專利名稱：：一種氯法拉濱凍干粉針劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明一種氯法拉濱凍干粉針劑及其制備方法涉及的是一種氯法拉濱的凍干制劑及其制備方法，通過(guò)本發(fā)明技術(shù)方案制備的氯法拉濱凍干粉針劑用于治療復(fù)發(fā)和難治的兒童急性淋巴細(xì)胞白血病。技術(shù)背景白血病是血液系統(tǒng)的惡性腫瘤，發(fā)病率約2-4/10萬(wàn)人口，小兒白血病居小兒各種惡性腫瘤的首位。好發(fā)年齡從出生到14歲，波及整個(gè)小兒年齡時(shí)期，但以2-5歲多見(jiàn)。是15歲以下兒童主要死亡原因之一。根據(jù)發(fā)病的急緩、臨床、血液及骨髓表現(xiàn)等，一般分為急性與慢性。其中，以急性白血病為主，占小兒白血病總數(shù)的97%。急性白血病又可分為急性淋巴細(xì)胞白血病及急性非淋巴細(xì)胞白血病。前者占70-85%，白血病在我國(guó)和世界各地都不少見(jiàn)。在我國(guó)各種惡性腫瘤死亡率中居第六或第七位?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)對(duì)小兒白血病的治療已經(jīng)有相當(dāng)?shù)乃?，一般情況下，急性髓系白血病完全緩解率為60%,成人急性淋巴細(xì)胞性白血病完全緩解率可達(dá)70%,兒童急性淋巴細(xì)胞白血病完全緩解率可達(dá)90%。緩解期大多無(wú)癥狀，?？烧９ぷ骱蜕睿熅徑夂笠讖?fù)發(fā)、病情惡化、免疫力破壞、全身衰竭，二次化療白細(xì)胞產(chǎn)生耐藥，給治療帶來(lái)難度，這種病人生存期大大縮短，急性白血病不治療，一般生存期3-6個(gè)月，慢性粒細(xì)胞白血病生存期一般3-4，年急變后中位生存期只有4個(gè)月。盡管白血病的治療取得了一些進(jìn)步，但抵抗性的形成仍是兒童死于癌癥的主要原因，因此必需尋找新的抗白血病藥物和治療方法。氯法拉濱(clofarabirO,由美國(guó)阿拉巴馬州伯明翰市南方研究所研制，并授權(quán)英國(guó)Bioenvision公司和美國(guó)LLexOncology公司共同開發(fā)。經(jīng)多項(xiàng)臨床研究表明，氯法拉濱對(duì)兒童急性淋巴細(xì)胞白血病(ALL)和急性髓系白血病(AML)確有較好的療效，可用于頑固性和復(fù)發(fā)性的ALL和AML,且耐受性良好。2004年12月28日己被美國(guó)FDA批準(zhǔn)上市，商品名Clolar，主要用于治療復(fù)發(fā)和難治的ALL。由于氯法拉濱微溶于水，溶解度僅為1.52.0mg/ml，其水溶液在放置過(guò)程中會(huì)有微粒析出。美國(guó)上市制劑Clolar注射液為20mg氯法拉濱溶于20ml注射用水中，并用氯化鈉調(diào)節(jié)等滲，靜脈輸注前需先用0.2"01微孔濾膜過(guò)濾，再用5%葡萄糖輸液或0.9%氯化鈉輸液稀釋，給臨床應(yīng)用帶來(lái)了很大不便。另外，國(guó)外注射液采用西林瓶分裝20ml氯法拉濱溶液再滅菌的制劑工藝，由于西林瓶壁較普通安瓿厚很多，傳熱差，20ml又屬于較大的體積，要保證分裝的氯法拉濱溶液無(wú)菌需要較高滅菌竭度，過(guò)高的滅菌溫度除使受熱易變形鋁塑組合蓋存在變形的可能，還有可能使氯法拉濱發(fā)生降解。同時(shí)，氯法拉濱的溶解度受溫度影響明顯，在冬季氣候很冷的北方地區(qū)的儲(chǔ)存過(guò)程中就有可能析出，導(dǎo)致藥物的浪費(fèi)甚至對(duì)臨床用藥安全帶來(lái)隱患。因此，如何制備溶解性和穩(wěn)定性更好的氯法拉濱注射劑一直是人們?cè)噲D解決的問(wèn)題。中國(guó)專利200610038329.2，200610045474.3及200610038023.7提出了在處方中加入大劑量的增溶劑或者用特定的酸提高氯法拉濱溶解度的制劑方案，但眾所周知，增溶劑吐溫、聚乙二醇、泊洛沙姆、丙二醇和聚氧乙烯蓖麻油等都有一定的溶血性，有的增溶劑如聚氧乙烯蓖麻油還會(huì)引起嚴(yán)重的過(guò)敏反應(yīng)，加入過(guò)多的酸會(huì)增加注射液對(duì)人體的刺激性，引發(fā)的疼痛往往需要額外加入苯甲醇。這些制劑方案在解決原制劑缺陷的同時(shí)帶來(lái)了新的缺陷，其他公知技術(shù)也沒(méi)有改善這些缺陷的建議。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是針對(duì)以上不足之處提供一種氯法拉濱凍干粉針劑，通過(guò)該方案制備的氯法拉濱凍干粉針劑，不需要加入增溶劑，也不需要用過(guò)量的酸來(lái)提高氯法拉濱溶解度，具有最小的人體刺激性和最大的臨床用藥安全性，采用非最終滅菌的無(wú)菌過(guò)濾工藝作為無(wú)菌保障，不需高溫滅菌，也沒(méi)有高溫滅菌帶來(lái)的鋁塑組合蓋存變形和氯法拉濱的降解，臨床使用方便，復(fù)溶迅速，穩(wěn)定性好，不會(huì)析出。