得的墨旱蓮多糖鐵絡合物能使貧血大鼠紅細胞C3bR受體逐漸恢復活性，使其RBC-IcR逐漸降低，較自然恢復的程度更為明顯，且通過短期的治療即有顯著的效果。墨旱蓮多糖鐵絡合物對IDA大鼠紅細胞免疫力的提高具有顯著效果。2.墨旱蓮多糖鐵絡合物用藥后的鐵代謝實驗按照墨旱蓮多糖鐵絡合物提高免疫的藥理實驗的方法，取健康SPF級雄性SD大鼠共30只，4周齡，體重100士20g血紅蛋白(Hb)彡110g/L。大鼠用不銹鋼籠子及器皿使其生活在無鐵環(huán)境，并嚴防外來鐵污染及彼此間的交叉污染，造IDA大鼠模型。將IDA大鼠模型隨機分成兩組，分別為①墨旱蓮多糖鐵絡合物組②硫酸亞鐵組。每6天眼眶靜脈采血測 Hb值、血清鐵、血清鐵蛋白，結果見表2.表2墨旱蓮多糖鐵絡合物的代謝情況
墨旱蓮多糖鐵絡合物組(n=15)^硫酸亞鐵組(11=15)^ 組間比較
-Pl值 -P2值
評價指標治療前_治療后_治療前_治療后_P值
91.6±12. 75 189. 6±13. 92 <0.001 94. 2±10. 55 138. 8±12. 71 <0.05 <0.01 5. 33±1. 14 24. 62±1. 38 <0.001 6. 87±1.46 15. 16±1.57 <0.05 <0.01
8. 2±5. 24 11. 5±6. 16 <0.05 9. 0±4. 8611. 2±6. 17 <0.05 <0.05實驗大鼠對墨旱蓮多糖鐵絡合物的吸收顯著優(yōu)于硫酸亞鐵組。墨旱蓮多糖鐵絡合物是較好的補鐵藥物。3.墨旱蓮多糖鐵絡合物毒性實驗NIH系小鼠(體重20_30g) 20只，雌雄混合，分二組，一組為對照組，一組為墨旱蓮多糖鐵絡合物實驗組，兩組所用飼料相同，以4. 5g/Kg的劑量給實驗組小鼠灌服墨旱蓮多糖鐵絡合物(自制)。灌胃15天，無一死亡。觀察其外觀行為無異常，將小鼠處死，觀察內臟無異常，并將其心、肝、腎做成石蠟切片，在顯微鏡下進行鏡檢，結果未發(fā)現(xiàn)任何異常。僅算出口服最大耐受量為10. 4g · Kg-1KD5tlKg-1,屬無毒物質。4.作為食品添加劑的實驗經(jīng)在餅干、饅頭等食品中添加總原料重量的0. 01-0. 05%的墨旱蓮多糖鐵絡合物， 每天食用1-2次，經(jīng)對食用者500人一年內統(tǒng)計，患感冒者僅31人，而未服用以本發(fā)明產品作為添加劑的食品的500人中，患感冒者163人，遠遠高于食用添加劑的患者，患感冒是身
Hb(g/L)
血清鐵(μ mol/L) SI 鐵蛋白 (ng/ml)體免疫力低下的具體表現(xiàn)，表明本發(fā)明的墨旱蓮多糖鐵絡合物可有效提高人體免疫力，防止疾病的發(fā)生。 總之，實驗結果表明，本發(fā)明方法簡單，穩(wěn)定可靠，易操作，成本低，所制備的墨旱蓮多糖鐵絡合物用途廣，不但可有效用于制備治療疾病用的藥物中，而且還可在食品中作添加劑使用，提高人體免疫力。
權利要求
1.一種墨旱蓮多糖鐵絡合物制備方法，其特征在于，由以下步驟實現(xiàn)①將干燥的墨旱蓮粉加入蒸餾水或飲用水中，墨旱蓮粉與蒸餾水或飲用水的重量比為 1 10-25，60-95°C溫浸1_3次，每次2_6h，過濾后得墨旱蓮多糖溶液；②將!^Cl3加入水中，配制成濃度為2mol/L的!^Cl3離子溶液；將NaOH加入水中，配制成濃度為2mol/L的NaOH離子溶液；③在步驟①制備的墨旱蓮多糖溶液中逐滴加入濃度為2mol/L的NaOH離子溶液至pH 值為8-10，每IOOg干燥的墨旱蓮制成的墨旱蓮多糖溶液中加入檸檬酸三鈉0. 5-5g，攪拌溶解，60-80°C水浴下逐滴加入濃度為2mol/L的FeCl3溶液，邊滴加邊攪拌，同時滴加濃度為 2mol/L的NaOH溶液保持pH為8-10，進行絡合反應，當反應液中出現(xiàn)紅色不溶物質時，立即停止滴加FeCl3溶液和NaOH溶液，離心除去沉淀，得墨旱蓮多糖鐵絡合物溶液；④對墨旱蓮多糖鐵絡合物溶液裝入透析袋進行透析，透析袋的截留分子量為 8000-14000，透析液加入質量濃度為95%的乙醇至乙醇含量達到80%，靜置10-1 過夜， 棄去上清液，得沉淀物，先用無水乙醇將沉淀物洗至上清液無色，再用丙酮和乙醚各洗滌一次，得墨旱蓮多糖鐵絡合物。
2.一種墨旱蓮多糖鐵絡合物在制備防治缺鐵性貧血藥物中的應用。
3.—種墨旱蓮多糖鐵絡合物在制備提高機體免疫力藥物中的應用。
4.一種墨旱蓮多糖鐵絡合物在制備食品添加劑中的應用。
全文摘要
本發(fā)明涉及墨旱蓮多糖鐵絡合物制備方法及應用，可有效解決墨旱蓮多糖鐵絡合物的制備，并有效用于食品添加劑和提高機體免疫力以及制備治療缺鐵性貧血的藥物中的問題，其解決的技術方案是，將干燥的墨旱蓮粉加蒸餾水溫浸、過濾，得墨旱蓮多糖溶液；在墨旱蓮多糖溶液中加入NaOH離子溶液調pH值，再加入檸檬酸三鈉及FeCl3，邊滴加邊攪拌，同時由NaOH溶液調pH為8-10，當反應液中出現(xiàn)紅色不溶物質時，立即停止滴加FeCl3溶液和NaOH溶液，離心除去沉淀，得墨旱蓮多糖鐵絡合物溶液；然后進行透析、醇沉，得沉淀物，對沉淀物進行洗滌，得墨旱蓮多糖鐵絡合物，本發(fā)明可做食品添加劑，也可以藥用，是預防和治療缺鐵性貧血的藥物，還可以提高機體的免疫力。
文檔編號A61P37/04GK102268098SQ201110191988
公開日2011年12月7日 申請日期2011年7月8日 優(yōu)先權日2011年7月8日
發(fā)明者劉富崗, 楊云 申請人:河南中醫(yī)學院