專(zhuān)利名稱(chēng)：一種胎盤(pán)多肽注射液制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種生物化學(xué)藥品的制備方法，具體涉及一種胎盤(pán)多肽注射液制備方法。
背景技術(shù)：
當(dāng)前市場(chǎng)上的胎盤(pán)制品，如胎盤(pán)組織注射液，主要生產(chǎn)工藝沿襲傳統(tǒng)中藥炮制方法，采用高溫煮沸提取，減壓濃縮等工藝制備，另外，也有企業(yè)使用抗體檢查后的胎盤(pán)作為原料，采用低溫提取工藝制備胎盤(pán)制劑，在乙型肝炎的治療過(guò)程中輔助使用。前者容易做到，將產(chǎn)品中的可能殘留的病毒滅活，從而保障產(chǎn)品的安全，但由于是在高溫下操作，因此，但出現(xiàn)將產(chǎn)品中的活性成分減少或活性降低極低的情況，后者則恰好與前者相反，由于是低溫操作，雖然可以較好的保持產(chǎn)品的活性，以保證其效力，但卻容易出現(xiàn)些病毒不會(huì)被去除或滅活，從而便產(chǎn)品的安全性受到影響的情況。在中藥材制作中的胎盤(pán)叫紫河車(chē)，現(xiàn)介紹如下
紫河車(chē)[異名]胞衣《梅師集驗(yàn)方》，混沌皮、混元丹《本草蒙簽》，胎衣、混沌衣《綱目》。 [基原]為健康人的胎盤(pán)。[藥材]干燥的胎盤(pán)為不規(guī)則的類(lèi)圓形或橢圓形碟狀，直徑9 16厘米，厚薄不一。紫紅色或棕紅色，有的為黃色。一面凹凸不平，有多數(shù)溝紋，為絨毛葉； 一面為羊膜包被，較光滑，在中央或一側(cè)附有臍帶的殘余，四周散布細(xì)血管，每具重50 100克。質(zhì)硬脆，有腥氣，以整齊、黃色或紫紅色、潔凈者為佳。[成分]胎盤(pán)的成分較復(fù)雜。 胎盤(pán)球蛋白制品中含有多種抗體，在臨床上長(zhǎng)期以來(lái)用于被動(dòng)免疫。人胎盤(pán)中還含有干擾素(interferon商品胎盤(pán)球蛋白中也多半含有)，它有抑制多種病毒對(duì)人細(xì)胞的作用，以及含有能抑制流感病毒的巨球蛋白，稱(chēng)β—抑制因子。胎盤(pán)含有與血液凝固有關(guān)的成分，其中有類(lèi)似凝血因子X(jué)III的纖維蛋白穩(wěn)定因子；尿激酶Urokinase)抑制物(能抑制尿激酶活化纖維蛋白溶酶元的作用)和纖維蛋白溶酶元活化物。通常情況下纖維蛋白溶酶元活化物的作用低于抑制物。人胎盤(pán)中含有的激素有促性腺激素A和B、催乳素，促甲狀腺激素、催乳素樣物質(zhì)，多種留體激素如雌酮、雌二醇、雌三醇、孕甾嗣、雄甾酮、去氧皮質(zhì)甾酮、11一去氫皮質(zhì)甾酮(化合物A)、可的松(化合物 E)、17—羥皮質(zhì)留酮(化合物F)等。人胎盤(pán)催乳素與人垂體生長(zhǎng)激素的化學(xué)結(jié)構(gòu)上相關(guān)， 有免疫交叉反應(yīng)，在垂體切除大鼠與生長(zhǎng)激素也有明顯的協(xié)同作用，所以也稱(chēng)催乳素一生長(zhǎng)激素；或謂胎盤(pán)催乳素有生長(zhǎng)激素的作用。人胎盤(pán)的酸性抽提物中還得到較多量的能松馳大鼠十二指腸和降大鼠血壓的成分，其性質(zhì)同前列腺素Ep人胎盤(pán)中含有多種有應(yīng)用價(jià)值的酶，如溶菌酶、激肽酶、組胺酶、催產(chǎn)素酶等。另含紅細(xì)胞生成素、磷脂(其中卵磷脂占45. 5 46. 5%)、多種多糖。