要想解決國(guó)外氯法拉濱注射液靜脈高溫滅菌時(shí)鋁塑組合蓋可能變形、氯法拉濱可能降解以及儲(chǔ)存過(guò)程中可能析出導(dǎo)致的藥物浪費(fèi)和臨床用藥安全隱患等問(wèn)題，最好的辦法就是將氯法拉濱制成凍干制劑。通常的，將溶解性差的藥物制備成凍干制劑，公知技術(shù)往往是采用加入表面活性劑等增溶劑以及用輔料對(duì)藥物進(jìn)行包裹等手段增溶，這類方法往往帶來(lái)溶血和過(guò)敏反應(yīng)，用輔料對(duì)藥物進(jìn)行包裹還會(huì)改變藥物的體內(nèi)行為；或者是將溶液調(diào)節(jié)到溶解性能最佳的酸堿度，這類方法有可能超出人體的酸堿耐受限度而導(dǎo)致較大的刺激和疼痛；又或者是配備適宜的專用溶劑，這類方法使得生產(chǎn)和包裝成本大大增加，臨床使用變得不便，專用溶劑中含有的許多有機(jī)溶劑同時(shí)還會(huì)導(dǎo)致溶血和刺激性。經(jīng)過(guò)研究認(rèn)為，氯法拉濱制成凍干的主要困難是如何將氯法拉濱溶解在適宜凍干的體積的溶液中(解決氯法拉濱溶解性差的問(wèn)題)，如何防止灌裝于西林瓶中的氯法拉濱溶液在凍干過(guò)程中析出導(dǎo)致分層(解決氯法拉濱溶解度受溫度影響明顯低溫易析出的問(wèn)題)，以及凍干成形后復(fù)溶的問(wèn)題。通過(guò)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，采用適當(dāng)?shù)捏w積，這個(gè)體積通常是8~14ml，可以保證氯法拉濱溶液在灌裝過(guò)程中不會(huì)析出，但凍干過(guò)程中氯法拉濱在溶液完全固化之前便幾乎全部析出，凍干后不成形，加入20ml注射用水也無(wú)法復(fù)溶。進(jìn)一步的試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，每支加入適量的甘露醇或乳糖，可以減緩氯法拉濱從溶液析出，但凍干過(guò)程中氯法拉濱在溶液完全固化之前仍大量析出，凍干后分層，加入20ml注射用水也無(wú)法復(fù)溶。最后，本發(fā)明研究發(fā)現(xiàn)，氯法拉濱凍干無(wú)法復(fù)溶不是溶解度不夠，而是采用普通方法凍干所得粉末溶解速度過(guò)于緩慢所至。通過(guò)試驗(yàn)，將氯法拉濱輕微加熱溶解于注射用水(814ml/支)中，再加入不低于200mg/支的甘露醇或乳糖，攪拌使其溶解并混合均勻，濾液灌裝于25ml或30ml西林瓶中，部分塞上丁基橡膠塞，裝盤，預(yù)先開啟凍干機(jī)，利用導(dǎo)熱油對(duì)板層制冷，直至板層溫度達(dá)到"4045'C，迅速將灌裝于無(wú)菌西林瓶中的氯法拉濱溶液送入凍干機(jī)，關(guān)閉箱門，并保持板層溫度"40^45'C使品溫下降，當(dāng)樣品達(dá)到4(TC時(shí)，停止板冷，開啟冷凝器，同時(shí)利用摻冷繼續(xù)保持該品溫3小時(shí)，當(dāng)冷凝器溫度達(dá)4(TC時(shí)，開啟真空系統(tǒng)，保溫結(jié)束后開始分階段升溫升華，第一階段升華迅速將板層溫度升至-10°C，其間將前箱真空控制在1520Pa之間，當(dāng)品溫達(dá)到-2(TC時(shí)開始第二階段升華，迅速將板層溫度升至IO'C，其間將前箱真空控制在1520Pa之間，當(dāng)品溫達(dá)到O'C時(shí)開始第三階段升華，迅速將板層溫度升至35'C，其間將前箱真空控制在1015Pa之間，當(dāng)品溫達(dá)到30'C開始解析干燥，真空不控制，保持該溫度3小時(shí)，當(dāng)關(guān)閉中隔閥前箱真空無(wú)明顯下降后后，壓塞，出箱，軋口，質(zhì)檢，包裝即得氯法拉濱凍干粉針劑。所得的氯法拉濱凍干粉針凍干過(guò)程中無(wú)氯法拉濱析出，凍干后成形良好，獲得了溶解性能較常規(guī)凍干結(jié)晶優(yōu)良的晶型，因而加入注射用水迅速?gòu)?fù)溶，徹底解決了氯法拉濱注射劑的上述問(wèn)題。一種氯法拉濱凍干粉針劑及其制備方法是采用以下方案實(shí)現(xiàn)的一種氯法拉濱凍干粉針劑，含有活性成分氯法拉濱以及至少一種生物可接受的賦形劑，氯法拉濱和生物可接受的賦形劑的重量配比為1:1050。所述的氯法拉濱和生物可接受的賦形劑的重量配比優(yōu)選為1:15~30。所述的氯法拉濱的化學(xué)名稱為2-氯-9-(2-去氧-2-氟-e-0-阿拉伯呋喃)-'犯-嘌呤-6-胺，結(jié)構(gòu)式為所述的生物可接受的賦形劑選自甘露醇和乳糖中的一種，優(yōu)選的是甘露醇。