專利名稱：新的橢圓玫瑰樹堿化合物,其制備方法和含有它們的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的橢圓玫瑰樹堿化合物，其制備方法和含有它們的藥物組合物，由于本發(fā)明化合物具有抗腫瘤活性而具有有價(jià)值的治療作用。
某些具有抗癌性質(zhì)的橢圓玫瑰樹堿是已知的，例如EP0591058的專利說明書已有描述。
為了得到活性和耐受性更好的分子，根據(jù)治療上的要求常常需要研究新的抗癌劑。
具體地說，本發(fā)明涉及新的橢圓玫瑰樹堿化合物，與現(xiàn)有技術(shù)已知化合物相比，該化合物具有更高的體外細(xì)胞毒性，這是治療作用更好的一種標(biāo)志。
更具體地說，本發(fā)明涉及下述通式(I)的化合物，及其可能的光學(xué)異構(gòu)體、N-氧化物和與酸或堿形成的藥學(xué)上可接受的加成鹽，
其中R1表示具有1-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈的烷基基團(tuán)；R2、R4和R5可以相同或不同，各自表示氫原子或直鏈或支鏈的(C1-C6)烷基基團(tuán)；R3表示氫原子，直鏈或支鏈的(C1-C6)烷基基團(tuán)，該基團(tuán)在鍵連于四環(huán)的碳原子上被二(C1-C6)烷氨基任意取代，或(C2-C6)鏈烯基基團(tuán)；
R6和R7可以相同和不同，各自表示氫原子或(C1-C6)烷基基團(tuán)，在各種情況下可以是直鏈或支鏈的鏈，和R6和R7和與之鍵連的氮原子一起形成雜環(huán)基團(tuán)，該基團(tuán)可選擇性地含有選自氮、氧和硫原子的第二個(gè)雜原子，例如，吡咯基、吡咯啉基、吡咯烷基、咪唑基、咪唑啉基、咪唑烷基、噁唑、噁唑啉基、噁唑烷基、吡啶基、哌啶基、嗎啉基、硫代嗎啉基、哌嗪基、吡唑基、吡唑啉基、吡唑烷基、噠嗪基、嘧啶基和吡嗪基基團(tuán)，以及，R6還可以與R5鍵連而一起形成-(CH2)m-橋，其中m是2或3的值；和A表示含有1-10個(gè)碳原子的直鏈或支鏈的飽和烴基鏈，條件是當(dāng)R3是氫時(shí)，A不能同時(shí)為具有1-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈的飽和烴基鏈。
本發(fā)明還涉及式I化合物的制備方法，其特征是*使式II化合物
其中R1、R2、R3和R4如上文定義，和R8表示直鏈或支鏈的(C1-C6)烷基基團(tuán)，*與含氫酸，例如鹽酸進(jìn)行反應(yīng)，或與堿性試劑，例如氫氧化鈉進(jìn)行反應(yīng)，*得到式III化合物
其中R1、R2、R3和R4如上文定義，*將其與式IV化合物進(jìn)行反應(yīng)
其中R5、R6、R7和A如上文定義，*得到式V化合物
其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7和A如上文定義，*將其用路易斯酸，如三溴化硼處理進(jìn)行去甲基化，得到相應(yīng)的式I化合物。
用堿性試劑如氫氧化鈉進(jìn)行化合物II的水解作用在溶劑如乙醇水溶液中進(jìn)行更為有利。