[藥理]①抗感染作用胎盤(pán)Y—球蛋白含有麻疹、流感等抗體以及白喉抗毒素等， 可用于預(yù)防或減輕麻疹等傳染病。因系蛋白質(zhì)，故口服無(wú)效，必須注射。胎盤(pán)Y—球蛋白中還含干擾素，臨床上可用于預(yù)防或控制病毒感染。胎盤(pán)中還含有溶菌酶，可防止小鼠(腹腔注射)由腸炎沙門(mén)氏菌、鼠傷寒沙門(mén)氏菌、弗氏痢疾桿菌的內(nèi)毒素引起的死亡；對(duì)內(nèi)毒素對(duì)大鼠的傷害也有一定的保護(hù)作用；但對(duì)大腸桿菌引起的內(nèi)毒素血癥無(wú)作用。②增強(qiáng)機(jī)體抵抗力給小鼠口服胎盤(pán)粉，能減輕其結(jié)核病變，而在試管中反能促進(jìn)結(jié)核桿菌的生長(zhǎng)，故認(rèn)為其作用主要在于增加機(jī)體抵抗力。③激素樣作用，胎盤(pán)在生理上能產(chǎn)生絨毛膜促性腺激素，對(duì)卵巢作用很小，但對(duì)睪丸則有興奮作用；此外，也能產(chǎn)生雌激素及孕激素。胎盤(pán)中可能含有這些激素，因而具有這些激素的藥理作用。絨毛膜促性腺激素是蛋白質(zhì)類(lèi)物質(zhì)，口服無(wú)效，需要注射。④對(duì)血凝的影響胎盤(pán)中含有所謂“尿激酶抑制物”，能抑制尿激酶對(duì)纖維蛋白溶酶元的“活化”作用；此可解釋妊娠時(shí)纖維蛋白溶酶元活性之降低。據(jù)測(cè)定，妊娠時(shí)子宮肌層中纖維蛋白溶酶元活化物與尿激酶抑制物的比例為1:34，而胎中二者之比例則高達(dá) 1:1197。人胎盤(pán)中含有低分子的凝血因子X(jué)III (—種糖蛋白)，因此可用來(lái)治療因XIII凝血因子缺乏的出血患者。此種凝血因子不僅能穩(wěn)定纖維蛋白凝塊、促進(jìn)創(chuàng)傷愈合，在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中還有抗組織胺的作用。(5)其他作用在離體試驗(yàn)中，胎盤(pán)提取物能促進(jìn)受抑制心臟的恢復(fù)。胎盤(pán)蛋白中，含有“腎素樣”的升壓物質(zhì)，在血液循環(huán)的調(diào)節(jié)上，其意義尚待進(jìn)一步闡明。人胎盤(pán)中尚含某種糖蛋白成分，在體外試驗(yàn)中，能抑制淋巴細(xì)胞中DNA的合成，但不影響細(xì)胞的活力。胎盤(pán)提取物大量時(shí)能抑制去氧麻黃堿引起的發(fā)熱等等多種作用。功用主治補(bǔ)氣，養(yǎng)血，益精。治虛損，贏瘦，勞熱骨蒸、咳喘，咯血，盜汗，遺精， 陽(yáng)痿，婦女血?dú)獠蛔悖辉谢蛉樯佟?b>臨床報(bào)道①治療支氣管哮喘②治療慢性氣管炎用新鮮胎盤(pán)制成20%蒸餾液，每日肌注1次，每次2毫升，10天為一個(gè)療程6治療久病體弱、經(jīng)過(guò)其他方法治療不效而反復(fù)發(fā)作之患者47例，結(jié)果無(wú)效17例，顯效24例，好轉(zhuǎn)6例。對(duì)咳、痰、喘都有一定的療效， 患者體質(zhì)也有不同程度的增強(qiáng)。未見(jiàn)副作用。③治療皮膚潰瘍；④治療母乳缺乏癥?！吨嗅t(yī)藥大辭典》上海出版社，1985年版，P2363。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種既可確保有效成分、即在胎盤(pán)收集后通過(guò)檢驗(yàn)選出無(wú)乙肝、無(wú)丙肝、無(wú)艾滋病、無(wú)梅毒等病毒的原料，改進(jìn)制作方法，提供一種既可確保有效成分、又可較為徹底殺死病原微生物的胎盤(pán)多肽注射液的新型制備方法；制作出的胎盤(pán)多肽注射液，除了能作免疫調(diào)節(jié)劑外，還用在治療下肢骨折的臨床和創(chuàng)面愈合方面有明顯療效。為達(dá)到上述的目的，一種胎盤(pán)多肽注射液制備方法，發(fā)明的方法依次包括以下步驟