一種氯法拉濱凍干粉針劑的制備方法，其特征在于其制備方法為取氯法拉濱置無(wú)菌容器中，加入注射用水，輕微加熱使溶解，再加入賦形劑，攪拌使其溶解并混合均勻，測(cè)定中間體含量，合格后在無(wú)菌條件下，用0.22ym微孔濾膜過(guò)濾至澄明，濾液灌裝于無(wú)菌的西林瓶中，部分塞上丁基橡膠塞，裝盤，預(yù)先開啟凍干機(jī)，利用導(dǎo)熱油對(duì)板層制冷，直至板層溫度達(dá)到4045'C，迅速將灌裝于無(wú)菌西林瓶中的氯法拉濱溶液送入凍干機(jī)，關(guān)閉箱門，并保持板層溫度"4045TM吏品溫下降，當(dāng)祥品達(dá)到40'C時(shí)，停止板冷，開啟冷凝器，同時(shí)利用摻冷繼續(xù)保持該品溫3小時(shí)，當(dāng)冷凝器溫度達(dá)-40'C時(shí)，開啟真空系統(tǒng)，保溫結(jié)束后開始分階段升溫升華，第一階段升華迅速將板層溫度升至-IO'C，其間將前箱真空控制在1520Pa之間，當(dāng)品溫達(dá)到-2(TC時(shí)開始第二階段升華，迅速將板層溫度升至l(TC，其間將前箱真空控制在1520Pa之間，當(dāng)分子式為C1()HC1FN503分子量為303.7品溫達(dá)到O'C時(shí)開始第三階段升華，迅速將板層溫度升至35。C，其間將前箱真空控制在1015Pa之間，當(dāng)品溫達(dá)到3(TC開始解析干燥，真空不控制，保持該溫度35小時(shí)，當(dāng)關(guān)閉中隔閥前箱真空無(wú)明顯下降后后，壓塞，出箱，軋口，質(zhì)檢，包裝；所述的氯法拉濱和生物可接受的賦形劑的重量配比為1:1050,優(yōu)選的是l:1530。所述的生物可接受的賦形劑選自甘露醇和乳糖中的一種，優(yōu)選的是甘露醇。所述的氯法拉濱和注射用水的重量配比為1:400700，優(yōu)選的是l:500。所述的西林瓶體積選自25ml和30ml。所述的氯法拉濱凍干粉針劑，在使用大劑量甘露醇作為賦形劑時(shí)，還可以加入氯化鈉以防止內(nèi)容物在-20-25'C因氫鍵斷裂急劇膨脹導(dǎo)致的炸瓶。所述氯化鈉占所述凍干粉針劑重量的1~5%。本發(fā)明一種氯法拉濱凍干粉針劑，通過(guò)該方案不需要加入增溶劑，沒(méi)有增溶劑吐溫、聚乙二醇、泊洛沙姆、丙二醇和聚氧乙烯蓖麻油等帶來(lái)的溶血性和過(guò)敏反應(yīng)，也不需要用過(guò)量的酸來(lái)提高氯法拉濱溶解度，避免了加入過(guò)多的酸引發(fā)刺激性和疼痛。由于采用的都是最常規(guī)的安全性有充分保證的注射級(jí)輔料，因而有最小的人體刺激性和最大的臨床用藥安全性。采用非最終滅菌的無(wú)菌過(guò)濾工藝作為無(wú)菌保障，不需高溫滅菌，避免了高溫滅菌帶來(lái)的鋁塑組合蓋存變形和氯法拉濱的降解。采用特殊的凍干工藝，凍干過(guò)程中無(wú)氯法拉濱析出，凍干后成形良好，獲得了溶解性能較常規(guī)凍干結(jié)晶優(yōu)良的晶型，復(fù)溶迅速，穩(wěn)定性好，復(fù)溶輸液不會(huì)析出，臨床使用方便。本發(fā)明大大提高了氯法拉濱凍干粉針劑在制備過(guò)程中的穩(wěn)定性，制備所得的氯法拉濱凍干粉針劑有關(guān)物質(zhì)含量更低，質(zhì)量均一穩(wěn)定，貯存和運(yùn)輸更加方便。本發(fā)明制備工藝簡(jiǎn)單，方便可行，重復(fù)性好，很容易實(shí)現(xiàn)工業(yè)化大生產(chǎn)，凍干時(shí)間短，廢品率低，燈檢剔廢難度低，節(jié)約人力，較短的生產(chǎn)周期、較低的廢品率和更低的人力成本，使生產(chǎn)成本大幅度降低，作為復(fù)發(fā)和難治的兒童急性淋巴細(xì)胞白血病臨床治療的又一個(gè)可靠選擇，可以產(chǎn)生可觀的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益。具體實(shí)施方式下面通過(guò)實(shí)施例來(lái)進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明。應(yīng)該正確理解的是本發(fā)明的實(shí)施例僅僅是用于說(shuō)明本發(fā)明而給出，而不是對(duì)本發(fā)明的限制，所以，在本發(fā)明的方法前提下對(duì)本發(fā)明的簡(jiǎn)單改進(jìn)均屬本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。實(shí)施例l:普通方法制備氯法拉濱凍干粉針劑(-25'C)處方氯法拉濱20g甘露醇500g注射用水.加至15000ml共制成1000瓶取處方量氯法拉濱置容器中，加80%量的注射用水，攪拌使其溶解并混合均勻，再加入處方量甘露醇，攪拌使其溶解并混合均勻，測(cè)定中間體含量，合格后加入注射用水定容至全量，在無(wú)菌條件下，用0.22ym微孔濾膜過(guò)濾至澄明，濾液灌裝于無(wú)菌的西林瓶中，部分塞上丁基橡膠塞，裝盤，送入凍干機(jī)，關(guān)閉箱門，開啟凍干機(jī)，利用導(dǎo)熱油對(duì)板層制冷，使品溫下降，當(dāng)樣品達(dá)到共熔點(diǎn)時(shí)(約-IO'C)，繼續(xù)冷凍至品溫低于-25'C時(shí)，停止板冷，開啟冷凝器，當(dāng)冷凝器溫度達(dá)"4(TC時(shí)，開啟真空系統(tǒng)，開始升溫升華，品溫控制在每小時(shí)上升23'C,當(dāng)品溫升達(dá)IO'C以上時(shí)，使品溫每小時(shí)上升45'C，最后干燥溫度品溫為35'C，保持該溫度3小時(shí)后，壓塞，出箱，軋口。