式III化合物與式IV的胺反應(yīng)可按照H.WISSMANN和H.J.KLEINER在Angew.Chem.Int.Ed.Engl.，19，133-134(1980)中所述的方法，在有肽偶合試劑如二環(huán)己基碳化二亞胺存在下，在非質(zhì)子傳遞溶劑如二甲基甲酰胺之中，或者在1-丙基膦酸的環(huán)酐(該化合物可以由商業(yè)途徑獲得)存在下和在非質(zhì)子傳遞溶劑如二甲基甲酰胺之中進(jìn)行反應(yīng)；或者可按照J(rèn).COSTE，D.LENGUYEN和B.CASTRO在TetrahedronLetters，31，2，205-208，(1990)中所述的方法，在苯并三唑-1-基氧基三吡咯烷基六氟磷酸(該化合物可以由商業(yè)途徑獲得)存在下進(jìn)行反應(yīng)。
式V化合物的去甲基化可在路易斯酸，如三溴化硼存在下，在非質(zhì)子傳遞溶劑如二氯甲烷或甲苯中進(jìn)行，得到式I化合物。
根據(jù)R1-R7不同的意義，式I化合物也可用其它不同的方法制備，所有這些都是本發(fā)明的一部分。
相應(yīng)的，本發(fā)明還涉及制備式I化合物的方法，其特征是a)使式IIa化合物
其中R1、R2、R3、R4和R8如上文定義，*與式IVa化合物反應(yīng)
其中R6、R7和A如上文定義，*得到式Ia化合物
其中R1、R2、R3、R4、R6、R7和A如上文定義；或者
其中R1、R2、R4、R5、R6、R7和A如上文定義，*或者與式VI化合物反應(yīng)
其中-R9和R10可以相同或不同，各自表示直鏈或支鏈的(C1-C6)烷基基團(tuán)，-R11表示式CnH2n+1基團(tuán)，其中n表示零或1-5的整數(shù)，*或者在具有1-6個(gè)碳原子的醛存在下，與式VII化合物反應(yīng)
其中R9和R10如上文定義，*得到式Ic化合物
其中-R1、R2，R4、R5、R6、R7和A如上文定義，和-R’3表示(C1-C6)烷基基團(tuán)，該基團(tuán)在鍵連于四環(huán)的碳原子上被二(C1-C6)烷氨基任意取代，(即R’3是下式基團(tuán)
其中R9、R10和R11如上文定義)；或者c)將上文定義的式Ic化合物*與氫反應(yīng)，*得到式Id化合物
其中-R1、R2、R4、R5、R6、R7和A如上文定義，和-R”3表示(C1-C6)烷基基團(tuán)，(即是-CH2-R11基團(tuán)，其中R11如上文定義)；或者d)使式II’a化合物
其中R1、R2、R4和R8如上文定義，*與式VIII化合物進(jìn)行反應(yīng)H2C＝CH-CH2-X(VIII)
其中X表示離核基團(tuán)，例如鹵原子或烷基磺酸酯基或芳基磺酸酯基基團(tuán)，*得到式IX化合物
其中R1、R2、R4和R8如上文定義，*該反應(yīng)通過熱重排作用(烯丙基轉(zhuǎn)移)，產(chǎn)生式IIb化合物
其中R1、R2、R4和R8如上文定義，*使其與上文定義的式IV的胺進(jìn)行反應(yīng)，*得到式Ie化合物
其中R1、R2、R4、R6、R7和A如上文定義；或者e)使前述定義的式IIb化合物氫化成為式IIc化合物
其中R1、R2、R4和R8如上文定義，*使其與前述定義的式IV的胺進(jìn)行反應(yīng)，*得到式If化合物
其中R1、R2、R4、R6、R7和A如上文定義。
式IIa、IIb和IIc化合物屬于總的式II化合物，類似的，式IVa化合物是總的式IV化合物的一個(gè)組成部分。
式Ia、Ib、Ic、Id和If化合物都包括在總的式I化合物之中。
式IIa化合物與式IVa化合物的反應(yīng)最好在使用過量的式IVa化合物，或最好在溶劑如低沸點(diǎn)醇，或非質(zhì)子傳遞溶劑如四氫呋喃或二氯甲烷中，和在80-150℃的溫度下進(jìn)行。
式Ib化合物和式VI化合物的反應(yīng)可在醚類溶劑如二噁烷中，在有酸試劑如乙酸存在下進(jìn)行。
