專利名稱：一種具有促進(jìn)骨折愈合作用的中藥提取物的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一組中藥提取物的制備方法，特別涉及一組具有促進(jìn)骨折愈合作用的中藥提取物的制備方法。
背景技術(shù)：
海南九節(jié)I3Sychotria hainanensis為茜草科植物，又名山大刀、青龍吐珠，為長(zhǎng)綠性灌木，耐陰性極強(qiáng)，喜溫暖多濕陽(yáng)光的環(huán)境。根葉用藥，味苦、澀，性涼，有清熱解毒、消腫拔毒、祛風(fēng)除濕、活血止痛之效，主治感冒、白喉、痢疾、跌打損傷和無(wú)名腫痛等。國(guó)外的學(xué)者從茜草科九節(jié)屬植物I^syehotriaforstcrianaA. Gray.中分離出了多聚假吲哚生物堿(九節(jié)屬植物中多聚假吲哚生物堿與核苷酸之間的相互作用[J].國(guó)外醫(yī)藥植物藥分冊(cè)，1990， 5(5) :230-231.)。在我國(guó)海南島，黎族人民用其莖和葉治療骨折、跌打損傷。草海桐為草海桐科植物草海桐kaevola scricea Vahl.，生長(zhǎng)于海邊，通常在海邊沙地上或海岸峭壁上。在臺(tái)灣、福建、廣東、廣西等省區(qū)均有分布，在海南島主產(chǎn)于文昌、 昌江、東方等地。其莖、葉用藥，黎族地區(qū)用其莖和葉治療骨髓炎。落地生根，別名土三七，打不死，為景天科植物落地生根Bryophyllum pirmatum(L.f.)0ken。根及全株入藥，味苦、酸，性寒。具有止血涼血，清熱解毒的作用，主治吐血，外傷出血，跌打損傷，疔瘡癰腫，乳痛，丹毒，潰瘍，燙傷，胃痛，關(guān)節(jié)痛，咽喉痛，肺熱咳嗽等癥。近代藥理研究表明，落地生根葉的甲醇提取物對(duì)多種細(xì)菌的生長(zhǎng)具有抑制作用， 水提物具有鎮(zhèn)痛、抗炎、抗糖尿病等活性。在海南島黎族地區(qū)用其全株治療骨折、跌打損傷。 目前對(duì)以上三種黎藥提取物促進(jìn)骨折愈合作用的實(shí)驗(yàn)研究還未見報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種具有促進(jìn)骨折愈合作用的中藥提取物的制備方法。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案為提供一種具有促進(jìn)骨折愈合作用的中藥提取物的制備方法，其特征在于如下步驟(1)、將海南九節(jié)葉或草海桐或落地生根藥材粉碎，保存?zhèn)溆?，藥材粉末目?shù)為 10 60目；O)、將步驟(1)得到的藥材粉末用蒸餾水進(jìn)行提取，過濾藥渣，合并濾液，濃縮， 得到藥材蒸餾水提取濃縮液，干燥，計(jì)算提取率；其中提取次數(shù)為1 10次，每次提取時(shí)間為1 10小時(shí)，提取溶劑與藥材的物料比(mL/g)為1 1 30 1，干燥方式包括水浴蒸干，減壓干燥和真空凍干；(3)、將步驟O)中的藥渣曬干，用乙醇進(jìn)行二次提取，過濾藥渣，合并濾液，回收溶劑，得到藥材乙醇提取濃縮液，干燥，計(jì)算提取率；其中乙醇提取的方式包括回流提取，索式提取和超生提取；乙醇濃度為30% 95%，優(yōu)選95% ；提取次數(shù)為1 10次，每次提取時(shí)間為1 15小時(shí)，藥材濃縮液的干燥方式包括水浴蒸干，減壓干燥和真空凍干，藥材濃縮液真空凍干的時(shí)間包括0 72小時(shí)。