在凍干過(guò)程中通過(guò)觀察窗發(fā)現(xiàn)氯法拉濱在預(yù)凍階段溶液完全固化之前大量析出，凍干后所得氯法拉濱凍干粉針劑分層，加入20ml注射用水無(wú)法復(fù)溶。有極少量炸瓶。實(shí)施例2:普通方法制備氯法拉濱凍干粉針劑("40'C)處方氯法拉濱20g甘露醇800g注射用水加至15000ml共制成1000瓶取處方量氯法拉濱置容器中，加80%量的注射用水，攪拌使其溶解并混合均勻，再加入處方量甘露醇，攪拌使其溶解并混合均勻，測(cè)定中間體含量，合格后加入注射用水定容至全量，在無(wú)菌條件下，用0.22"m微孔濾膜過(guò)濾至澄明，濾液灌裝于無(wú)菌的西林瓶中，部分塞上丁基橡膠塞，裝盤，送入凍干機(jī)，關(guān)閉箱門，開啟凍千機(jī)，利用導(dǎo)熱油對(duì)板層制冷，使品溫下降，當(dāng)樣品達(dá)到共熔點(diǎn)時(shí)(約-l(TC)，繼續(xù)冷凍至品溫低于4(TC時(shí)，停止板冷，開啟冷凝器，當(dāng)冷凝器溫度達(dá)"40'C時(shí)，開啟真空系統(tǒng)，開始升溫升華，品溫控制在每小時(shí)上升23'C，當(dāng)品溫升達(dá)IO'C以上時(shí)，使品溫每小時(shí)上升45°C,最后干燥溫度品溫為35'C，保持該溫度3小時(shí)后，壓塞，出箱，軋口。在凍干過(guò)程中通過(guò)觀察窗發(fā)現(xiàn)氯法拉濱在預(yù)凍階段溶液完全固化之前大量析出，凍干后所得氯法拉濱凍干粉針劑分層，加入20ml注射用水無(wú)法復(fù)溶。有少量炸瓶。實(shí)施例3:處方氯法拉濱20g甘露醇200g注射用水加至8000m共制成1000瓶取處方量氯法拉濱置無(wú)菌容器中，加入注射用水，輕微加熱使溶解，再加入處方量甘露醇，攪拌使其溶解并混合均勻，測(cè)定中間體含量，合格后在無(wú)菌條件下，用0.22nm微孔濾膜過(guò)濾至澄明，濾液灌裝于無(wú)菌的25ml西林瓶中，部分塞上丁基橡膠塞，裝盤，預(yù)先開啟凍干機(jī)，利用導(dǎo)熱油對(duì)板層制冷，直至板層溫度達(dá)到"4045'C，迅速將灌裝于無(wú)菌西林瓶中的氯法拉濱溶液送入凍干機(jī)，關(guān)閉箱門，并保持板層溫度"4045'C使品溫下降，當(dāng)樣品達(dá)到"40'C時(shí)，停止板冷，開啟冷凝器，同時(shí)利用摻冷繼續(xù)保持該品溫3小時(shí)，當(dāng)冷凝器溫度達(dá)40。C時(shí)，開啟真空系統(tǒng)，保溫結(jié)束后開始分階段升溫升華，第一階段升華迅速將板層溫度升至-10'C，其間將前箱真空控制在1520Pa之間，當(dāng)品溫達(dá)到-2(TC時(shí)開始第二階段升華，迅速將板層溫度升至IO'C,其間將前箱真空控制在1520Pa之間，當(dāng)品溫達(dá)到O'C時(shí)開始第三階段升華，迅速將板層溫度升至35°C，其間將前箱真空控制在1015Pa之間，當(dāng)品溫達(dá)到3(TC開始解析干燥，真空不控制，保持該溫度3小時(shí)，當(dāng)關(guān)閉中隔閥前箱真空無(wú)明顯下降后后，壓塞，出箱，軋口，質(zhì)檢，包裝即得氯法拉濱凍干粉針劑。在凍干過(guò)程中通過(guò)觀察窗發(fā)現(xiàn)在預(yù)凍階段溶液完全固化之前無(wú)析氯法拉濱出，凍干后所得氯法拉濱凍干粉針劑外形良好，加入20ml注射用水迅速?gòu)?fù)溶。無(wú)炸瓶。實(shí)施例4:處方氯法拉濱20g乳糖200g注射用水加至8000ml共制成1000瓶取處方量氯法拉濱置無(wú)菌容器中，加入注射用水，輕微加熱使溶解，再加入處方量乳糖，攪拌使其溶解并混合均勻，測(cè)定中間體含量，合格后在無(wú)菌條件下，用0.22um微孔濾膜過(guò)濾至澄明，濾液灌裝于無(wú)菌的25ml西林瓶中，部分塞上丁基橡膠塞，裝盤，預(yù)先開啟凍干機(jī)，利用導(dǎo)熱油對(duì)板層制冷，直至板層溫度達(dá)到40^45°C，迅速將灌裝于無(wú)菌西林瓶中的氯法拉濱溶液送入凍干機(jī)，關(guān)閉箱門，并保持板層溫度"40^45'C使品溫下降，當(dāng)樣品達(dá)到"4(TC時(shí)，停止板冷，開啟冷凝器，同時(shí)利用摻冷繼續(xù)保持該品溫3小時(shí)，當(dāng)冷凝器溫度達(dá)40'C時(shí)，開啟真空系統(tǒng)，保溫結(jié)束后開始分階段升溫升華，第一階段升華迅速將板層溫度升至-10'C，其間將前箱真空控制在1520Pa之間，當(dāng)品溫達(dá)到-2(TC時(shí)開始第二階段升華，迅速將板層溫度升至l(TC，其間將前箱真空控制在1520Pa之間，當(dāng)品溫達(dá)到0。C時(shí)開始第三階段升華，迅速將板層溫度升至35'C，其間將前箱真空控制在1015Pa之間，當(dāng)品溫達(dá)到30'C開始解析干燥，真空不控制，保持該溫度3小時(shí)，當(dāng)關(guān)閉中隔閥前箱真空無(wú)明顯下降后后，壓塞，出箱，軋口，質(zhì)檢，包裝即得氯法拉濱凍干粉針劑。