專(zhuān)利名稱：一種中藥原料及制劑和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種環(huán)維黃楊星D藥物原料及制劑和用途。
背景技術(shù)：
黃楊寧制劑，是以黃楊科植物-小葉黃楊為原料制備得到的制劑，為我國(guó)首創(chuàng)的治療心腦血管疾病新藥，其中黃楊寧片已被收入《中國(guó)藥典》2000版、2005版、2010版，上述藥物屬于傳統(tǒng)中藥，傳統(tǒng)中藥在臨床應(yīng)用中對(duì)疾病的治療具有重要的作用，但傳統(tǒng)中藥多以復(fù)方藥材或復(fù)方提取物入藥，成分復(fù)雜，未知的非定量成分占有相當(dāng)比例，存在雜質(zhì)較多，療效物質(zhì)不清楚，質(zhì)量不均一、不穩(wěn)定，進(jìn)而導(dǎo)致臨床療效不穩(wěn)定，發(fā)生不良反應(yīng)后難以查找原因等問(wèn)題，難于適應(yīng)中藥現(xiàn)代化與國(guó)際化的要求。環(huán)維黃楊星D系從黃楊科植物小葉黃楊及其同屬植物中提取得到的活性單體-生物堿，屬孕甾烷衍生物，分子式:C26H46N2tlO,藥效學(xué)研究表明，環(huán)維黃楊星D具有明顯增強(qiáng)心肌收縮力的作用、具有舒張冠狀動(dòng)脈的作用、具有明顯的抗心肌缺血作用、具有抗心律失常作用、具有對(duì)腦缺血的保護(hù)作用 ；因此，將環(huán)維黃楊星D開(kāi)發(fā)成中藥新藥具有重要意義。文獻(xiàn)《環(huán)維黃楊星D的藥理及毒理研究概況》(南京中醫(yī)藥大學(xué)碩士學(xué)位論文)，52頁(yè)-53頁(yè)公開(kāi)了環(huán)維黃楊星D毒理學(xué)的研究，環(huán)維黃楊星D給藥后具有一定的腎毒性，但該文獻(xiàn)并沒(méi)有針對(duì)環(huán)維黃楊星D的物質(zhì)基礎(chǔ)進(jìn)行深入的研究，即環(huán)維黃楊星D原料中是環(huán)維黃楊星D具有腎毒性還是雜質(zhì)具有腎毒性，或者是什么雜質(zhì)具有腎毒性，都未進(jìn)行深入研究。

發(fā)明內(nèi)容
基于上述原因，申請(qǐng)人通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，環(huán)維黃楊星D原料中環(huán)原黃楊堿C(Cycloprotobuxine C)的含量在一定范圍內(nèi)(大于0.5%且小于等于10%),該原料的腎毒性顯著降低；藥效學(xué)試驗(yàn)表明，本發(fā)明環(huán)維黃楊星D原料具有很好的治療心絞痛、冠心病、心律失常的作用。本發(fā)明通過(guò)下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的?！N藥物原料,藥物原料中包括為環(huán)維黃楊星D和環(huán)原黃楊堿C,其中環(huán)維黃楊星D重量含量為大于等于90.0%且小于100%,環(huán)原黃楊堿C重量含量為大于0.5%且小于10%。上述所述藥物原料優(yōu)選為:環(huán)維黃楊星D重量含量為大于90.0%且小于95%，環(huán)原黃楊堿C重量含量為大于5%且小于10%。上述所述藥物原料優(yōu)選為:環(huán)維黃楊星D重量含量為大于95.0 %且小于99.0環(huán)原黃楊堿C重量含量為大于1.0%且小于5.0%。上述所述的任一一種藥物原料制備成的藥物制劑。上述任一項(xiàng)所述的藥物原料在制備治療冠心病、心絞痛藥物中的應(yīng)用。上述任一項(xiàng)所述的藥物原料在制備治療心律失常藥物中的應(yīng)用。