(1)、收集健康產(chǎn)婦足月分娩的胎盤(pán)，將其胎盤(pán)清洗干凈，浙干；
(2)、按胎盤(pán)與生理鹽水51的比例加入0. 75 1. 0% (質(zhì)量百分比)生理鹽水，將胎盤(pán)搗碎得到胎盤(pán)組織漿；
(3)、再按胎盤(pán)組織漿與0.75% 1%(質(zhì)量百分比)生理鹽水1 :4比例配制好透析液后， 進(jìn)行透析；共透析3次，第1、2次分別為20 24小時(shí)，第3次為40 50小時(shí)；
(4)、取經(jīng)過(guò)3次透析后的透析液，澄清，上清液先經(jīng)過(guò)0.45Mfli 1. 0 Mm孔徑的濾芯過(guò)濾，再用分子量為5000 10000道爾頓的膜進(jìn)行超濾；超濾后，在60°C 士0. 5°C下連續(xù)10 小時(shí)病毒滅活；
(5)將進(jìn)行病毒滅活后的超濾液用0.22ΜΠ1濾芯除菌過(guò)濾后，灌封，檢漏。
本方法首先進(jìn)行原料胎盤(pán)病毒檢驗(yàn)，即在胎盤(pán)收集后通過(guò)檢驗(yàn)選出無(wú)乙肝、無(wú)丙肝、無(wú)艾滋病、無(wú)梅毒等病毒的原料胎盤(pán)。本方法制備的產(chǎn)品為無(wú)色或淡黃色澄清液體。由于本發(fā)明的操作步驟中，即在胎盤(pán)收集后通過(guò)檢驗(yàn)選出無(wú)乙肝、無(wú)丙肝、無(wú)艾滋病、無(wú)梅毒等病毒的原料，改進(jìn)制作方法，并60°C 士 0.5°C連續(xù)10小時(shí)病毒滅活，增加了低溫透析工藝，提供一種既可確保胎盤(pán)多肽注射液有效成分、又可較為徹底殺死在胎盤(pán)多肽注射液的病原微生物的新型制備方法。制作出的胎盤(pán)多肽注射液，除了能作免疫調(diào)節(jié)劑外， 還用在治療下肢骨折的臨床和創(chuàng)面愈合方面有明顯療效，預(yù)先除去殺死在胎盤(pán)多肽注射液的病原微生物殘留物。得到的產(chǎn)品，既確保制品生產(chǎn)和使用的安全性，又提高了產(chǎn)品的生產(chǎn)率，同時(shí)最大程度的保留原有成分的活性。下面通過(guò)具體實(shí)施方式
對(duì)本發(fā)明的方法作詳細(xì)的描述。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1
一種胎盤(pán)多肽注射液制備方法，首先進(jìn)行原料胎盤(pán)病毒檢驗(yàn)，即在胎盤(pán)收集后通過(guò)檢驗(yàn)選出無(wú)乙肝、無(wú)丙肝、無(wú)艾滋病、無(wú)梅毒等病毒的胎盤(pán)； 具體依次包括如下步驟 (1)、收集健康產(chǎn)婦足月分娩的胎盤(pán)，將其20個(gè)胎盤(pán)清洗干凈，浙干得胎盤(pán)約7000克；
(2)、按胎盤(pán)組織與生理鹽水51的比例加入0. 75% 1% (質(zhì)量百分比)生理鹽水，搗碎得到胎盤(pán)組織漿8400克；
(3)、按胎盤(pán)組織漿與0.75% 1% (質(zhì)量百分比)生理鹽水按1 :4比例配制透析液，然后進(jìn)行透析；共透析3次，第1、2次分別為20 M小時(shí)，第3次為40 50小時(shí)；