在凍干過(guò)程中通過(guò)觀察窗發(fā)現(xiàn)在預(yù)凍階段溶液完全固化之前無(wú)析氯法拉濱出，凍干后所得氯法拉濱凍干粉針劑外形良好，加入20ml注射用水迅速?gòu)?fù)溶。實(shí)施例5:處方氯法拉濱20g甘露醇500g注射用水加至10000ml共制成1000瓶取處方量氯法拉濱置無(wú)菌容器中，加入注射用水，輕微加熱使溶解，再加入處方量甘露醇，攪拌使其溶解并混合均勻，測(cè)定中間體含量，合格后在無(wú)菌條件下，用0.22Pm微孔濾膜過(guò)濾至澄明，濾液灌裝于無(wú)菌的30ml西林瓶中，部分塞上丁基橡膠塞，裝盤，預(yù)先開啟凍干機(jī)，利用導(dǎo)熱油對(duì)板層制冷，直至板層溫度達(dá)到"4045t:，迅速將灌裝于無(wú)菌西林瓶中的氯法拉濱溶液送入凍干機(jī)，關(guān)閉箱門，并保持板層溫度"4045'C使品溫下降，當(dāng)樣品達(dá)到40'C時(shí)，停止板冷，開啟冷凝器，同時(shí)利用摻冷繼續(xù)保持該品溫3小時(shí)，當(dāng)冷凝器溫度達(dá)40'C時(shí)，開啟真空系統(tǒng)，保溫結(jié)束后開始分階段升溫升華，第一階段升華迅速將板層溫度升至-1(TC，其間將前箱真空控制在1520Pa之間，當(dāng)品溫達(dá)到-2(TC時(shí)開始第二階段升華，迅速將板層溫度升至IO'C，其間將前箱真空控制在1520Pa之間，當(dāng)品溫達(dá)到O'C時(shí)開始第三階段升華，迅速將板層溫度升至35°C，其間將前箱真空控制在1015Pa之間，當(dāng)品溫達(dá)到30'C開始解析干燥，真空不控制，保持該溫度4小時(shí)，當(dāng)關(guān)閉中隔閥前箱真空無(wú)明顯下降后后，壓塞，出箱，軋口，質(zhì)檢，包裝即得氯法拉濱凍干粉針劑。在凍干過(guò)程中通過(guò)觀察窗發(fā)現(xiàn)在預(yù)凍階段溶液完全固化之前無(wú)析氯法拉濱出，凍千后所得氯法拉濱凍干粉針劑外形良好，加入20ml注射用水迅速?gòu)?fù)溶。有極少量炸瓶。實(shí)施例6:處方氯法拉濱20g甘露醇500g氯化鈉25g注射用水加至10000ml共制成1000瓶取處方量氯法拉濱置無(wú)菌容器中，加入注射用水，輕微加熱使溶解，再加入處方量甘露醇和氯化鈉，攪拌使其溶解并混合均勻，測(cè)定中間體含量，合格后在無(wú)菌條件下，用0.22um微孔濾膜過(guò)濾至澄明，濾液灌裝于無(wú)菌的30ml西林瓶中，部分塞上丁基橡膠塞，裝盤，預(yù)先開啟凍干機(jī)，利用導(dǎo)熱油對(duì)板層制冷，直至板層溫度達(dá)到^045'C,迅速將灌裝于無(wú)菌西林瓶中的氯法拉濱溶液送入凍干機(jī)，關(guān)閉箱門，并保持板層溫度40^45'C使品溫下降，當(dāng)樣品達(dá)到"4(TC時(shí)，停止板冷，開啟冷凝器，同時(shí)利用摻冷繼續(xù)保持該品溫3小時(shí)，當(dāng)冷凝器溫度達(dá)"40'C時(shí)，開啟真空系統(tǒng)，保溫結(jié)束后開始分階段升溫升華，第一階段升華迅速將板層溫度升至-l(TC,其間將前箱真空控制在1520Pa之間，當(dāng)品溫達(dá)到-2(TC時(shí)開始第二階段升華，迅速將板層溫度升至l(TC，其間將前箱真空控制在1520Pa之間，當(dāng)品溫達(dá)到O'C時(shí)開始第三階段升華，迅速將板層溫度升至35'C,其間將前箱真空控制在1015Pa之間，當(dāng)品溫達(dá)到3(TC開始解析干燥，真空不控制，保持該溫度4小時(shí)，當(dāng)關(guān)閉中隔閥前箱真空無(wú)明顯下降后后，壓塞，出箱，軋口，質(zhì)檢，包裝即得氯法拉濱凍干粉針劑。在凍干過(guò)程中通過(guò)觀察窗發(fā)現(xiàn)在預(yù)凍階段溶液完全固化之前無(wú)析氯法拉濱出，凍干后所得氯法拉濱凍干粉針劑外形良好，加入20ml注射用水迅速?gòu)?fù)溶。無(wú)炸瓶。實(shí)施例7:處方氯法拉濱20g甘露醇lOOOg氯化納10g注射用水加至M000ml共制成1000瓶取處方量氯法拉濱置無(wú)菌容器中，加入注射用水，輕微加熱使溶解，再加入處方量甘露醇和氯化納，攪拌使其溶解并混合均勻，測(cè)定中間體含量，合格后在無(wú)菌條件下，用0.22"m微孔濾膜過(guò)濾至澄明，濾液灌裝于無(wú)菌的30ml西林瓶中，部分塞上丁基橡膠塞，裝盤，預(yù)先開啟凍干機(jī)，利用導(dǎo)熱油對(duì)板層制冷，直至板層溫度達(dá)到"40"45'C，迅速將灌裝于無(wú)菌西林瓶中的氯法拉濱溶液送入凍干機(jī)，關(guān)閉箱門，并保持板層溫度~40^45'C使品溫下降，當(dāng)樣品達(dá)到40'C時(shí)，停止板冷，開啟冷凝器，同時(shí)利用摻冷繼續(xù)保持該品溫3小時(shí)，當(dāng)冷凝器溫度達(dá)40'C時(shí)，開啟真空系統(tǒng)，保溫結(jié)束后開始分階段升溫升華，第一階段升華迅速將板層溫度升至-l(TC，其間將前箱真空控制在1520Pa之間，當(dāng)品溫達(dá)到-20'C時(shí)開始第二階段升華，迅速將板層溫度升至IO'C，其間將前箱真空控制在1520Pa之間，當(dāng)品溫達(dá)到0'C時(shí)開始第三階段升華，迅速將板層溫度升至35'C，其間將前箱真空控制在1015Pa之間，當(dāng)品溫達(dá)到30'C開始解析干燥，真空不控制，保持該溫度5小時(shí)，當(dāng)關(guān)閉中隔閥前箱真空無(wú)明顯下降后后，壓塞，出箱，軋口，質(zhì)檢，包裝即得氯法拉濱凍干粉針劑。