式Ib化合物和式VII化合物的反應(yīng)可按照Oganic Syntheses，CollectiveVolume IV，p626中所述的方法進(jìn)行。
使式Ic化合物催化氫化制備式Id化合物的反應(yīng)可在氫化催化劑如鈀-碳，鈀-硫酸鋇或氫氧化鈀-碳存在下，在有酸或無酸的情況下，例如在鹽酸于低沸點(diǎn)溶劑中的溶液之中，或在乙酸中進(jìn)行反應(yīng)。
式II’a化合物與式VIII化合物的反應(yīng)可在非質(zhì)子傳遞溶劑如二甲基甲酰胺、四氫呋喃、丙酮或吡啶中，在有或沒有含氫酸受體如堿金屬碳酸鹽如碳酸鉀，或叔胺如三乙胺或二甲氨基吡啶的存在下進(jìn)行。
式IX化合物的烯丙基重排作用可在高沸點(diǎn)非質(zhì)子傳遞溶劑如二乙胺或1，2-二氯苯中，于溶劑的沸騰溫度下以適當(dāng)?shù)姆绞竭M(jìn)行反應(yīng)來完成。
使式IIb化合物催化氫化制備式IIc化合物的反應(yīng)可在氫化催化劑如鈀-碳或阮內(nèi)鎳存在下，在低沸點(diǎn)醇之中，于20-60℃，和在1.105-5.105Pa的情況下進(jìn)行。
制備式II和IIa化合物的方法在EP 0591 058的專利說明書中已有描述。
式IV化合物或者是可由商業(yè)途徑獲得的產(chǎn)品，或者是很容易用有機(jī)化學(xué)領(lǐng)域已知的的方法制備的化合物。
如此制得的式I化合物可在有或沒有氨的存在下，在二氧化硅(AMICON35-70μ)上用低壓色譜(快速色譜)純化，以例如乙酸乙酯或二氯甲烷和甲醇的混合物為洗脫液，或者將所述化合物或它們的鹽用常用的溶劑如乙醇、水或二甲基甲酰胺進(jìn)行重結(jié)晶來純化。
式I化合物可與生理上可接受的酸或堿形成鹽，這些鹽包括在本發(fā)明之中。
式I化合物還可形成N-氧化物的化合物，他們也包括在本發(fā)明之中。
某些式I化合物含有一個(gè)或多個(gè)不對(duì)稱碳原子，相應(yīng)的，它們會(huì)產(chǎn)生對(duì)映異構(gòu)體或外消旋體，這些也構(gòu)成了本發(fā)明的一部分。
本發(fā)明化合物具有特別有價(jià)值的藥理活性，特別是它們具有優(yōu)良的體外細(xì)胞毒性和良好的抗癌活性，這些性質(zhì)與本發(fā)明化合物有特別好的耐受性相結(jié)合，使它們可用于治療癌癥。
本發(fā)明還涉及藥物組合物，其中含有至少一種本發(fā)明化合物作為活性成分，并與一種或多種藥用賦形劑或惰性、無毒的載體混合或結(jié)合。
藥物組合物通常制成適合于口服、直腸或腸胃外給藥的單位劑量形式，特別是片劑、糖衣丸劑、膠囊、栓劑和注射用或飲用溶液的形式。
劑量隨病人的年齡和體重，給藥方式，治療適應(yīng)癥的性質(zhì)和任何有關(guān)的治療的變化而變化，每天分單或多次給藥劑量范圍為0.1-400mg。
下面的實(shí)施例說明了本發(fā)明，其中的熔點(diǎn)是用Kofler hot plate(K)或毛細(xì)管法(cap.)測(cè)定的。實(shí)施例11-[(3-二甲氨基-2，2-二甲基丙基)氨基羰基]-5，6-二甲基-9-羥基-6H-吡啶并[4，3-b]咔唑二鹽酸化物
將8g1-(甲氧基羰基)-5，6-二甲基-9-羥基-6H-吡啶并[4，3-b]咔唑在120ml N，N2，2-四甲基-1，3-丙二胺于130℃攪拌20小時(shí)。在葉片泵抽真空的條件下濃縮至干，殘余物(用40g二氧化硅制成糊狀)在720g二氧化硅上色譜純化，以二氯甲烷/乙醇(90/10)混合物為洗脫液，把純餾分濃縮至干，將殘余物懸浮于60ml乙醇，加入20ml鹽酸乙醇，可觀察到先溶解，然后結(jié)晶，混合物經(jīng)抽濾和在50℃，66.6Pa的條件下干燥，得到1g目的產(chǎn)物，m.p.(cap.)275-280℃，產(chǎn)率10％。實(shí)施例21-[(2-二甲氨基乙基)氨基羰基]-5，6-二甲基-9-羥基-10-二甲氨基甲基-6H-吡啶并[4，3-b]咔唑三鹽酸化物