(4)、收集3次透析液提總量90.7L ；
(5)、取3次透析后的透析液，澄清后用0.45Mfli孔徑的濾芯過(guò)濾，再用分子量5000 10000道爾頓的膜進(jìn)行超濾；超濾液在60°C 士0. 5°C下連續(xù)10小時(shí)病毒滅活；
(6)將進(jìn)行病毒滅活后的藥液溫度降至5°C士 1°C，用0.22Mffl濾芯除菌過(guò)濾后灌封，得每支裝量為細(xì)1的胎盤(pán)多肽注射液共18850支；
(7)檢漏把產(chǎn)品均勻地?cái)[放在機(jī)動(dòng)門(mén)安瓿瓶滅菌器專(zhuān)用車(chē)上，將車(chē)緩緩?fù)七M(jìn)安瓿滅菌器箱體內(nèi)，關(guān)閉箱門(mén)；
檢漏負(fù)壓-80 kPa、負(fù)壓檢漏時(shí)間300秒， 檢漏正壓80 kPa、正壓檢漏時(shí)間300秒， 清洗時(shí)間600秒、壓力限度130 kPa。(8)設(shè)置完成后程序開(kāi)始運(yùn)行，先抽真空，當(dāng)真空度在-80 Ua后，停止抽真空。打開(kāi)色水閥，將色水吸入滅菌器中至蓋過(guò)產(chǎn)品后關(guān)閉色水閥。打開(kāi)氣閥，再將色水抽回貯器罐中；
(9)打開(kāi)純化水閥門(mén)，淋洗產(chǎn)品外壁上的色水1;
(10)打開(kāi)滅菌器門(mén)，取出產(chǎn)品，剔除帶色的漏封產(chǎn)品。實(shí)施例2
一種胎盤(pán)多肽注射液制備方法，首先進(jìn)行原料胎盤(pán)病毒檢驗(yàn)，即在胎盤(pán)收集后通過(guò)檢驗(yàn)選出無(wú)乙肝、無(wú)丙肝、無(wú)艾滋病、無(wú)梅毒等病毒的胎盤(pán)；具體依次包括如下步驟 (1)、收集健康產(chǎn)婦足月分娩的胎盤(pán)，將其50個(gè)胎盤(pán)清洗干凈，浙干后得胎盤(pán)約17500
克；
(2)、按胎盤(pán)組織與生理鹽水51的比例加入0. 75% 1. 0% (質(zhì)量百分比)生理鹽水， 進(jìn)行搗碎得到胎盤(pán)組織漿21000克；
(3)、按胎盤(pán)組織漿與透析液1:4比例配制透析液，進(jìn)行透析；共透析3次，第1、2次分別為20 24小時(shí)，第3次分別為40 50小時(shí)；
(4)、收集3次透析總量226.8L；
(5)、取經(jīng)過(guò)3次透析后的透析液，澄清后用1.0 μ 孔徑的濾芯過(guò)濾，再用分子量 5000 10000道爾頓的膜進(jìn)行超濾；超濾液在60°C 士0. 5°C下連續(xù)10小時(shí)病毒滅活；
(6)將進(jìn)行病毒滅活后的低溫5°C士 1°C下，用0.22Mffl，除菌過(guò)濾后灌封，得每支4ml 的胎盤(pán)多肽注射液共46390支。(7)檢漏把產(chǎn)品均勻地?cái)[放在機(jī)動(dòng)門(mén)安瓿瓶滅菌器專(zhuān)用車(chē)上，將車(chē)緩緩?fù)七M(jìn)安瓿滅菌器箱體內(nèi)，關(guān)閉箱門(mén)。檢漏負(fù)壓-80 kpa，負(fù)壓檢漏時(shí)間300秒， 檢漏正壓80 kpa,正壓檢漏時(shí)間300秒，