在凍干過(guò)程中通過(guò)觀察窗發(fā)現(xiàn)在預(yù)凍階段溶液完全固化之前無(wú)析氯法拉濱出，凍干后所得氯法拉濱凍千粉針劑外形良好，加入20ml注射用水迅速?gòu)?fù)溶。無(wú)炸瓶。實(shí)施例8:<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>取處方量氯法拉濱置無(wú)菌容器中，加入注射用水，輕微加熱使溶解，再加入處方量甘露醇和氯化納，攪拌使其溶解并混合均勻，測(cè)定中間體含量，合格后在無(wú)菌條件下，用0.22um微孔濾膜過(guò)濾至澄明，濾液灌裝于無(wú)菌的30ml西林瓶中，部分塞上丁基橡膠塞，裝盤，預(yù)先開啟凍干機(jī)，利用導(dǎo)熱油對(duì)板層制冷，直至板層溫度達(dá)到40~45'C,迅速將灌裝于無(wú)菌西林瓶中的氯法拉濱溶液送入凍干機(jī)，關(guān)閉箱門，并保持板層溫度4045'C使品溫下降，當(dāng)樣品達(dá)到4(TC時(shí)，停止板冷，開啟冷凝器，同時(shí)利用摻冷繼續(xù)保持該品溫3小時(shí)，當(dāng)冷凝器溫度達(dá)4(TC時(shí)，開啟真空系統(tǒng)，保溫結(jié)束后開始分階段升溫升華，第一階段升華迅速將板層溫度升至-10'C，其間將前箱真空控制在1520Pa之間，當(dāng)品溫達(dá)到-2(TC時(shí)開始第二階段升華，迅速將板層溫度升至IO'C，其間將前箱真空控制在1520Pa之間，當(dāng)品溫達(dá)到O'C時(shí)開始第三階段升華，迅速將板層溫度升至35'C，其間將前箱真空控制在1015Pa之間，當(dāng)品溫達(dá)到30'C開始解析干燥，真空不控制，保持該溫度5小時(shí)，當(dāng)關(guān)閉中隔閥前箱真空無(wú)明顯下降后后，壓塞，出箱，軋口，質(zhì)檢，包裝即得氯法拉濱凍干粉針劑。在凍干過(guò)程中通過(guò)觀察窗發(fā)現(xiàn)在預(yù)凍階段溶液完全固化之前無(wú)析氯法拉濱出，凍干后所得氯法拉濱凍干粉針劑外形良好，加入20ml注射用水迅速?gòu)?fù)溶。無(wú)炸瓶。實(shí)施例9:處方氯法拉濱20g乳糖800g注射用水加至10000ml共制成1000瓶取處方量氯法拉濱置無(wú)菌容器中，加入注射用水，輕微加熱使溶解，再加入處方量乳糖，攪拌使其溶解并混合均勻，測(cè)定中間體含量，合格后在無(wú)菌條件下，用0.22ym微孔濾膜過(guò)濾至澄明，濾液灌裝于無(wú)菌的30ml西林瓶中，部分塞上丁基橡膠塞，裝盤，預(yù)先開啟凍干機(jī)，利用導(dǎo)熱油對(duì)板層制冷，直至板層溫度達(dá)到4045t:,迅速將灌裝于無(wú)菌西林瓶中的氯法拉濱溶液送入凍干機(jī)，關(guān)閉箱門，并保持板層溫度"4045'C使品溫下降，當(dāng)樣品達(dá)到"4(TC時(shí)，停止板冷，開啟冷凝器，同時(shí)利用摻冷繼續(xù)保持該品溫3小時(shí)，當(dāng)冷凝器溫度達(dá)一(TC時(shí)，幵啟真空系統(tǒng)，保溫結(jié)束后開始分階段升溫升華，第一階段升華迅速將板層溫度升至-l(TC，其間將前箱真空控制在1520Pa之間，當(dāng)品溫達(dá)到-20'C時(shí)開始第二階段升華，迅速將板層溫度升至l(TC,其間將前箱真空控制在1520Pa之間，當(dāng)品溫達(dá)到O'C時(shí)開始第三階段升華，迅速將板層溫度升至35'C,其間將前箱真空控制在1015Pa之間，當(dāng)品溫達(dá)到30'C開始解析干燥，真空不控制，保持該溫度5小時(shí)，當(dāng)關(guān)閉中隔閥前箱真空無(wú)明顯下降后后，壓塞，出箱，軋口，質(zhì)檢，包裝即得氯法拉濱凍干粉針劑。在凍干過(guò)程中通過(guò)觀察窗發(fā)現(xiàn)在預(yù)凍階段溶液完全固化之前無(wú)析氯法拉濱出，凍干后所得氯法拉濱凍干粉針劑外形良好，加入20ml注射用水迅速?gòu)?fù)溶。實(shí)施例10:氯法拉濱凍干粉針劑有關(guān)物質(zhì)測(cè)定照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2005年版二部)測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅垸鍵合硅膠為填充劑，以乙腈-水(12.5:87.5)為流動(dòng)相；柱溫為35'C，檢測(cè)波長(zhǎng)為263nm。