上述所述的藥物制劑包括口服制劑和注射制劑。上述所述的藥物制劑包括片劑、膠囊劑、水針劑、輸液劑或粉針劑。上述所述的水針劑組成為環(huán)維黃楊星D原料1-3重量份，三羥甲基氨基甲烷-鹽酸緩沖液適量(調(diào)pH = 5-6)；其中粉針劑組成為環(huán)維黃楊星D原料1-3重量份，甘露醇40-60重量份，三羥甲基氨基甲烷-鹽酸緩沖液(調(diào)pH = 5-6)。注:現(xiàn)有技術(shù)中中藥有效成分中含量大于等于80%，即稱為該物質(zhì)，比如現(xiàn)有技術(shù)中所述的“環(huán)維黃楊星D”皆為“環(huán)維黃楊星D藥物原料，其環(huán)維黃楊星D含量大于等于80%，，。藥物原料中成分和雜質(zhì)的檢測(cè)方法可以按照本發(fā)明公開(kāi)的制備液相色譜法進(jìn)行檢測(cè)分析。一、藥理試驗(yàn)例對(duì)麻醉大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用試驗(yàn)動(dòng)物:健康SD大鼠，體重240_260g。

試驗(yàn)藥物:試驗(yàn)藥物I組:環(huán)維黃楊星D含量99.9%，其余0.1 %。制備高效液相色譜法:流動(dòng)相為lOmmol/L甲酸銨:乙腈(8: 92)，用蒸發(fā)光散射檢測(cè)器檢測(cè)。精密稱取約IOmg環(huán)維黃楊星D對(duì)照品至25mL量瓶中，加5mL三氯甲烷溶解，再用乙腈稀釋至刻度，作為環(huán)維黃楊星D對(duì)照品母液，將該母液用乙腈依次稀釋成每ImL約含環(huán)維黃楊星D為I μ g、2 μ g、5 μ g、10 μ g和20 μ g的環(huán)維黃楊星D對(duì)照品溶液；精密量取環(huán)維黃楊星D對(duì)照品溶液20 μ L，注入色譜儀，記錄保留時(shí)間。樣品制備:取含有環(huán)維黃楊星D藥物原料(環(huán)維黃楊星D含量為71.9% ),加入流動(dòng)相，溶解完全，用二醇基鍵合硅膠制備液相柱，根據(jù)保留時(shí)間，截取環(huán)維黃楊星D色譜峰溶液，濃縮干燥，得到上述試驗(yàn)藥物原料(原料中的其余為未知雜質(zhì))。試驗(yàn)藥物2組:環(huán)維黃楊星D含量82.4%，環(huán)原黃楊堿C含量17.5 %，其余0.1 %。制備高效液相色譜法:流動(dòng)相為lOmmol/L甲酸銨:乙腈(8: 92)，用蒸發(fā)光散射檢測(cè)器檢測(cè)。精密稱取約IOmg環(huán)維黃楊星D對(duì)照品至25mL量瓶中，加5mL三氯甲烷溶解，再用乙腈稀釋至刻度，作為環(huán)維黃楊星D對(duì)照品母液，將該母液用乙腈依次稀釋成每ImL約含環(huán)維黃楊星D為I μ g、2 μ g、5 μ g、10 μ g和20 μ g的環(huán)維黃楊星D對(duì)照品溶液；精密稱取約IOmg環(huán)原黃楊堿C對(duì)照品，置25mL量瓶中，加三氯甲烷溶解并稀釋至刻度，作為環(huán)原黃楊堿C對(duì)照品母液,將該母液用乙腈依次稀釋成每ImL約含環(huán)原黃楊堿C為1μ g、2y g、5y g、10 μ g和20 μ g的環(huán)原黃楊堿C對(duì)照品溶液；分別精密量取環(huán)維黃楊星D對(duì)照品溶液、環(huán)原黃楊堿C對(duì)照品溶液各20 μ L，注入色譜儀，記錄保留時(shí)間。樣品制備:取含有環(huán)維黃楊星D藥物原料(環(huán)維黃楊星D含量為72.3% ),加入流動(dòng)相，溶解完全，用二醇基鍵合硅膠制備液相柱，根據(jù)保留時(shí)間，截取環(huán)維黃楊星D和環(huán)原黃楊堿C色譜峰溶液，濃縮干燥，得到上述試驗(yàn)藥物原料(原料中的其余為未知雜質(zhì))。
試驗(yàn)藥物3組:環(huán)維黃楊星D含量93.5 %，環(huán)原黃楊堿C含量6.3 %，其余0.2 %。