較佳地，所述步驟O)中，藥材粉末用蒸餾水進(jìn)行提取次數(shù)優(yōu)選為3次，第一次2 小時(shí)，第二次15.小時(shí)，第三次1小時(shí)。較佳地，所述步驟O)中，藥材粉末用蒸餾水進(jìn)行提取，提取提取溶劑與藥材的物料比(mL/g)優(yōu)選為15 I0較佳地，所述步驟O)中藥材濃縮液的干燥方式優(yōu)選真空凍干方式，藥材濃縮液真空凍干的時(shí)間優(yōu)選為M小時(shí)。較佳地，所述步驟(3)中的乙醇提取的方式優(yōu)選為回流提取，提取次數(shù)優(yōu)選為2 次，第一次提取時(shí)間優(yōu)選為2小時(shí)，第二次提取時(shí)間優(yōu)選為1. 5小時(shí)。較佳地，所述步驟(3)中藥材濃縮液的干燥方式優(yōu)選為真空凍干方式，藥材濃縮液真空凍干的時(shí)間包括優(yōu)選為M小時(shí)。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合優(yōu)選實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明，但本發(fā)明決不限于下述實(shí)施例。實(shí)施例1海南九節(jié)葉提取物的制備海南九節(jié)葉粉碎，過60目篩，保存?zhèn)溆谩?一 )海南九節(jié)葉蒸餾水提取試驗(yàn)1、提取次數(shù)的篩選設(shè)定提取溶劑與藥材的物料比(mL/g)為15 1，每次提取 2. 5h，分別提取1、2、3、4、5次，以確定合適的提取次數(shù)。2、提取時(shí)間的篩選設(shè)定提取次數(shù)為3次，提取溶劑與藥材的物料比(mL/g)為 15 1，在此條件下，每一次分別提取0. 5h、2. 5h、3. 5h、5h、7. 5h，10h，以確定每一次合適的提取時(shí)間。3、提取溶劑與藥材的物料比(mL/g)的篩選設(shè)定提取次數(shù)為3次，提取時(shí)間3 次分別為2.0h、ljh、1.0h，在此條件下，將提取溶劑與藥材的物料比分別設(shè)定為1 1、 5 UlO 1、15 1,20 1,30 1進(jìn)行試驗(yàn)，以確定合適的提取溶劑與藥材的物料比。4、藥材濃縮液液干燥方式的篩選對(duì)經(jīng)提取濃縮得到的藥材濃縮液進(jìn)行干燥，分別采取水浴蒸干，減壓干燥和真空凍干的方式進(jìn)行，以確定合適的干燥方式。5、真空干燥時(shí)間的確定采取真空凍干的方式對(duì)提取濃縮得到的藥材濃縮液進(jìn)行干燥，分別干燥5h、10h、15h、Mh、48h、72h，以確定合適的干燥時(shí)間。( 二)海南九節(jié)葉蒸餾水提取后藥渣的乙醇提取試驗(yàn)1、乙醇提取方式的篩選海南九節(jié)葉經(jīng)蒸餾水提取后的藥渣曬干，采用95%乙醇分別進(jìn)行回流提取、超聲提取和索式提取，以確定合適的提取方式。2、乙醇濃度的篩選海南九節(jié)葉經(jīng)蒸餾水提取后的藥渣曬干，分別采用30%、 60%,70%,80%,95%乙醇進(jìn)行回流提取，以確定合適的提取用乙醇濃度。3、提取次數(shù)的篩選海南九節(jié)葉經(jīng)蒸餾水提取后的藥渣曬干，采取95%乙醇回流提取法式進(jìn)行提取，分別提取1、2、3、4、5次，以確定合適的提取次數(shù)。4提取時(shí)間的篩選海南九節(jié)葉經(jīng)蒸餾水提取后的藥渣曬干，采取95%乙醇回流提取法式進(jìn)行提取，提取次數(shù)為2次，每一次分別提取0. 5h、2. 5h、3. 5h,5h,7. 5h，IOh,以確定每一次合適的提取時(shí)間。5 藥材濃縮液液干燥方式的篩選對(duì)經(jīng)提取濃縮得到的藥材濃縮液進(jìn)行干燥，分別采取水浴蒸干，減壓干燥和真空凍干的方式進(jìn)行，以確定合適的干燥方式。6、真空干燥時(shí)間的確定采取真空凍干的方式對(duì)提取濃縮得到的藥材濃縮液進(jìn)行干燥，分別干燥5h、10h、15h、Mh、48h、72h，以確定合適的干燥時(shí)間。(三)海南九節(jié)葉促進(jìn)骨折愈合提取物的制備稱取海南九節(jié)葉藥材100g，粉碎，過60目篩，加入1500mL蒸餾水浸泡1小時(shí)，然