精密稱取氯法拉濱對(duì)照品、a-異構(gòu)體適量，加流動(dòng)相溶解并稀釋制成每lml中各含0.05mg的溶液，精密量取20pl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，氯法拉濱峰與a-異構(gòu)體峰之間分離度符合規(guī)定，理論塔板數(shù)以氯法拉濱峰計(jì)不低于2000。取氯法拉濱凍干粉針劑內(nèi)容物適量，加流動(dòng)相溶解并制成每lml中約含0.5mg的溶液，作為供試品溶液。精密量取lml，置100ml量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照溶液。精密量取對(duì)照溶液20nl，注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度，使氯法拉濱峰的峰高約為滿量程的20%~30%。精密量取供試品溶液和對(duì)照溶液各2(^1，分別注入液相色譜儀，記錄供試品色譜圖至主成分峰保留時(shí)間的45倍。供試品溶液色譜圖中如顯雜質(zhì)峰，量取除輔料峰外各雜質(zhì)峰面積之和，計(jì)算即得氯法拉濱凍干粉針劑有關(guān)物質(zhì)百分含量。實(shí)施例U:氯法拉濱凍干粉針劑含量測(cè)定照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2005年版二部)測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅垸鍵合硅膠為填充劑，以乙腈-水(12.5:87.5)為流動(dòng)相；柱溫為35°C，檢測(cè)波長(zhǎng)為263nm。精密稱取氯法拉濱對(duì)照品、ct-異構(gòu)體適量，加流動(dòng)相溶解并稀釋制成每lml中各含0.05mg的溶液，精密量取20pl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，氯法拉濱峰與a-異構(gòu)體峰之間分離度符合規(guī)定，理論塔板數(shù)以氯法拉濱峰計(jì)不低于2000。取氯法拉濱凍干粉針劑內(nèi)容物，混勻，精密稱取適量，加流動(dòng)相溶解并稀釋成每lml中約含O.Olmg的溶液，精密量取20^1注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取氯法拉濱對(duì)照品適量，加流動(dòng)相稀釋成每lml中含O.Olmg的溶液，同法測(cè)定，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得氯法拉濱凍干粉針劑的含量。實(shí)施例12:氯法拉濱凍干粉針劑水分測(cè)定取氯法拉濱凍干粉針劑內(nèi)容物，照水分測(cè)定法(中國(guó)藥典2005年版二部)測(cè)定。實(shí)施例13:取所述氯法拉濱凍干粉針劑，按實(shí)施例10、實(shí)施例11、及實(shí)施例12進(jìn)行加速(40°C±2°C、RH75%±5%)和長(zhǎng)期(25°C±2°C、RH60%±10%)條件下放置進(jìn)行穩(wěn)定性試驗(yàn)考察，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表l、表2。表1注射用氯法拉濱加速試驗(yàn)考察結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>表2注射用氯法拉濱長(zhǎng)期試驗(yàn)考察結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>定試驗(yàn)結(jié)果表明，所述氯法拉濱凍干粉針劑經(jīng)加速試驗(yàn)(40'C±2°C、RH75%±5%)放置6個(gè)月，經(jīng)長(zhǎng)期試驗(yàn)(25。C±2°C、RH60%±10%)留樣6個(gè)月，各項(xiàng)考察指標(biāo)，包括性狀、溶液的顏色和澄清度、酸度、含量、有關(guān)物質(zhì)、無(wú)菌等與放置前比較均無(wú)明顯變化，質(zhì)量穩(wěn)定可靠。實(shí)施例14:取所述氯法拉濱凍干粉針劑經(jīng)南京醫(yī)科大學(xué)溶血試驗(yàn)，確定氯法拉濱凍干粉針劑在試管內(nèi)終濃度為0.04mg/ml時(shí)對(duì)兔紅細(xì)胞無(wú)溶血現(xiàn)象，臨床使用對(duì)人體不會(huì)造成溶血。實(shí)施例15:取所述氯法拉濱凍干粉針劑經(jīng)南京醫(yī)科大學(xué)豚鼠全身主動(dòng)過(guò)敏試驗(yàn)，未見(jiàn)動(dòng)物有抓鼻、噴嚏、豎毛、抽搐等過(guò)敏癥狀發(fā)生，表明氯法拉濱凍干粉針劑對(duì)豚鼠無(wú)明顯致敏作用。實(shí)施例16:取所述氯法拉濱凍干粉針劑經(jīng)南京醫(yī)科大學(xué)對(duì)兔血管壁刺激試驗(yàn)，肉眼觀察，給藥側(cè)耳緣靜脈未見(jiàn)充血水腫等刺激現(xiàn)象。