制備高效液相色譜法:流動(dòng)相為lOmmol/L甲酸銨:乙腈(8: 92)，用蒸發(fā)光散射檢測(cè)器檢測(cè)。精密稱取約IOmg環(huán)維黃楊星D對(duì)照品至25mL量瓶中，加5mL三氯甲烷溶解，再用乙腈稀釋至刻度，作為環(huán)維黃楊星D對(duì)照品母液，將該母液用乙腈依次稀釋成每ImL約含環(huán)維黃楊星D為I μ g、2 μ g、5 μ g、10 μ g和20 μ g的環(huán)維黃楊星D對(duì)照品溶液；精密稱取約IOmg環(huán)原黃楊堿C對(duì)照品，置25mL量瓶中，加三氯甲烷溶解并稀釋至刻度，作為環(huán)原黃楊堿C對(duì)照品母液,將該母液用乙腈依次稀釋成每ImL約含環(huán)原黃楊堿C為1μ g、2y g、5y g、10 μ g和20 μ g的環(huán)原黃楊堿C對(duì)照品溶液；分別精密量取環(huán)維黃楊星D對(duì)照品溶液、環(huán)原黃楊堿C對(duì)照品溶液各20 μ L，注入色譜儀，記錄保留時(shí)間。樣品制備:取含有環(huán)維黃楊星D藥物原料(環(huán)維黃楊星D含量為82.9% ),加入流動(dòng)相，溶解完全，用二醇基鍵合硅膠制備液相柱，根據(jù)保留時(shí)間，截取環(huán)維黃楊星D和環(huán)原黃楊堿C色譜峰溶液，濃縮干燥，得到上述試驗(yàn)藥物原料(原料中的其余為未知雜質(zhì))。注:含量小于90%環(huán)維黃楊星D的藥物原料，購(gòu)自成都瑞芬思生物科技有限公司。上述試驗(yàn)藥物組原料2g，臨用前加入2000ml注射用水，用三羥甲基氨基甲烷-鹽酸緩沖液調(diào)節(jié)PH值5.5，滅菌后備用?？瞻讓?duì)照組，加注射用水，用等體積的三羥甲基氨基甲烷-鹽酸緩沖液，混合完全，備用。試驗(yàn)試劑:20%烏拉坦按；碘酒；試劑盒；1% TTC0
試驗(yàn)儀器:呼吸機(jī)；心電圖機(jī)；眼科鑷；全自動(dòng)生化分析儀；數(shù)碼相機(jī)。試驗(yàn)方法:將大鼠隨機(jī)分組:空白對(duì)照組、試驗(yàn)藥物組。置于相同環(huán)境預(yù)飼養(yǎng)2天，自由飲食。預(yù)飼養(yǎng)結(jié)束后，進(jìn)行試驗(yàn)，動(dòng)物稱重，20%烏拉坦按0.6ml/100g腹腔注射，待麻醉滿意后，仰臥固定于鼠板上，氣管插管，接呼吸機(jī)，按10 12ml潮氣量，70次/分的頻率給予呼氣，持續(xù)正壓呼吸，吸:呼比為1:1。根據(jù)呼吸頻率及深度調(diào)整呼吸參數(shù)。隨后接心電圖機(jī)，測(cè)正常心電圖。剪去胸前手術(shù)區(qū)毛，碘酒消毒，剪開(kāi)皮膚、皮下組織、胸前肌肉及筋膜3 4cm，用18#血管鉗沿第三肋間鈍性分離肋間肌3cm長(zhǎng)，打開(kāi)胸腔及心包膜，記錄心電圖，撐開(kāi)3、4肋骨，用左手四指托住大鼠右側(cè)胸腔，助手用眼科鑷將胸腺向上推，在左心耳與肺動(dòng)脈圓錐之間找到結(jié)扎標(biāo)志血管左冠狀靜脈，在左心耳下方2_處用無(wú)創(chuàng)小圓針帶6-0絲線穿線,進(jìn)針深度為I 1.5mm,寬2 3mm,穿線后記錄心電圖,經(jīng)尾靜脈給藥,給藥量為0.2mg/kg，給藥IOmin后記錄心電圖，并用一帶凹槽的小塑料管墊在結(jié)扎部位，兩端線頭在其上結(jié)扎。結(jié)扎后即刻記錄心電圖，以左室前壁呈紫紺或II導(dǎo)聯(lián)S-T段弓背向上抬高大于0.1mv并持續(xù)0.5h以上為結(jié)扎成功標(biāo)志(S-T段無(wú)改變者淘汰)。結(jié)扎后IOmin再次記錄心電圖，結(jié)扎30min后剪開(kāi)結(jié)扎線，實(shí)現(xiàn)再灌注，并記錄再灌注即刻心電圖，清除胸腔內(nèi)積血后逐層縫合胸壁，撤呼吸機(jī)，動(dòng)物恢復(fù)自主呼吸，氣管切口不做處理。再灌即刻、10min、20min、40min、lh、2h、3h分別記錄心電圖。將心臟在冰箱中冷凍IOmin后，自心尖向心底平行房室溝方向?qū)⒆笫仪谐上嗟群穸鹊?片，放入1% TTC染液中，37°C染色lOmin，未壞死區(qū)為暗紅色，壞死區(qū)呈灰白色。數(shù)碼相機(jī)拍照。將壞死區(qū)和非壞死區(qū)分別稱重，計(jì)算壞死區(qū)占左心室重量的百分比，即梗死范圍。