后進(jìn)行第一次水提取，水提取時(shí)間為2個(gè)小時(shí)，提取完畢，過濾藥渣，收集濾液。藥渣再加入 1500mL蒸餾水進(jìn)行第二次水提取，提取時(shí)間為1.5個(gè)小時(shí)，提取完畢，過濾藥渣，收集濾液。 藥渣再加入1500mL蒸餾水繼續(xù)進(jìn)行第三次水提取，提取時(shí)間為1個(gè)小時(shí)，提取完畢，過濾藥渣，收集濾液。合并三次水提液，濃縮，得到水提濃縮液。水提濃縮液經(jīng)真空凍干對(duì)小時(shí)后， 對(duì)凍干粉末進(jìn)行稱重，計(jì)算提取率。結(jié)果約得到12. 5g干燥粉末，海南九節(jié)葉的蒸餾水提取率約為12.5%。海南九節(jié)葉藥渣經(jīng)蒸餾水提取后自然曬干，進(jìn)行乙醇回流提取。加入約10 倍量95%乙醇進(jìn)行第一次回流提取，提取時(shí)間為2個(gè)小時(shí)，過濾藥渣，收集濾液。藥渣繼續(xù)加入約10倍量95%乙醇進(jìn)行第二次回流提取，提取時(shí)間為1.5個(gè)小時(shí)，過濾藥渣，收集濾液。合并兩次乙醇提取液，回收溶劑，得到海南九節(jié)葉的95%乙醇提取浸膏，真空凍干M小時(shí)，對(duì)凍干粉末進(jìn)行稱重，計(jì)算提取率。結(jié)果約得到3. 7g干燥粉末，海南九節(jié)葉的95%乙醇提取率約為3.7%。實(shí)施例二草海桐提取物的制備稱取草海桐藥材100g，粉碎，過60目篩，加入1500mL蒸餾水浸泡1小時(shí)，然后進(jìn)行第一次水提取，水提取時(shí)間為2個(gè)小時(shí)，提取完畢，過濾藥渣，收集濾液。藥渣再加入1500mL 蒸餾水進(jìn)行第二次水提取，提取時(shí)間為1. 5個(gè)小時(shí)，提取完畢，過濾藥渣，收集濾液。藥渣再加入1500mL蒸餾水繼續(xù)進(jìn)行第三次水提取，提取時(shí)間為1個(gè)小時(shí)，提取完畢，過濾藥渣，收集濾液。合并三次水提液，濃縮，得到水提濃縮液。水提濃縮液經(jīng)真空凍干M小時(shí)后，對(duì)凍干粉末進(jìn)行稱重，計(jì)算提取率。結(jié)果約得到12. 5g干燥粉末，草海桐的蒸餾水提取率約為 12.5%。草海桐藥渣經(jīng)蒸餾水提取后自然曬干，進(jìn)行乙醇回流提取。加入約10倍量95%乙醇進(jìn)行第一次回流提取，提取時(shí)間為2個(gè)小時(shí)，過濾藥渣，收集濾液。藥渣繼續(xù)加入約10倍量95%乙醇進(jìn)行第二次回流提取，提取時(shí)間為1.5個(gè)小時(shí)，過濾藥渣，收集濾液。合并兩次乙醇提取液，回收溶劑，得到草海桐的95%乙醇提取浸膏，真空凍干M小時(shí)，對(duì)凍干粉末進(jìn)行稱重，計(jì)算提取率。結(jié)果約得到3. 7g干燥粉末，草海桐的95%乙醇提取率約為3. %。實(shí)施例三落地生根提取物的制備稱取落地生根藥材100g，粉碎，過60目篩，加入1500mL蒸餾水浸泡1小時(shí)，然后
進(jìn)行第一次水提取，水提取時(shí)間為2個(gè)小時(shí)，提取完畢，過濾藥渣，收集濾液。藥渣再加入 1500mL蒸餾水進(jìn)行第二次水提取，提取時(shí)間為1.5個(gè)小時(shí)，提取完畢，過濾藥渣，收集濾液。 藥渣再加入1500mL蒸餾水繼續(xù)進(jìn)行第三次水提取，提取時(shí)間為1個(gè)小時(shí)，提取完畢，過濾藥渣，收集濾液。合并三次水提液，濃縮，得到水提濃縮液。水提濃縮液經(jīng)真空凍干對(duì)小時(shí)后， 對(duì)凍干粉末進(jìn)行稱重，計(jì)算提取率。結(jié)果約得到12. 5g干燥粉末，落地生根的蒸餾水提取率約為12.5%。落地生根藥渣經(jīng)蒸餾水提取后自然曬干，進(jìn)行乙醇回流提取。加入約10倍量95%乙醇進(jìn)行第一次回流提取，提取時(shí)間為2個(gè)小時(shí)，過濾藥渣，收集濾液。藥渣繼續(xù)加入約10倍量95%乙醇進(jìn)行第二次回流提取，提取時(shí)間為1.5個(gè)小時(shí)，過濾藥渣，收集濾液。 合并兩次乙醇提取液，回收溶劑，得到落地生根的95%乙醇提取浸膏，真空凍干M小時(shí)，對(duì)凍干粉末進(jìn)行稱重，計(jì)算提取率。結(jié)果約得到3. 7g干燥粉末，落地生根的95%乙醇提取率約為3. 7%。 以上所揭露的僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，當(dāng)然不能以此來(lái)限定本發(fā)明之權(quán)利范圍，因此依本發(fā)明權(quán)利要求所作的等同變化，仍屬于本發(fā)明所涵蓋的范圍。