將0.9g1-[(2-二甲氨基乙基)氨基羰基]-5，6-二甲基-9-羥基-6H-吡啶并[4，3-b]咔唑、3.25g N，N，N’，N’-四甲基二氨基甲烷、0.3ml乙酸和72ml二噁烷回流30分鐘。濃縮至干，把殘余物溶于水，用濃氨水中和，和用加了乙醇的二氯甲烷萃取，直到完全溶解。有機(jī)相用硫酸鎂干燥，然后蒸發(fā)至干。殘余物在乙醚中攪拌，抽濾和再溶于乙醇，加入鹽酸乙醇至pH＜3，抽濾出不溶物和用乙醇與乙醚洗滌，于50℃真空干燥，得到1.04g目的產(chǎn)物，m.p.(K)＞250℃，產(chǎn)率80％。實(shí)施例31-[(2-二甲氨基乙基)氨基羰基]-5，6，10-三甲基-9-羥基-6H-吡啶并[4，3-b]咔唑
在氫氣壓力為1.105Pa和有2.2g 10％鈀-碳存在下，于30℃，將2.6g1-[(2-二甲氨基乙基)氨基羰基]-5，6-二甲基-9-羥基-10-二甲氨基甲基-6H-吡啶并[4，3-b]咔唑于1.2升乙醇中氫化4小時(shí)，在此之后，僅留有少量原料。過濾出的沉淀用二氯甲烷/乙醇混合物洗滌。將合并的濾液濃縮至干，殘余物在二氧化硅上色譜純化，以二氯甲烷/乙醇/三乙胺混合物為洗脫液。得到0.23g目的產(chǎn)物，m.p.(K)170℃，產(chǎn)率10％。實(shí)施例41-[(2-二甲氨基乙基)氨基羰基]-5，6-二甲基-9-羥基-10-烯丙基-6H-吡啶并[4，3-b]咔唑
將2g 1-乙氧基羰基-5，6-二甲基-9-烯丙氧基-6H-吡啶并[4，3-b]咔唑溶于80ml 1，2-二氯苯，將該溶液回流10小時(shí)。冷卻混合物可析出結(jié)晶。抽濾出沉淀，和在二氧化硅上色譜純化，先用二氯甲烷，再用二氯甲烷/乙醇混合物洗脫。得到1.27g 1-乙氧基羰基-5，6-二甲基-9-羥基-10-烯丙基-6H-吡啶并[4，3-b]咔唑。
按照實(shí)施例1的方法將此化合物轉(zhuǎn)化成1-[(2-二甲氨基乙基)氨基羰基]-5，6-二甲基-9-羥基-10-烯丙基-6H-吡啶并[4，3-b]咔唑，產(chǎn)率75％，m.p.(K)222℃。實(shí)施例51-[(2-二甲氨基乙基)氨基羰基]-5，6-二甲基-9-羥基-10-丙基-6H-吡啶并[4，3-b]咔唑
在氫氣壓力為1.105Pa和有0.3g 10％鈀-碳存在下，于40℃，將0.7g1-乙氧基羰基-5，6-二甲基-9-羥基-10-烯丙基-6H-吡啶并[4，3-b]咔唑于200ml乙醇中氫化30分鐘。過濾，催化劑用乙醇洗滌，將合并的濾液濃縮至干。殘余物在二氧化硅上色譜純化，先用二氯甲烷，再用二氯甲烷/乙醇混合物(98/2)洗脫，得到0.362g 1-乙氧基羰基-5，6-二甲基-9-羥基-10-丙基-6H-吡啶并[4，3-b]咔唑，產(chǎn)率51％。
按照實(shí)施例1的方法將此化合物轉(zhuǎn)化成1-[(2-二甲氨基乙基)氨基羰基]-5，6-二甲基-9-羥基-10-丙基-6H-吡啶并[4，3-b]咔唑，產(chǎn)率69％，m.p.(K)211℃。實(shí)施例6藥理研究細(xì)胞毒性研究使用的四種細(xì)胞株是-1鼠的白血病， L1210，-1人的肺癌，A549，-1人的表皮樣癌，KB-3-1，-相應(yīng)的抗性株，KB-A1，它的多藥抗性是由甲烯土霉素(ADR)誘導(dǎo)的。