權(quán)利要求
1.一種藥物原料，其特征在于藥物原料中包括環(huán)維黃楊星D和環(huán)原黃楊堿C。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種藥物原料，其中環(huán)維黃楊星D重量含量大于等于90.0%且小于100%,環(huán)原黃楊堿C重量含量大于0.5%且小于10%。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種藥物原料，其中環(huán)維黃楊星D重量含量為大于90.0%且小于95%,環(huán)原黃楊堿C重量含量為大于5%且小于10%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種藥物原料，其中環(huán)維黃楊星D重量含量為大于95.0%且小于99.0%,環(huán)原黃楊堿C重量含量為大于1.0%且小于5.0%。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的一種藥物原料制備成的藥物制劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的藥物原料在制備治療冠心病、心絞痛藥物中的應(yīng)用。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的藥物原料在制備治療心律失常藥物中的應(yīng)用。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述一種藥物原料制備成的藥物制劑，其中藥物制劑包括口服制劑和注射制劑。
9.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種藥物原料制備成的藥物制劑，其中藥物制劑包括片劑、膠囊劑、水針劑、輸液劑或粉針劑。
10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的一種藥物原料制備成的藥物制劑，其中水針劑組成為環(huán)維黃楊星D原料1-3重量份，三羥甲基氨基甲烷-鹽酸緩沖液；其中粉針劑組成為環(huán)維黃楊星D原料1-3重量份，甘露醇40-60重量份，三羥甲基氨基甲烷-鹽酸緩沖液。
全文摘要
本發(fā)明屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域，本發(fā)明公開(kāi)了一種中藥原料及制劑和用途，其中藥物原料包括環(huán)維黃楊星D和環(huán)原黃楊堿C。通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，環(huán)維黃楊星D原料中環(huán)原黃楊堿C的含量在一定范圍內(nèi)，該原料的腎毒性顯著降低；藥效學(xué)試驗(yàn)表明，本發(fā)明環(huán)維黃楊星D藥物原料具有很好的治療心絞痛、冠心病、心律失常等作用。
文檔編號(hào)A61P9/10GK103191130SQ20131012153
公開(kāi)日2013年7月10日 申請(qǐng)日期2013年4月10日 優(yōu)先權(quán)日2013年4月10日
發(fā)明者曹捷, 高帆, 周戰(zhàn), 尚磊 申請(qǐng)人:西藏易明西雅生物醫(yī)藥科技有限公司