權(quán)利要求
1.一種具有促進(jìn)骨折愈合作用的中藥提取物的制備方法，其特征在于如下步驟(1)、將海南九節(jié)葉或草海桐或落地生根藥材粉碎，保存?zhèn)溆?，藥材粉末目?shù)為10 60目；O)、將步驟(1)得到的藥材粉末用蒸餾水進(jìn)行提取，過濾藥渣，合并濾液，濃縮，得到藥材蒸餾水提取濃縮液，干燥，計(jì)算提取率；其中提取次數(shù)為1 10次，每次提取時(shí)間為 1 10小時(shí)，提取溶劑與藥材的物料比(mL/g)為1 1 30 1，干燥方式包括水浴蒸干， 減壓干燥和真空凍干；(3)、將步驟O)中的藥渣曬干，用乙醇進(jìn)行二次提取，過濾藥渣，合并濾液，回收溶劑， 得到藥材乙醇提取濃縮液，干燥，計(jì)算提取率；其中乙醇提取的方式包括回流提取，索式提取和超生提??；乙醇濃度為30% 95%，優(yōu)選95% ；提取次數(shù)為1 10次，每次提取時(shí)間為1 15小時(shí)，藥材濃縮液的干燥方式包括水浴蒸干，減壓干燥和真空凍干，藥材濃縮液真空凍干的時(shí)間包括0 72小時(shí)。
2.如權(quán)利要求1所述的具有促進(jìn)骨折愈合作用的中藥提取物的制備方法，其特征在于所述步驟O)中，藥材粉末用蒸餾水進(jìn)行提取次數(shù)優(yōu)選為3次，第一次2小時(shí)，第二次 15.小時(shí)，第三次1小時(shí)。
3.如權(quán)利要求1所述的具有促進(jìn)骨折愈合作用的中藥提取物的制備方法，其特征在于所述步驟( 中，藥材粉末用蒸餾水進(jìn)行提取，提取提取溶劑與藥材的物料比(mL/g)優(yōu)選為15 1。
4.如權(quán)利要求1所述的具有促進(jìn)骨折愈合作用的中藥提取物的制備方法，其特征在于所述步驟O)中藥材濃縮液的干燥方式優(yōu)選真空凍干方式，藥材濃縮液真空凍干的時(shí)間優(yōu)選為M小時(shí)。
5.如權(quán)利要求1所述的具有促進(jìn)骨折愈合作用的中藥提取物的制備方法，其特征在于所述步驟(3)中的乙醇提取的方式優(yōu)選為回流提取，提取次數(shù)優(yōu)選為2次，第一次提取時(shí)間優(yōu)選為2小時(shí)，第二次提取時(shí)間優(yōu)選為1. 5小時(shí)。
6.如權(quán)利要求1所述的具有促進(jìn)骨折愈合作用的中藥提取物的制備方法，其特征在于所述步驟(3)中藥材濃縮液的干燥方式優(yōu)選為真空凍干方式，藥材濃縮液真空凍干的時(shí)間包括優(yōu)選為M小時(shí)。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種具有促進(jìn)骨折愈合作用的中藥提取物的制備方法，其特征在與海南九節(jié)葉、草海桐、落地生根藥材粉碎后，首先應(yīng)用蒸餾水進(jìn)行提取，提取溶劑與藥材的物料比按照15∶1進(jìn)行，總共提取3次，每次的提取時(shí)間采用等量遞減的方式進(jìn)行，分別為2小時(shí)、1.5小時(shí)和1小時(shí)。提取完畢，過濾藥渣，收集合并濾液，濃縮，得到藥材的蒸餾水提取濃縮液。藥渣曬干后再應(yīng)用95％乙醇進(jìn)行回流提取，總共提取2次，提取時(shí)間分別為2小時(shí)和1.5小時(shí)。提取完畢，過濾藥渣，收集合并濾液，回收溶劑，得到藥材的95％乙醇提取濃縮液。以上兩種提取濃縮液經(jīng)真空冷凍干燥24小時(shí)后，得到藥材干粉，對(duì)藥材真空干燥后得到的干粉進(jìn)行稱重，分別計(jì)算蒸餾水提取和乙醇提取的提取率。
文檔編號(hào)A61K36/74GK102429973SQ201110384829
公開日2012年5月2日 申請(qǐng)日期2011年11月28日 優(yōu)先權(quán)日2011年11月28日
發(fā)明者仁兆平, 張小坡, 李洪福, 鐘霞, 陳年根, 黃劍 申請(qǐng)人:海南醫(yī)學(xué)院