這些細(xì)胞是在RPMI1640完全培養(yǎng)介質(zhì)中培養(yǎng)的，該介質(zhì)含有10％牛胎兒血清、2mM谷氨酰胺、50單位/ml的青霉素、50μg/ml鏈霉素和10mM Hepes，pH＝7.4。
將細(xì)胞分布在微量滴定板上并和細(xì)胞毒性化合物接觸，之后將細(xì)胞孵化2天(L1210)和4天(A549，KB-3-1，KB-A1)。然后，對(duì)存活的細(xì)胞用比色試驗(yàn)，微量培養(yǎng)四唑鎓試驗(yàn)(the Microculture Tetrazolium Assay)(Carmichael J.，DeGraff W.G.，Gazdar A.F.，Mina J.D.和MitchellJ.R.，Evaluation of a Tetrazolium-based semiautomated colorimetricassayassessment of chemosensitivity testing，Cancer Res.，47，936-942，1987)定量計(jì)數(shù)。
結(jié)果以IC50表示，即抑制所處理的細(xì)胞增殖50％時(shí)細(xì)胞毒性劑的濃度。用各種細(xì)胞株試驗(yàn)的結(jié)果列于下表。
在此實(shí)施例中，用實(shí)施例3化合物所得到的結(jié)果對(duì)本發(fā)明而言是特別有代表性的，試驗(yàn)以甲烯土霉素(ADR)為參照物，結(jié)果如下
在四種細(xì)胞株的試驗(yàn)中，實(shí)施例3的細(xì)胞毒性比甲烯土霉素大，所以，此化合物和本發(fā)明的其它化合物可以成功地用于治療對(duì)甲烯土霉素有抗性和對(duì)多藥有表型抗性的腫瘤。
權(quán)利要求
1.下述通式(I)的化合物及其光學(xué)異構(gòu)體、N-氧化物和其藥學(xué)上可接受的酸或堿加成鹽
其中R1表示具有1-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈的烷基基團(tuán)；R2、R4和R5可以相同或不同，各自表示氫原子或直鏈或支鏈的(C1-C6)烷基基團(tuán)；R3表示氫原子，直鏈或支鏈的(C1-C6)烷基基團(tuán)，該基團(tuán)在鍵連于四環(huán)的碳原子上被二(C1-C6)烷氨基任意取代，或(C2-C6)鏈烯基基團(tuán)；R6和R7可以相同和不同，各自表示氫原子或(C1-C6)烷基基團(tuán)，在各種情況下可以是直鏈或支鏈的鏈，和R6和R7和與之鍵連的氮原子一起形成雜環(huán)基團(tuán)，該基團(tuán)可選擇性地含有選自氮、氧和硫原子的第二個(gè)雜原子，以及，R6還可以與R5鍵連而一起形成-(CH2)m-橋，其中m是2或3的值；和A表示含有1-10個(gè)碳原子的直鏈或支鏈的飽和烴基鏈，條件是當(dāng)R3是氫時(shí)，A不能同時(shí)為具有1-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈的飽和烴基鏈。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中的化合物是1-[(2-二甲氨基乙基)氨基羰基]-5，6，10-三甲基-9-羥基-6H-吡啶并[4，3-b]咔唑。
3.權(quán)利要求1化合物的制備方法，其特征是*使式II化合物