清洗時(shí)間600秒，壓力限度130 kpa。(8)設(shè)置完成后程序開(kāi)始運(yùn)行，先抽真空，當(dāng)真空度在-SOKpa后，停止抽真空。打開(kāi)色水閥，將色水吸入滅菌器中至蓋過(guò)產(chǎn)品后關(guān)閉色水閥。打開(kāi)氣閥，再將色水抽回貯器罐中。(9)打開(kāi)純化水閥I，淋洗產(chǎn)品外壁上的色水。(IO)打開(kāi)滅菌器門(mén)，取出產(chǎn)品，剔除帶色的漏封產(chǎn)品。產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
本產(chǎn)品為小容量注射劑，按國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)《WS-10001- (HD-1430) -2003-2006))執(zhí)行， 其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)如下
外觀(guān)應(yīng)為無(wú)色至淡黃色澄明液體。鑒別應(yīng)在258士4nm處有最大吸收峰?？梢?jiàn)異物20支檢查的供試品中，均不得檢出明顯可見(jiàn)異物。如檢出微細(xì)可見(jiàn)異物的供試品僅有1只，應(yīng)另取20支同法復(fù)試，均不得檢出。裝量應(yīng)不低于4ml/支。pH 值應(yīng)為 6.0 6. 5。非蛋白氮含量顏色應(yīng)淺于對(duì)照管。含量測(cè)定應(yīng)不低于0. 6。不溶性微粒測(cè)定每瓶含IOMm以上的微粒不得過(guò)6000粒，每瓶含25Mm以上的微粒不得過(guò)600粒。過(guò)敏性實(shí)驗(yàn)攻擊后30分鐘內(nèi)不得出現(xiàn)過(guò)敏反應(yīng)。無(wú)菌檢查應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)。異常毒性檢查小白鼠應(yīng)均健存，體重均增加。熱原檢查注射劑量按家兔體重每Ikg注射3. 0ml，按以下兩個(gè)條件判定一、在初試3只家兔中，體溫升溫均低于0. 60°C，并且3只家兔升溫總和低于1. 4°C:或在復(fù)試的5只家兔中，體溫升高0. 6°C或0. 6°C以上的家兔僅1只，并且初試、復(fù)試合并8只家兔的體溫升高總和為3. 5°C或3. 5°C以下，判定熱原檢查符合規(guī)定。二、在初試3只家兔中，體溫升溫均低于0. 60C以上的家兔超過(guò)1只或在復(fù)試的 5只家兔中，體溫升高0. 6°C或0. 6°C以上的家兔超過(guò)1只或在初試、復(fù)試合并8只家兔的體溫升高總和超過(guò)3. 5°C，判定熱原檢查不符合規(guī)定。臨床效果
胎盤(pán)多肽注射液在治療骨傷和創(chuàng)面愈合方面的作用，能夠有效縮短骨折和骨傷的愈合治療周期。所述的治療效果好、有效率高、無(wú)毒副作用。夠有效縮短創(chuàng)面愈合和疤痕修復(fù)的治療周期。胎盤(pán)多肽注射液是以健康產(chǎn)婦的胎盤(pán)為原料，經(jīng)先進(jìn)的生物制藥技術(shù)獲得的小容量生物制劑，含有多種營(yíng)養(yǎng)素、生長(zhǎng)因子及免疫因子等，這些大量的活性成分幫助協(xié)調(diào)、 提高自身免疫，增強(qiáng)新陳代謝，促進(jìn)受損細(xì)胞和創(chuàng)傷的自我修復(fù)和愈合。將胎盤(pán)多肽注射液以0. 9%的氯化鈉溶劑或5%的葡萄糖溶液或葡萄糖氯化鈉溶液稀釋后，經(jīng)靜脈滴注或肌肉注射，或?qū)⑻ケP(pán)多肽注射液原液或其稀釋液直接注射或外用于患病部位，從而達(dá)到治療作用。