組織學(xué)檢查顯示，給藥側(cè)靜脈內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)基本完整，無(wú)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)等病理改變。表明氯法拉濱凍干粉針劑對(duì)兔耳緣靜脈無(wú)明顯刺激反應(yīng)。權(quán)利要求1、一種氯法拉濱凍干粉針劑，其特征在于含有活性成分氯法拉濱以及至少一種生物可接受的賦形劑，氯法拉濱和生物可接受的賦形劑的重量配比為1:2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的氯法拉濱凍干粉針劑，其特征在于所述的氯法拉濱和生物可接受的賦形劑的重量配比優(yōu)選為1:15~30。3、根據(jù)權(quán)利要求1所述的氯法拉濱凍干粉針劑，其特征在于所述的氯法拉濱的化學(xué)名稱為2-氯-9-(2-去氧-2-氟-e-D-阿拉伯呋喃)-9H-嘌呤-6-胺，結(jié)構(gòu)式為4、根據(jù)權(quán)利要求1所述的氯法拉濱凍干粉針劑，其特征在于所述的生物可接受的賦形劑選自甘露醇和乳糖中的一種，優(yōu)選的是甘露醇。5、權(quán)利要求1所述的氯法拉濱凍干粉針劑的制備方法，其特征在于其制備方法為取氯法拉濱置無(wú)菌容器中，加入注射用水，輕微加熱使溶解，再加入賦形劑，攪拌使其溶解并混合均勻，測(cè)定中間體含量，合格后在無(wú)菌條件下，用0.22um微孔濾膜過(guò)濾至澄明，濾液灌裝于無(wú)菌的西林瓶中，部分塞上丁基橡膠塞，裝盤，預(yù)先開啟凍干機(jī)，利用導(dǎo)熱油對(duì)板層制冷，直至板層溫度達(dá)到"4045'C，迅速將灌裝于無(wú)菌西林瓶中的氯法拉濱溶液送入凍干機(jī)，關(guān)閉箱門，并保持板層溫度"40^45'C使品溫下降，當(dāng)樣品達(dá)到KTC時(shí)，停止板冷，開啟冷凝1050。分子式為C1QHC1FN503分子量為303.7器，同時(shí)利用摻冷繼續(xù)保持該品溫3小時(shí)，當(dāng)冷凝器溫度達(dá)"4(TC時(shí)，開啟真空系統(tǒng)，保溫結(jié)束后開始分階段升溫升華，第一階段升華迅速將板層溫度升至-10'C，其間將前箱真空控制在1520Pa之間，當(dāng)品溫達(dá)到-20'C時(shí)開始第二階段升華，迅速將板層溫度升至IO'C，其間將前箱真空控制在1520Pa之間，當(dāng)品溫達(dá)到0。C時(shí)開始第三階段升華，迅速將板層溫度升至35'C，其間將前箱真空控制在1015Pa之間，當(dāng)品溫達(dá)到30'C開始解析干燥，真空不控制，保持該溫度35小時(shí)，當(dāng)關(guān)閉中隔閥前箱真空無(wú)明顯下降后后，壓塞，出箱，軋口，質(zhì)檢，包裝；所述的氯法拉濱和生物可接受的賦形劑的重量配比為1:1050，優(yōu)選的是l:1530。6、根據(jù)權(quán)利要求5所述的氯法拉濱凍干粉針劑的制備方法，其特征在于所述的生物可接受的賦形劑選自甘露醇和乳糖中的一種，優(yōu)選的是甘露醇。7、根據(jù)權(quán)利要求5所述的氯法拉濱凍干粉針劑的制備方法，其特征在于所述的氯法拉濱和注射用水的重量配比為1:400700，優(yōu)選的是l:500。8、根據(jù)權(quán)利要求5所述的氯法拉濱凍干粉針劑的制備方法，其特征在于所述的西林瓶體積選自25ml和30ml。9、根據(jù)權(quán)利要求5所述的氯法拉濱凍干粉針劑的制備方法，其特征在于使用甘露醇作為賦形劑時(shí)，還可以加入氯化鈉。10、根據(jù)權(quán)利要求5所述的氯法拉濱凍干粉針劑的制備方法，其特征在于所述氯化鈉占所述凍干粉針劑重量的1~5%。全文摘要本發(fā)明涉及一種氯法拉濱凍干粉針劑及其制備方法，含有氯法拉濱以及至少一種生物可接受的賦形劑，氯法拉濱和賦形劑的重量配比為1∶10～50，所述的賦形劑選自甘露醇和乳糖中的一種，優(yōu)選的是甘露醇。其制備方法為取氯法拉濱加注射用水使溶，再加入賦形劑，攪拌混勻，過(guò)濾，灌裝，部分加塞，裝盤，預(yù)先開啟凍干機(jī)，利用導(dǎo)熱油對(duì)板層制冷，直至板層溫度達(dá)到-40～-45℃，迅速將灌裝于無(wú)菌西林瓶中的氯法拉濱溶液送入凍干機(jī)，關(guān)閉箱門，并保持板層溫度-40～-45℃使品溫下降，當(dāng)樣品達(dá)到-40℃時(shí)，停止板冷，開啟冷凝器，同時(shí)利用摻冷繼續(xù)保持該品溫3小時(shí)，當(dāng)冷凝器溫度達(dá)-40℃時(shí)，開啟真空系統(tǒng)，保溫結(jié)束后開始分四階段升溫升華干燥，壓塞，出箱，軋口。文檔編號(hào)A61P35/00GK101120925SQ20071013090公開日2008年2月13日申請(qǐng)日期2007年8月23日優(yōu)先權(quán)日2007年8月23日發(fā)明者東葉,艷戴,王宏響申請(qǐng)人:江蘇奧賽康藥業(yè)有限公司