其中R1、R2、R3和R4如權(quán)利要求1定義，和R8表示直鏈或支鏈的(C1-C6)烷基基團(tuán)，*與含氫酸或與堿性試劑反應(yīng)，得到式III化合物
其中R1、R2、R3和R4如上文定義，*將其與式IV化合物反應(yīng)
其中R5、R6、R7和A如權(quán)利要求1定義，*得到式V化合物
其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7和A如上文定義，*將其用路易斯酸去甲基后得到相應(yīng)的式I化合物。
4.權(quán)利要求1化合物的制備方法，其特征是a)使式IIa化合物
其中R1、R2、R3、R4和R8如權(quán)利要求3定義，*與式IVa化合物反應(yīng)
其中R6、R7和A如權(quán)利要求1定義，*得到式Ia化合物
其中R1、R2、R3、R4、R6、R7和A如上文定義；或者b)使式Ib化合物
其中R1、R2、R4、R5、R6、R7和A如權(quán)利要求1定義，*或者與式VI化合物反應(yīng)
其中-R9和R10可以相同或不同，各自表示直鏈或支鏈的(C1-C6)烷基基團(tuán)，-R11表示式CnH2n+1基團(tuán)，其中n表示零或1-5的整數(shù)，*或者在具有1-6個(gè)碳原子的醛存在下，與式VII化合物反應(yīng)
其中R9和R10如上文定義，*得到式Ic化合物
其中-R1、R2、R4、R5、R6、R7和A如上文定義，和-R’3表示(C1-C6)的烷基基團(tuán)，該基團(tuán)在鍵連于四環(huán)的碳原子上被二(C1-C6)烷氨基任意取代，即R’3是下式基團(tuán)
其中R9、R10和R11如上文定義；或者c)將上文定義的式Ic化合物*與氫反應(yīng)，*得到式Id化合物
其中-R1、R2、R4、R5、R6、R7和A如上文定義，和-R”3表示(C1-C6)烷基基團(tuán)，即是-CH2-R11基團(tuán)，其中R11如上文定義；或者d)使式II’a化合物
其中R1、R2、R4和R8如上文定義，*與式VIII化合物進(jìn)行反應(yīng)H2C＝CH-CH2-X(VIII)其中X表示離核基團(tuán)，*得到式IX化合物
其中R1、R2、R4和R8如上文定義，*該反應(yīng)通過熱重排作用(烯丙基轉(zhuǎn)移)，產(chǎn)生式IIb化合物
其中R1、R2、R4和R8如上文定義，*使其與前述定義的式IV的胺反應(yīng)，*得到式Ie化合物
其中R1、R2、R4、R6、R7和A如上文定義；或者e)使前述定義的式IIb化合物氫化成為式IIc化合物
其中R1、R2、R4和R8如上文定義，*使其與前述定義的式IV的胺進(jìn)行反應(yīng)，*得到式If化合物
其中R1、R2、R4、R6、R7和A如上文定義。
5.藥物組合物，其中含有至少一種權(quán)利要求1或2任意一項(xiàng)中的化合物作為活性成分，和與一種或多種藥學(xué)上可接受的賦形劑或惰性、無毒的載體混合或結(jié)合。
6.用于治療癌癥的權(quán)利要求5的藥物組合物。
全文摘要
本發(fā)明公開了新的通式Ⅰ的橢圓玫瑰樹堿化合物,及其光學(xué)異構(gòu)體、N－氧化物和其藥學(xué)上可接受的酸或堿加成鹽,其中R
文檔編號(hào)A61P35/00GK1188766SQ9712347
公開日1998年7月29日 申請(qǐng)日期1997年12月29日 優(yōu)先權(quán)日1996年12月30日
發(fā)明者C·吉隆尼奧, E·比薩格尼, Y·查頓, G·阿塔西, A·皮埃爾, S·里昂西 申請(qǐng)人:阿迪爾公司