能有效縮短治療周期、治療效果好、有效率高、無(wú)毒副作用。臨床一般資料本組(1)病例均為住院病人，其中男性62例，女性47例；年齡15 80歲；鎖骨骨折10例，肱骨外科頸骨折8例，肱骨骨折8例，肱骨髁上骨折5例，橈骨、尺骨骨折10例，克雷氏骨折10例，掌指骨骨折6例，股骨粗隆間骨折9例，股骨骨折8例，髕骨骨折8例，脛骨、腓骨骨折11例，內(nèi)踝骨、外踝骨折7例，跖骨骨折6例。(2)分組方法采用單盲隨機(jī)配對(duì)原則，分為治療組和用藥對(duì)照組。其中治療組53 例，對(duì)照組53例。(3)治療方法兩組患者均接受復(fù)位、固定、功能鍛煉治療；采用單盲隨機(jī)配對(duì)方法，治療組給予胎盤(pán)多肽注射液8ml+葡萄糖或生理鹽水靜滴，每天1次，以10天為一療程， 連用2個(gè)療程。對(duì)照組給予丹參針液靜滴。觀(guān)察疼痛腫脹消退時(shí)間。1周后觀(guān)察骨折愈合情況。(4)療效判斷標(biāo)準(zhǔn)
①臨床治愈比同類(lèi)骨折愈合時(shí)間提前1/3以上達(dá)到臨床愈合標(biāo)準(zhǔn)者；
②顯效比同類(lèi)骨折愈合時(shí)間提前1/4 1/3，達(dá)到臨床愈合標(biāo)準(zhǔn)者；
③有效比同類(lèi)骨折愈(有)效與同類(lèi)骨折正常愈合時(shí)間相同。(5)治療結(jié)果胎盤(pán)多肽注射液的有效率為95. 8%，無(wú)不良反應(yīng)發(fā)生。臨床資料⑴李某某，女，36歲，已婚，于2006年3月確診為急性膽囊炎。行膽囊切除術(shù)，觀(guān)察一周發(fā)現(xiàn)手術(shù)傷口愈合不良，加用胎盤(pán)多肽注射液2支(8ml)稀釋于250ml 0. 9%的生理鹽水中進(jìn)行靜脈滴注，未出現(xiàn)過(guò)敏反應(yīng)，連續(xù)用藥7天后，傷口愈合明顯好轉(zhuǎn)。 患者感覺(jué)身體情況良好，無(wú)不適現(xiàn)象。骨折臨床資料
1病例選擇符合骨折診斷標(biāo)準(zhǔn)
除了多發(fā)性骨折、多段骨折、骨不連接以及肝腎功能不全者。1. 1 一般資料觀(guān)察病例50例，男性27例，女性23例，病程3_4周。1. 2 一般資料觀(guān)察病例50例，男性27例，女性23例，病程3_4周。
1. 3治療方法應(yīng)用胎盤(pán)多肽注射液8ml，加入生理鹽水注射液250ml或500ml靜滴，每天1次，按病情及患者經(jīng)濟(jì)條件應(yīng)用3-4周。1. 4觀(guān)察項(xiàng)目觀(guān)察患者治療前后骨折部位骨痂生長(zhǎng)情況。顯效X線(xiàn)片有大量骨痂生長(zhǎng)；有效x線(xiàn)片見(jiàn)中等量骨痂生長(zhǎng)；無(wú)效:x線(xiàn)片僅有少量骨痂生長(zhǎng)或無(wú)骨痂生長(zhǎng)。1. 5安全觀(guān)察治療期間密切觀(guān)察藥物毒副反應(yīng)的發(fā)生。2.結(jié)果
2. 1 50例骨折患者中，顯效3例，有效35例，總有效率76%以上。2.2治療期間未發(fā)生任何明顯的不良反應(yīng)。3. 1 討論
骨折愈合一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程，損傷組織可刺激多種細(xì)胞增生形成新生組織即骨痂。骨折初期為纖維性骨痂，通過(guò)軟骨內(nèi)化骨和膜內(nèi)化骨方式發(fā)生鈣鹽沉積，并且產(chǎn)生大量的膠原， 形成骨性骨痂。骨性骨痂把骨缺損的兩端連在一起，以致外來(lái)壓力施加到骨缺損處時(shí)，不再發(fā)生斷裂。本臨床觀(guān)察結(jié)果顯示，胎盤(pán)多肽注射液可促進(jìn)骨性骨痂組織的形成，并無(wú)不良反應(yīng)事件發(fā)生，推斷其機(jī)制可能與影響膠原組織的合成以及鈣鹽沉積相關(guān)。選取自2006年8 月 2009年12月收治的閉合性下肢骨折病例132例，均給予手術(shù)治療，其中男89例，女43 例，年齡為15 65歲，平均為30. 4歲，其中脛骨骨折78例，股骨骨折54例。所選患者均無(wú)糖尿病、高血壓、肺心病等可能影響骨折愈合的基礎(chǔ)疾病，所有患者均采用隨機(jī)法分為治療組和對(duì)照組，每組各66例。3. 2治療方法
兩組患者均采用切開(kāi)復(fù)位、鋼板或骨內(nèi)釘內(nèi)固定術(shù)，術(shù)后給予理療及肢體功能鍛煉，常規(guī)術(shù)后應(yīng)用抗生素，在此基礎(chǔ)上治療組靜脈滴注胎盤(pán)多肽注射液，一次8ml稀釋于250ml 0.9%氯化鈉注射液中，1次/日，14日為一個(gè)療程，每個(gè)患者治療1個(gè)療程。對(duì)照組除常規(guī)用藥外，均不給予其他促進(jìn)骨折愈合藥物。兩組患者出院后均隨訪(fǎng)6—10月。3. 3療效判斷
(1)采用骨折臨床愈合標(biāo)準(zhǔn)①局部無(wú)壓痛及縱向叩擊痛；②局部無(wú)異?；顒?dòng)；③X 線(xiàn)照片顯示骨折線(xiàn)模糊，有連續(xù)骨痂通過(guò)骨折線(xiàn)；④功能測(cè)定在解除固定情況下，上肢能平舉I kg重量達(dá)I min ；下肢能徒步連續(xù)步行3 min，并不少于30步；⑤連續(xù)觀(guān)察2周，骨折處不變形，則觀(guān)察的第1天即為臨床愈合日期。4.統(tǒng)計(jì)方法
骨折愈合時(shí)間采用均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差(X is)表示，結(jié)果用SPSS 11. 5軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，治療組和對(duì)照組采用t檢驗(yàn)，選定P<0. 05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。術(shù)后發(fā)生感染人數(shù)為計(jì)量資料，以率表示，統(tǒng)計(jì)方法采用兩樣本率的X檢驗(yàn)，P<0，05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義
5.結(jié)果治療過(guò)程中，患者耐受性良好，治療組和對(duì)照組均未發(fā)生毒副反應(yīng)，治療組中 1例股骨骨折患者術(shù)后發(fā)生感染，對(duì)照組有兩例脛骨骨折患者術(shù)后并發(fā)感染，給予傷口分泌物細(xì)菌培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn)后，應(yīng)用敏感抗生素，加強(qiáng)傷口換藥，感染得以控制，未繼發(fā)骨髓炎， 傷口延期愈合。其余患者治療前后血尿常規(guī)及肝腎功能檢驗(yàn)均未發(fā)生異常。治療組骨折愈合時(shí)間明顯短于對(duì)照組(表1)；
表1治療組和對(duì)照組骨折愈合時(shí)間(周)(X士 S) 組別股骨干脛骨治療組13.8+1. 5 14. 5+1. 2
對(duì)照組16. 7+2. 117. 1+2.0
(表2)資料(略)表明感染發(fā)生率對(duì)照組高于治療組。
本組臨床資料表明，對(duì)于下肢骨折，在嚴(yán)格手術(shù)操作的前提下，胎盤(pán)多肽注射液可明顯提高骨折的愈合時(shí)間；此外，可以提高人體免疫力，具有較為明顯的抗感染作用。胎盤(pán)多肽中的小分子多肽對(duì)骨折愈合的具體作用機(jī)制尚有待進(jìn)一步作基礎(chǔ)研究，但其對(duì)骨折愈合時(shí)間的縮短，通過(guò)臨床觀(guān)察，確有明顯的促進(jìn)作用。
權(quán)利要求
1. 一種胎盤(pán)多肽注射液制備方法，其特征是首先進(jìn)行原料胎盤(pán)病毒檢驗(yàn)，即在胎盤(pán)收集后通過(guò)檢驗(yàn)選出無(wú)乙肝、無(wú)丙肝、無(wú)艾滋病、無(wú)梅毒病毒的胎盤(pán)； 具體依次包括如下步驟(1)、收集上述健康產(chǎn)婦足月分娩的胎盤(pán)，將其胎盤(pán)清洗干凈，浙干；(2)、按胎盤(pán)與生理鹽水51的比例加入0. 75 1. 0%質(zhì)量百分比的生理鹽水，將胎盤(pán)搗碎得到胎盤(pán)組織漿；(3)、再按胎盤(pán)組織漿與質(zhì)量百分比0.75% 1%的生理鹽水1 :4比例配制好透析液后， 進(jìn)行透析；共透析3次，第1、2次分別為20 24小時(shí)，第3次為40 50小時(shí)；(4)、取經(jīng)過(guò)3次透析后的透析液，澄清，上清液先經(jīng)過(guò)0.45ΜΠ1 1. 0 Mm孔徑的濾芯過(guò)濾，再用分子量為5000 10000道爾頓的膜進(jìn)行超濾；超濾后，在60°C 士0. 5°C下連續(xù)10 小時(shí)病毒滅活；(5)、將進(jìn)行病毒滅活后的超濾液用0.22ΜΠ1濾芯除菌過(guò)濾后，灌封，檢漏。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)的一種胎盤(pán)多肽注射液制備方法，方法依次包括經(jīng)過(guò)病毒檢驗(yàn)的胎盤(pán)，用胎盤(pán)與生理鹽水配合搗碎得到胎盤(pán)組織漿;進(jìn)一步用胎盤(pán)組織漿配制好透析液后，進(jìn)行透析3次，透析液澄清后的上清液先經(jīng)過(guò)0.45μm～l.0μm孔徑的濾芯過(guò)濾，再用分子量為5000～10000道爾頓的膜進(jìn)行超濾；超濾后，在60℃±0.5℃下連續(xù)10小時(shí)病毒滅活的超濾液用0.22μm濾芯除菌過(guò)濾后，灌封，檢漏；由于采用了低溫透析工藝，提供一種既可確保胎盤(pán)多肽注射液有效成分、又可較為徹底殺死除去在胎盤(pán)多肽注射液的病原微生物的新型制備方法，制作出的胎盤(pán)多肽注射液，療效顯著，既確保制品生產(chǎn)和使用的安全性，又提高了產(chǎn)品的生產(chǎn)率。
文檔編號(hào)A61K9/00GK102284057SQ201110209778
公開(kāi)日2011年12月21日 申請(qǐng)日期2011年7月26日 優(yōu)先權(quán)日2011年7月26日
發(fā)明者李祥, 王 華, 蘇嘉麗, 趙學(xué)梅, 鐘正曉 申請(qǐng)人:貴州泰邦生物制品有限公司